大口黑鲈源豚鼠气单胞菌的分离鉴定及全基因组分析

【目的】探究患病大口黑鲈的致病菌及其主要生物学特性,为临床疾病防控提供技术支撑。【方法】首先对发病大口黑鲈进行病理组织学观察,进而利用平板划线法分离细菌,通过革兰染色、生化试验和16S rDNA序列测定对分离菌进行鉴定,通过致病性试验观察分离菌对小鼠主要脏器造成的病理损伤;而后分别利用PCR方法和Kirby-Bauer(K-B)纸片法对分离菌的常见毒力基因和耐药特征进行检测分析;最后利用二代测序技术绘制其全基因组草图,并通过生物信息学方法对其分子特征进行解析。【结果】自然感染大口黑鲈肝细胞肿大,空泡变性,肠黏膜下层出血,肠壁坏死;于患病黑鲈体内分离到1株优势菌,在血平板上呈乳白色,半透明,直径约1 mm的小菌落,呈β溶血,革兰染色为阴性短杆菌,两端钝圆,经生化试验和16S rDNA测序证实分离菌为豚鼠气单胞菌(Aeromonas caviae),将其命名为SCMS。试验小鼠接种后24 h内死亡率为100%,病理特征与自然感染大口黑鲈相似;SCMS株中共检测到9种毒力基因,分别为Aha、Ahp、Aer、Alt、gcaT、Act、Exu、Ela和eprCAI;药敏试验结果显示,分离菌对大多数四环素类、大环内酯类药物表现耐药或中度敏感;全基因组测序显示,分离菌全长4329602 bp,GC含量为61.5%,基因组信息在GenBank中的登录号为JARFUQ000000000,相似性分析显示分离菌与人源、食品源豚鼠气单胞菌具有高度相似性;病原毒力因子数据库(VFDB)比对显示,分离菌携带多种与黏附、侵入及分泌系统相关的毒力基因;耐药基因数据库(CGE)分析显示,菌株中携带7种耐药基因,部分基因与耐药表型存在不一致的现象。【结论】本试验通过全基因组测序技术解析了1株大口黑鲈源豚鼠气单胞菌的毒力基因和耐药基因,其结果可为大口黑鲈临床疾病防控提供技术支撑。

构建园校互动模式 促进中等职业教育内涵发展

巫山县职业教育中心与巫山职业工业园相融合，构建园校互动办学模式。通过建立四个机制，突出五个转变，完善五个统筹，注重三个贴近，培育七个模式，从而突现了八大融合。为职业教育的内涵式为展积累了一定经验。

中等职业学校精品课程建设原则、内容及实施

中等职业学校精品课程建设应坚持引领性、职业性、共享性原则，并配备教学能力强、有一定学术水平的“双师型”教师队伍，构建以职业岗位作业流程为导向的教学模块，建设仿真的实训环境，建立科学合理的课程评价与考核体系。

中等职业学校“园校互动，校企融合”人才培养模式的研究与实践

校企合作是职业院校发展的必由之路,是职业院校人才培养的内在要求,是推动职业院校向前发展的战略引擎。本文总结了"园校互动,校企融合"人才培养模式研究与实践的主要做法、取得的成果、产生的效果,提炼出"十大"融合形式、"十共"运行模式、"八化"教学模式以及运行机制,为全国中等职业教育改革与发展提供了可供借鉴的经验。

鹅星状病毒感染抗体依赖性增强作用

为了探究鹅星状病毒感染是否存在抗体依赖性增强作用,用中和效价为1∶94、1∶141和1∶282共3种不同抗体滴度(低、中、高效价)的鹅星状病毒卵黄抗体分别进行雏鹅保护试验和鹅胚中和试验,同时设空白对照和攻毒对照。结果显示,雏鹅保护试验中抗体效价1∶94组鹅均发病,病死率90%(9/10),1∶141效价组鹅的发病率为30%(3/10),病死率20%(2/10),1∶282效价组鹅无发病及死亡;攻毒对照组鹅100%发病,病死率80%(8/10);1∶94抗体组动物发病时间和死亡时间均早于攻毒对照组;荧光定量PCR检测结果显示1∶94和1∶141抗体效价组Ct值均小于攻毒对照组。鹅胚中和试验结果显示,3个抗体处理组鹅胚病死率分别为100%,20%和0,攻毒和阴性对照组分别为100%和0,1∶94效价组鹅胚死亡时间显著早于攻毒对照组;荧光定量检测结果显示1∶94效价组平均Ct值显著小于1∶141效价组和攻毒对照组。结果说明低中和效价的鹅星状病毒卵黄抗体能增强鹅星状病毒在雏鹅和鹅胚体内的复制能力,发病率和病死率增加,证实鹅星状病毒感染存在抗体依赖性增强作用,其结果可为临床鹅星状病毒病的防控提供理论依据。