寄生虫丝/苏氨酸蛋白磷酸酶研究进展

丝／苏氨酸蛋白磷酸酶（Proteinserine／threonine phosphatases，PSTP）属于蛋白磷酸酶家族中重要的细胞内调节蛋白，能够催化磷酸化丝氨酸或磷酸化苏氨酸的去磷酸化反应，并参与许多关键的生物学过程，例如细胞周期进程、细胞凋亡和胞外分泌等。蛋白质的磷酸化和去磷酸化是调节多种细胞功能的基本过程。蛋白激酶从ATP将磷酸基团转移到蛋白质上（磷酸化），而蛋白磷酸酶催化磷酸基团从蛋白质的特定残基移除（去磷酸化）。

渝西地区奶牛隐孢子虫的分离和基因型鉴定

为鉴定渝西地区奶牛隐孢子虫分离株的种类和基因型,本研究利用巢氏PCR(Nested PCR)扩增18S rRNA基因,PCR产物进行限制性片段长度多态性分析(Restriction fragment length polymorphism analysis,RFLP);将目的片段克隆至pGEM-T Easy载体,对阳性克隆进行测序,序列用BLAST和MEGA 4.0进行同源性和种系发育分析。结果表明阳性样品均成功扩增出约830bp的目的基因片段,PCR产物分别经SspⅠ和MboⅡ酶切后进行RFLP分析,显示渝西地区存在3种隐孢子虫,即C.andersoni、C.bovis、C.ryanae。其中C.andersoni为优势虫种。鉴定结果为进一步开展奶牛隐孢子虫的病原生物学研究及该地区隐孢子虫病的监测奠定了基础。

黄鳝胃瘤线虫ITS及5.8S rDNA的克隆及序列分析

为了解渝西地区黄鳝胃瘤线虫的rDNA内转录间隔区（ITS）及5.8SrDNA 序列的遗传变异情况,本研究利用PCR扩增胃瘤线虫rDNA的片段,将目的片段克隆至pMDTM19-T Vector载体,对阳性克隆进行测序,序列用 BLAST和MEGA4.0进行相似性和种系发育分析.结果表明6株胃瘤线虫分离株扩增的序列总长存在差异（890-892bp）,其中ITS-1序列长度为350-351bp、5.8S序列长度为102-103bp及ITS-2序列长度为343bp.渝西地区胃瘤线虫ITS序列与不同宿主胃瘤线虫的相似性最高为98.3%,表明ITS可作为分子标记用于胃瘤线虫与其他线虫的种间鉴定.

重庆荣昌犬钩虫ITS及5.8S rDNA的克隆及序列分析

利用聚合酶链式反应(PCR)扩增犬钩虫rDNA的ITS及5.8S序列,然后将PCR扩增产物回收纯化后连接到pMDTM19-T载体上进行克隆.重组质粒通过菌落PCR鉴定,将阳性重组质粒进行序列测定并且进行序列分析.结果显示,5株犬钩虫荣昌分离株ITS序列的总长为833 bp^834 bp.ITS-1序列总长无差异,但存在个别碱基的差异;5.8S序列总长与序列均无差异;ITS-2序列总长存在差异(221 bp^222 bp).通过与GeneBank上报道的其他钩虫的ITS序列进行相似性分析,发现犬钩虫荣昌分离株(RCF)与犬钩虫广州分离株相似性最高,为99.9%,与美国北海狮弯口属钩口线虫ITS序列的相似性最低,为86.1%.表明ITS可作为分子标记用于犬钩虫种属以及种间的鉴定.该研究结果旨在为今后犬钩虫的分类鉴定、种群遗传关系、分子流行病学调查以及对该病的防治等方面的更深入研究奠定基础.

2017—2020年云南省丽江市羊小反刍兽疫监测

为了解云南省丽江市羊小反刍兽疫(PPR)的免疫状况和病毒感染情况,2017—2020年在全市范围内累计采集580个场点的4002份血清学样品和2556份病原学样品,分别采用ELISA方法和荧光RT-PCR方法进行抗体检测和病毒核酸检测,并对检测结果进行统计分析。结果显示:2017—2020年丽江市羊PPR个体免疫合格率为76.29%,群体合格率为83.67%;除2020年(69.23%)外,其他年份(75.33%~82.82%)均超过了农业农村部要求的最低合格标准(70%);种羊场、商品羊场、散养户和屠宰场的个体免疫合格率分别为91.20%、84.51%、76.67%和33.40%,所有样品均未检测到PPR病毒核酸阳性。结果表明:丽江市未在全市范围内形成PPR病原污染,在未引入新疫源的前提下,疫情发生风险较低;但整体的羊群免疫抗体合格率不高,且呈下滑趋势,尤其是散养及屠宰羊群缺乏足够的抗体保护。因此,应继续加强PPR强制免疫和监测,加大羊只引种检疫和调运监管力度,提升该病的整体防控能力。