黄柏抗痛风活性部位筛选及其对腹膜炎小鼠的保护作用

目的 研究黄柏不同萃取部位抗痛风作用,筛选有效部位并初步探究其作用机制。方法 采用单钠尿酸盐(MSU)诱导小鼠腹腔巨噬细胞及骨髓来源巨噬细胞(BMDM)建立细胞痛风模型,经黄柏不同极性部位给药后,ELISA法检测肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-1β(IL-1β)分泌,从而筛选出活性部位,最后研究活性部位在小鼠体内抗痛风作用及相关机制。结果 黄柏醇提液各萃取部位中,正丁醇部位能降低细胞IL-1β水平和巨噬细胞的吞噬能力(P<0.01),但对TNF-α无明显影响(P>0.05)。与模型组比较,正丁醇部位各剂量组小鼠腹腔灌洗液IL-1β、IL-6水平和中性粒细胞募集程度均降低(P<0.05,P<0.01),其中高剂量组效果最明显,但各给药组TNF-α水平无明显变化(P>0.05)。结论 正丁醇部位为黄柏抗痛风活性部位,其抗痛风机制可能是通过降低细胞吞噬MSU晶体的能力,从而减少IL-1β、IL-6等细胞因子释放,进而减少中性粒细胞募集程度,改善痛风症状。

告达庭对大鼠肝损伤的改善作用机制研究

目的探讨告达庭改善大鼠肝损伤的作用机制。方法将SD大鼠随机分为空白组、模型组和告达庭低、高剂量组(25、50 mg/kg),每组6只。采用腹腔注射(每周3次,连续8周)二乙基亚硝胺(DEN)复制大鼠肝损伤模型。造模第5周,大鼠灌胃相应药物或0.5%羧甲基纤维素钠,连续4周。检测大鼠血清中肝功能指标[丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)、总蛋白(TP)和总胆红素(TBI)]及炎症因子[白细胞介素6(IL-6)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、IL-1β]水平,观察大鼠肝脏组织病理学形态变化,检测肝脏组织中核因子κB(NF-κB)、78 kDa葡糖调节蛋白(Grp78)蛋白阳性表达水平,检测肝脏组织中内质网应激相关蛋白Grp78、C/EBP同源蛋白(CHOP)、转录激活因子6(ATF6)、肌醇需求激酶1α(IRE1α)的表达水平和蛋白激酶R样内质网激酶(PERK)磷酸化水平。结果与空白组比较,模型组大鼠血清中ALT、AST、TBI、IL-6、TNF-α、IL-1β水平和肝脏组织中NF-κB、Grp78蛋白阳性表达水平以及Grp78、CHOP、ATF6、IRE1α蛋白表达水平和PERK蛋白磷酸化水平均显著升高(P<0.05),血清中TP水平显著降低(P<0.05);肝小叶结构紊乱,肝细胞肿胀,细胞间分界不明显,且伴随炎症细胞浸润。与模型组相比,告达庭各剂量组大鼠上述大部分指标显著逆转(P<0.05);肝小叶结构较完整清晰,细胞排列趋整齐,炎症细胞浸润也有所减少。结论告达庭对DEN所致大鼠肝损伤具有明显的改善作用,其作用机制可能与抑制内质网应激和炎症反应有关。

刺五加苷B的大鼠在体肠吸收特性研究

目的:考察刺五加苷B在大鼠肠道各区段的吸收动力学特性、吸收部位及吸收机制,以期为其现代制剂设计提供理论依据。方法:采用大鼠在体肠段灌流实验,研究了刺五加苷B的吸收部位和吸收动力学特征。结果:不同肠段药物的吸收量和校正的肠壁渗透率(Pw*)按十二指肠、空肠、回肠和结肠的顺序依次下降;刺五加苷B经含肠道酶肠灌流液降解后,其含量按十二指肠、空肠、回肠和结肠的顺序依次下降;采用HPLC法,在血浆和胆汁中未检出刺五加苷B。结论:刺五加苷B生物利用度低是因为肠道酶代谢,引起刺五加苷B被降解,而不仅仅是吸收因素。

刺五加抗脑缺血作用物质基础纯化工艺优选

目的:优选刺五加抗脑缺血作用物质基础的纯化工艺。方法:比较D-101大孔树脂、聚酰胺和正丁醇萃取3种纯化工艺所得样品对大鼠缺血再灌注损伤模型和小鼠断头张口模型的抗脑缺血作用。结果:D-101大孔树脂纯化样品的抗脑缺血作用强于其他两种方法,刺五加苷B与刺五加抗脑缺血作用正性相关。结论:D-101大孔树脂吸附法是刺五加提取物较佳的纯化工艺。

中药复方物质基础研究新思路和方法

复杂的化学成分是中药复方发挥预防、治疗、诊断疾病的物质基础。基于对传统中药复方物质基础和现代中药复方创新物质基础的认识,提出了"功能组分"新观点,中药复方成分可以划分为有效组分、功能组分和无用成分。中药复方物质基础由"有效组分+功能组分"共同构成有序的整体结构,具有"三个层次多维结构";提出了由"微观到宏观"和"宏观到微观"的二个不同的物质基础整体性结构研究解决方案。

基于中药组分结构理论的夏枯草属药材防治肺癌物质基础研究

目的:在组分结构理论指导下研究夏枯草防治肺癌的物质基础。方法:采用A549细胞模型对9个产地夏枯草属药材进行活性筛选,运用HPLC法分析不同产地夏枯草属药材各组分间及各组分内部主要活性成分的含量。在组分结构理论指导下通过对含量测定结果的分析,探索各组分结构比与防治肺癌活性间的关系。结果:江苏、安徽、河南、广西、湖北、浙江、贵州、江西、四川的夏枯草属药材对A549细胞的IC50分别为62.98、65.33、161.94、158.36、303.90、328.84、278.43、329.57、279.40μg生药/mL。HPLC测定结果表明,咖啡酸、迷迭香酸、芦丁、槲皮素在江西夏枯草中含量最高,熊果酸和齐墩果酸在四川硬毛夏枯草中含量最高。而此两产地夏枯草的对A549细胞的抑制活性较差。药效最好的江苏山菠菜和安徽夏枯草虽六种成分含量均较低,但两者酚酸、黄酮、三萜三组分的结构比及六种主要成分(咖啡酸、迷迭香酸、芦丁、槲皮素、熊果酸、齐墩果酸)的结构比相似,三组分结构比分别为(1.41∶0.44∶0.53)和(1.42∶0.44∶0.66),六成分的结构比分别为:(1.0∶14.7∶3.9∶1.0∶4.4∶1.4)和(1.0∶14.8∶4.0∶0.8∶5.6∶1.8)。结论:夏枯草属药材防治肺癌的物质基础由具有固定结构比的酚酸、黄酮和三萜三类组分构成;夏枯草属药材防治肺癌的物质基础具有稳定、有序的整体性结构。

超临界CO_2萃取白花蛇舌草中三萜类成分的工艺研究

目的探讨超临界CO2流体萃取白花蛇舌草中三萜类成分的可行性。方法以齐墩果酸量、总三萜量及固形物量为考察指标,采用正交试验优化超临界CO2流体萃取白花蛇舌草三萜类成分的工艺条件。同时采用MTT法测定不同提取工艺的白花蛇舌草提取物对A549细胞增殖的影响。结果超临界CO2流体萃取白花蛇舌草三萜类成分的最佳工艺条件为萃取压力15 MPa,萃取温度40℃,夹带剂(95%乙醇)用量为2.0 mL/g,萃取时间1.5 h。超临界萃取物能有效抑制A549细胞的增殖。结论超临界CO2流体可有效萃取白花蛇舌草中三萜类成分。

基于主成分分析的茶叶预防肺癌药效物质研究

目的:采用主成分分析(PCA)法研究6种茶叶预防肺癌的药效物质基础。方法:以UPLC对各茶叶中各成分进行含量测定,MTT法检测CSE诱导的NHBE细胞的存活率,5,5-二硫二硝基苯甲酸(DTNB)比色法测定GSH/GSSG(还原型/氧化型谷胱甘肽)的比例,采用主成分分析计算共有峰面积的相关系数矩阵、特征值和方差贡献率,确定其具有预防肺癌的化学成分。结果:6种茶叶中龙井保护NHBE细胞损伤的作用最强,其IC50为0.2559mg/mL,使GSH/GSSG的比例由0.142恢复至0.858,且具有剂量依赖性;主成分分析得出GCG预防肺癌的贡献率为79.602%,GA的贡献率为11.307%,两者之和为90.909%。结论:不同品种茶叶对NHBE细胞的保护作用不同,主成分分析法确定GCG和GA是茶叶中预防肺癌的主要活性成分。

枳实白芍提取物配伍主成分的肠吸收变化研究

目的以枳实和白芍中主要活性成分柚皮苷和芍药苷为指标,考察枳实提取物和白芍提取物配伍后这两种成分在大鼠肠道中的吸收情况。方法采用大鼠在体肠灌流模型,应用超高效液相色谱(UPLC)测定枳实白芍提取物配伍后柚皮苷和芍药苷在肠道吸收的变化量。结果枳实提取物中柚皮苷在十二指肠、空肠、回肠和结肠的吸收率分别为6.18%、5.47%、4.64%、5.12%,白芍提取物中芍药苷在上述四个肠段的吸收率分别为8.08%、7.42%、7.13%、6.66%。结论枳实白芍配伍后柚皮苷和芍药苷与单独提取的提取物相比在大鼠肠道的吸收并未发生显著变化。

甘草总皂苷及甘草酸对Caco-2细胞P-gp功能和表达的影响

目的研究甘草总皂苷及其主要成分甘草酸对Caco-2细胞P-糖蛋白(P-gp)功能和表达的影响,进一步探讨甘草配伍解毒可能的作用机制。方法采用流式细胞仪检测罗丹明-123经甘草总皂苷和甘草酸处理后Caco-2细胞对其摄取量的差异评价P-糖蛋白的外排功能;采用western blot检测Caco-2细胞经甘草总皂苷和甘草酸处理后P-糖蛋白表达的差异。结果经过1 h的干预,5、10、50μg/mL的甘草总皂苷和甘草酸使细胞内罗丹明-123的荧光强度较阴性对照组相比显著减少41.4%、37.4%、34.8%;33.3%、29.9%、27.5%,对P-gp功能表现出诱导作用(P<0.05)。高质量浓度的甘草总皂苷(100、200、400μg/mL)和高浓度的甘草酸(100、200、400μmol/L)对细胞内罗丹明-123的荧光强度影响不显著(P<0.05)。经过72 h甘草总皂苷、甘草酸的干预,荧光强度较阴性组相比分别显著增加(P<0.05),呈现剂量依赖性。结论甘草总皂苷、甘草酸在一定剂量范围内既增强Caco-2细胞P-gp的功能,又能上调P-gp的表达。甘草酸可能是甘草总皂苷影响P-gp功能和表达的有效成分。

革命老区与和谐社会的构建——基于上级支持“三农”优惠鼓励政策的视角

革命老区人民对中国革命的胜利做出了极大的贡献和牺牲。在建设社会主义和谐社会的新时期,老区的发展遇到了困难,因此,应在加大国家财政转移支付力度的同时,加强革命老区的政策性扶持等措施,努力推进革命老区的建设发展。

试论现场常见法医物证提取及保存的规范操作

简要介绍了现场法医物证提取和保存操作应遵循的原则,分析了物证提取的规范操作,探讨了法医物证包装和保存时的注意事项,以期为相关工作提供借鉴。

南蛇藤、鸡血藤配伍对佐剂性关节炎大鼠药效学与毒性的影响

目的研究南蛇藤、鸡血藤配伍对佐剂性关节炎大鼠药效学与毒性的影响。方法将南蛇藤水提液和南蛇藤、鸡血藤合煎液分别作用于脂多糖刺激的C57BL/6小鼠腹腔巨噬细胞12 h,取上清,检测IL-6、TNF-α、IL-10水平。弗氏佐剂建立SD大鼠佐剂性关节炎模型,给药25 d后测定体质量、足跖肿胀度、关节指数,HE染色后观察膝关节病变,检测血清ALT、AST、MDA水平。结果与南蛇藤组比较,配伍组IL-6、TNF-α水平显著降低(P<0.05),IL-10水平显著提高(P<0.05),足跖肿胀度、关节指数显著改善(P<0.05),体质量显著增加(P<0.05),膝关节病变显著减轻,ALT、AST、MDA水平显著降低(P<0.05,P<0.01)。结论南蛇藤、鸡血藤配伍能明显增强前者对佐剂性关节炎大鼠的药效,并降低其毒性。

漏芦抗肺癌活性部位的筛选

目的筛选漏芦Rhaponticum uniflorum(L.)DC.体内外抗肺腺癌的活性部位,并对其化学成分进行解析。方法漏芦经有机溶媒提取,其残渣再经水提,共5个活性部位与人肺腺癌细胞A549和H1299共孵育,从中筛选抗肺癌活性最强的部位;并观察它们对Lewis接种C57BL/6J荷瘤小鼠抑瘤率、胸腺指数、脾脏指数的影响,验证其体内抗肺癌作用。采用UPLC-Q-TOF-MS-MS对该活性部位进行解析。结果漏芦抑制A549细胞增殖作用的提取物依次为正丁醇(半数抑制浓度IC_(50)为205.43μg/m L)>乙酸乙酯(IC_(50)为244.22μg/m L)>二氯甲烷(IC_(50)为350.40μg/m L);漏芦抑制H1299细胞增殖作用的提取物依次为正丁醇(IC_(50)为315.87μg/m L)>乙酸乙酯(IC_(50)为356.13μg/m L)>二氯甲烷(IC_(50)为416.13μg/m L)。漏芦提取物抑制Lewis荷瘤小鼠肿瘤增长的作用排序为正丁醇高剂量组(37.43%)>正丁醇低剂量组(32.91%)>乙酸乙酯高剂量组(25.87%)>乙酸乙酯低剂量组(21.15%)。漏芦抗肺癌活性部位的主要成分为三萜类、甾醇类和植物激素类等。结论漏芦体内外抗肺癌作用最强的部位为正丁醇部位,该部位主要的成分为以齐墩果酸和熊果酸为代表的三萜类,以β-谷甾醇和豆甾醇为代表的甾醇类,以β-蜕皮甾酮、漏芦素甲为代表的植物激素类。

HPLC法同时测定漏芦中6个成分含量

目的：建立HPLC法同时测定漏芦中咖啡酸、甘草苷、迷迭香酸、齐墩果酸、β-谷甾醇、豆甾醇的含量。方法：采用Agilent Zorbax SB-C18（250 mm×4.6 mm,5μm）色谱柱;流动相为甲醇-0.04%磷酸,梯度洗脱;流速1.0m L/min;检测波长220 nm;柱温30℃。结果：咖啡酸、甘草苷、迷迭香酸、齐墩果酸、β-谷甾醇、豆甾醇分别在0.52-104.12μg/m L、0.51-101.23μg/m L、1.01-201.31μg/m L、0.52-103.21μg/m L、0.51-100.26μg/m L、0.52-103.67μg/m L范围内与相应的峰面积呈良好的线性关系,平均加样回收率的RSD分别为0.77%、1.50%、0.75%、1.82%、1.89%、2.02%。结论：该方法能准确、快速分析漏芦中6个活性成分,灵敏度高,重现性好,为质量评价奠定了基础。

双抗体竞争ELISA检测血清抗精子抗体

双抗体竞争ＥＬＩＳＡ检测血清抗精子抗体谭晓斌，徐建平，黄宇烽，商学军关键词不育症，抗精子抗体，酶联免疫吸附试验不育的原因很多，其中有免疫因素参与的约占１０％～２０％［１］。抗精子抗体（ａｎｔｉｓｐｅｒｍａｎｔｉｂｏｄｙ，ＡｓＡｂ）是自身抗体，在不育中...

“一长四必”现场勘查机制研究

简要介绍了"一长四必"现场勘查工作的现状,分析了现场勘查过程中影响"四必"落实的相关因素,阐述了落实"一长四必"现场勘查机制的措施,以期为日后的相关工作提供参考。

油井除蜡解决方法探究

油井管道结蜡是管输过程中不可避免的问题,当蜡沉积在管道内壁上的蜡组分达到一定厚度时,会造成管道堵塞,采油效率降低。本文从电动机械除蜡,电加热除蜡,注热除蜡,化学除蜡,微生物除蜡方法进行了探究,开展油井清防蜡措施技术,确保油井高产、稳产、提高油井采收率。