猴耳环水提物对免疫性肝损伤小鼠血液生化指标的影响

探讨猴耳环水提物对肝损伤小鼠血液生化指标的影响。方法:将50只昆明小鼠随机分为空白组、模型组、阳性组、猴耳环水提物高、低剂量组。空白组、模型组分别灌胃等量的生理盐水,阳性组按5mg·kg-1灌胃环孢素溶液,猴耳环水提物高、低剂量组分别按5.82mg·kg-1、2.91mg·kg-1灌胃,1次/d,连续给药7d。实验第一天以P.acnes染毒小鼠,末次给药前30min,空白组尾静脉注射等量生理盐水,其余各组尾静脉注射5ug/kg脂多糖,末次给药后采集各组小鼠血液,采用全自动化生化分析仪检测ALT、AST、TP、ALB、GLO含量。结果:与模型组比较不同剂量猴耳环水提物能显著降低血清中ALT水平(P<0.05)。猴耳环水提物组小鼠血清中的AST、TP与模型组的比较无统计学意义(p>0.05)。结论:猴耳环水提物能较好的改善肝损伤小鼠的血液生化指标,提高肝损伤小鼠的免疫功能。

猴耳环水提物对哮喘模型豚鼠外周血细胞的影响

为了研究猴耳环水提物对卵清蛋白(OVA)所致的哮喘模型豚鼠外周血细胞的影响,将50只豚鼠随机分为阴性对照组、阳性对照组、猴耳环水提物高、中、低剂量组,每组10只。试验第一天给阴性对照组和阳性对照组、猴耳环水提物高、中、低剂量组分别腹腔注射生理盐水和10%OVA致敏,第14天和第15天用OVA雾化激发诱发哮喘模型。试验结束后心脏采血,生化分析仪检测观察各组豚鼠外周血细胞数量的变化。结果表明,阳性组嗜碱性粒细胞数及中性粒细胞数均低于阴性组,差异显著(P<0.05),其余各组与阴性组比较均差异不显著;各组的淋巴细胞数和单核细胞数分别与阴性组比差异不显著(P>0.05)。适量的猴耳环水提物对白细胞总数含量变化有积极的作用。

纤维环穿刺法建立兔腰椎间盘退变模型

目的建立纤维环穿刺法建立兔椎间盘退变模型。方法 40只新西兰大白兔随机分为牵引组和对照组,手术组(30)只以16G针刺损伤新西兰兔腰椎椎体右前侧纤维环制备椎间盘退变模型,对照组(10只)不予穿刺手术。分别于造模术后4、8、12周通过腰椎侧位X片及组织病理学检查观察椎间隙变化情况及组织病理情况。结果手术组在腰椎侧位X线片上术后4周椎间隙高度逐渐下降,椎间盘高度指数变化率(DHI)2组差异有统计学意义(P<0.05);且随着时间的推移,手术组椎间盘内细胞逐渐减少。结论纤维环穿刺法可缓慢模拟人类损伤后椎间盘退变,操作安全可靠。

自体垂直悬吊牵引与靶向调控caspase3对兔退变椎间盘细胞的影响

目的探讨自体垂直悬吊牵引与靶向调控caspase 3对兔退变椎间盘细胞凋亡的影响。方法体外实验:分离培养兔椎间盘髓核细胞,进行caspase3 siRNA和阴性对照siRNA转染,分别置于血清饥饿培养基中培养6h和48h,设正常细胞和血清饥饿细胞对照,应用RT-q PCR法和流式细胞术Annexin V法分析caspase3 mRNA表达和细胞凋亡情况。体内实验:将35只新西兰大白兔随机分为模型组(n=10)、阴性siRNA对照组(n=10)、caspase3 siRNA组(n=10)和caspase3siRNA牵引组(n=5),采用16G针刺损伤腰椎椎体右前侧纤维环制备椎间盘退变模型;后3组按照造模入路用26G针头从造模对侧分别注入阴性对照siRNA或caspase3 siRNA转染复合体至兔髓核中心,模型组不予处理。48h后前3组每组随机选取5只实验兔,处死取髓核组织,提取总RNA,采用RT-q PCR和Western blotting分析退变椎间盘内caspase3 mRNA和蛋白表达情况;同时caspase3 siRNA牵引组再行自体垂直悬吊牵引,30min/d,连续2周后处死获取髓核组织,采用ELISA检测髓核内TNF-α和IL-1β表达情况,HE染色观察组织形态学变化。结果 Caspase 3 siRNA转染后兔髓核细胞caspase3 mRNA表达水平明显降低,在饥饿培养条件下细胞凋亡明显减少(P<0.05)。椎间盘退变模型兔在纤维环穿刺注入caspase3 siRNA后,椎间盘髓核内caspase3 mRNA和蛋白表达明显下调;2周后caspase3 siRNA牵引组TNF-α和IL-1β表达与模型组和阴性siRNA对照组比较显著减少(P<0.05),但与caspase3 siRNA组比较差异无统计学意义(P>0.05)。HE染色显示caspase3 siRNA牵引组椎间盘内活细胞和细胞外基质明显增多,胶原纤维排列整齐。结论自体垂直悬吊牵引和靶向调控caspase3能有效阻止细胞凋亡的发生,延缓早期椎间盘退变。

中医药院校公共动物实验室管理初探

中医药及中兽医药的各项试验研究都离不开实验动物,并且按要求需要有标准化的实验动物,而合乎标准的动物则需要有合乎规范管理的实验动物中心才能提供,因此加强公共动物实验室的管理十分重要。我校的实验动物中心动物实验室作为公共服务平台已运行多年,随着国家及各省对生命科学研究的科研经费资助力度的加大,对动物实验的环境、实验动物质量标准的要求也相应提高。这些国家政策规定的陆续出台,

自体垂直悬吊牵引对兔退变椎间盘高度的影响

目的探讨自体垂直悬吊牵引对新西兰大白兔退变椎间盘高度变化的影响。方法 20只新西兰大白兔以16 G针刺损伤新西兰大白兔腰椎椎体右前侧纤维环制备椎间盘退变模型,随机分为牵引组和对照组。牵引组(n=15)行自体垂直悬吊牵引,每天固定牵引30 min,连续牵引8周。对照组(n=5)不予治疗。分别于牵引后2、4、6、8周拍摄腰椎侧位X片,计算椎间盘高度指数百分比(DHI%)。结果牵引组牵引2周、4周后均较前有显著性差异(P<0.05),治疗效果在0-4周区间呈上升趋势,4周后呈下降趋势。牵引组治疗后各个时间点DHI%均显著大于对照组(P<0.001)。结论自体垂直悬吊牵引能够延缓和抑制椎间盘退变。

猴耳环浸膏对豚鼠过敏性哮喘的治疗作用

目的观察猴耳环浸膏对豚鼠过敏性哮喘的治疗作用。方法将50只Hartley豚鼠随机分为空白组、阳性组(地塞米松组)、猴耳环浸膏高剂量组、猴耳环浸膏中剂量组、猴耳环浸膏低剂量组,每组10只。各组均用卵清蛋白(OVA)致敏和诱发,建立豚鼠哮喘模型。各治疗组于致敏后第7天开始灌胃给药。末次激发后24h采血,ELISA法检测血清中IL-4、Ig E和NO水平。结果各组与空白组比较,阳性组和猴耳环浸膏中剂量组的IL-4和NO水平明显降低(p<0.01),其余各组差异无统计学意义(p>0.05)。结论:猴耳环浸膏对哮喘豚鼠没有体现出治疗作用,但对IL-4和NO的变化产生了积极的影响。以上结果提示,猴耳环浸膏的抗炎作用可能不是通过糖皮质激素作用通路而起作用,极有可能是通过对于炎症细胞因子的调节作用而发挥积极的抗炎作用的。

急性痛风性关节炎大鼠血尿酸、IL-4含量的变化研究

目的检测急性痛风性关节炎大鼠血尿酸、IL-4含量的变化,以期探讨其变化规律。方法分别采用次黄嘌呤、氧嗪酸、尿酸钠腹腔及踝关节注射进行大鼠痛风性关节炎模型制作。于造模后1 h观察大鼠右踝关节肿胀度,并于1 h、24 h眼眶静脉丛采血,采用全自动生化分析仪测定血液中尿酸、酶联免疫法检测IL-4含量,并观察各组变化。结果次黄嘌呤组、氧嗪酸组、尿酸钠组的1 h、24 h的血尿酸、IL-4含量与模型对照组及空白组比较明显增高,差异具有统计学意义(P<0.01)。次黄嘌呤组的1 h血尿酸、氧嗪酸组24 h血尿酸明显高于空白组及模型对照组,具有高度显著性差异(P<0.01)。次黄嘌呤组的1 h IL-4及24 h IL-4明显高于空白组及模型对照组,差异具有统计学意义(P<0.01)。结论造模后大鼠踝关节肿胀度、步态、血尿酸、IL-4均比空白组和模型对照组高,提示所致的急性关节炎模型成功。次黄嘌呤致急性关节炎具有优势。

自体垂直悬吊牵引对兔退变椎间盘组织的影响

目的:探讨自体垂直悬吊牵引对新西兰大白兔退变椎间盘病理组织的影响。方法:以16G针刺损伤18只新西兰大白兔腰椎椎体右前侧纤维环制备椎间盘退变模型,随机分为牵引组和对照组。牵引组(n=8)行自体垂直悬吊牵引,每天牵引30min,连续牵引8周。对照组(n=8)不予治疗,分别于牵引后2、4、6、8周行腰椎侧位X线检查和病理组织学观察。结果:随着牵引时间的延长,牵引组腰椎间隙高度逐渐增加,椎间盘内的含水量及活椎间盘细胞数量增多,纤维环排列日趋规则。结论:自体垂直悬吊牵引可能延缓和抑制椎间盘退变。