BMP诱导成骨过程中胶原生成及TGF-β_1的促进作用

目的 探讨骨形态发生蛋白 (Bonemorphogeneticprotein ,BMP)诱导成骨过程中骨胶原氨基酸的变化规律及转化生长因子 β1(Transforminggrowthfactorβ1,TGF β1)对骨胶原生成的影响 ,进一步阐明BMP的诱导成骨机制和TGF β1对骨损伤修复的调节机制。方法 实验采用日本大耳白兔左尺骨中上段 12mm骨缺损实验模型 ,随机分为实验组、对照组及空白组 ,缺损内分别植入BMP/TGF β1/载体、BMP/载体及单纯载体。分别于术后第 1、2、3、4、5周检测各组缺损区胶原羟脯氨酸 (Hydroxyproline ,HP)及羟赖氨酸(Hydroxylysine ,HL)量的变化 ,并作胶原VG染色图像分析、组织学及电镜观察。结果 实验组较同期对照组及空白组胶原HP生成量增加 ,成骨细胞数量增多 ,Ⅰ型胶原生成时间提前、生成量增加 ,胶原总量也明显增加 ,骨损伤修复时间缩短。结论 TGF β1可使骨胶原在BMP诱导成骨过程中生成增加。TGF β1通过促进成骨细胞生成使Ⅰ型胶原分泌能力增强 ,并抑制Ⅱ型胶原产生使软骨期缩短 ,骨损伤修复提前。BMP、TGF β1两者在骨损伤修复中相互加强 ,具有协同作用。

胸腰椎压缩性骨折椎体成形术疗效观察

目的通过观察椎体成形术对不同原因所致的胸腰椎压缩性骨折的治疗效果,探讨椎体成形术在椎体压缩性骨折治疗中的适用范围及应用中应注意的问题。方法采用椎体成形术治疗胸腰椎压缩性骨折患者53例62椎,其中外伤压缩性椎体骨折12例12椎,椎体转移性肿瘤4例7椎,骨质疏松压缩性骨折37例43椎。结果53例胸腰椎压缩性骨折患者椎体成形术后早期(3d内)评定为优者40例,良11例,差2例。优良率96%。得到3个月以上随访的39例42椎患者中再次评定为优者28例,良8例,差3例,优良率92%。结论椎体成形术是一种较理想的治疗无神经症状的胸腰椎压缩性骨折的方法,它具有效果好、损伤小、费用低的特点,其最佳适应证为骨质疏松所致的压缩性骨折。

转化生长因子-β_1对骨形态发生蛋白诱导成骨的促进作用

目的 我们通过观察转化生长因子 β1 (transform inggrowth factorβ1 ,TGF- β1 )和骨形态发生蛋白 (bone morpho-genetic protein,BMP)共同修复骨缺损 ,达到进一步阐明BMP诱导成骨机制的目的 .方法 实验采用日本大耳白兔左尺骨中段 12 mm骨缺损实验模型 ,分为实验组、对照组和空白组 ,缺损内分别植入 BMP/ TGF- β1 /载体、BMP/载体、载体 .通过 X线、组织学及电镜对比观察三组骨缺损修复情况 .结果 实验组骨缺损无论是骨痂出现还是骨连接发生时间均较对照组明显提前 ,空白组骨缺损形成骨不连 .实验组成骨细胞和软骨细胞无论出现的时间、数量和功能活跃程度均优于对照组 .电镜观察见成骨细胞、软骨细胞内线粒体丰富、内质网增多 ,而对照组则相对较少 .结论 TGF- β1 具有促进BMP诱导成骨的作用 .TGF-β1 通过促进间充质细胞分裂增殖为 BMP提供靶细胞、促进成骨细胞及软骨细胞的分裂增殖、促进骨细胞合成产生 型胶原、促进基质钙化、减少骨吸收等作用来促进

椎体成形术应注意的几个问题

目的通过观察椎体成形术对胸腰椎压缩性骨折的治疗及效果,探讨椎体成形术的适用范围,术前、术中应注意的问题及对策。方法采用椎体成形术治疗胸腰椎压缩性骨折68例78椎。结果94%患者在术后早期取得满意效果,得到随访半年以上的44例中仍有91%效果良好。结论椎体成形术是一种较理想的治疗胸腰椎压缩性骨折的方法,但在治疗过程中仍有一些经验及注意事项需要掌握。

骨形态发生蛋白3基因转染成纤维细胞后细胞形态及生物学变化

目的 通过基因转染方法 ,用骨形态发生蛋白 3(BMP3 )基因转染成纤维细胞 (NIH 3T3细胞 ) ,观察转染不同时期被转染细胞的形态学改变及细胞内碱性磷酸酶含量的变化 ,初步探讨骨组织工程种子细胞来源的另一途径。方法 定向克隆法将BMP3 基因构建于PcDNA3表达载体 ,脂质体介导法转染NIH 3T3细胞 ,G418筛选获得稳定转化体 ,观察不同时期被转染细胞的形态学变化 ,钙钴法染色转染细胞不同时相的碱性磷酸酶并作图像分析。结果 转染细胞培养筛选 6周提取的总RNA用Dotblot可以检出有明显的BMP3 mRNA表达。转染细胞第 1周细胞形态由长梭形变为杆状 ,转染后 2周细胞由长梭形变为多角形 ,转染后 4周细胞变为多边形 ,类似成骨细胞 ,钙钴法碱性磷酸酶染色示转染组细胞胞浆内有大量染成黑色的碱性磷酸酶颗粒 ,及图像分析示转染细胞内碱性磷酸酶明显高于同期对照组 ,两组间有显著性差异 (P <0 .0 1)。结论 通过向NIH 3T3细胞内转染BMP3 基因 ,可以使NIH 3T3细胞形态向成骨细胞形态发生转化 ,被转染细胞内碱性磷酸酶水平明显增高 ,已具有成骨细胞的某些特性。

骨形态发生蛋白修复骨缺损实验研究

骨形态发生蛋白修复骨缺损实验研究Ａｎｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌｓｔｕｄｙｏｎｔｈｅｒｅｐａｉｒｍｅｎｔｏｆｂｏｎｅｄｅｆｅｃｔｗｉｔｈｂｏｎｅｍｏｒ┐ｐｈｏｇｅｎｅｔｉｃｐｒｏｔｅｉｎ谭祖键李起鸿（第三军医大学附属西南医院骨科）重庆，４０００３８骨缺...

改良前方入路结核病灶清除、同种异体骨移植、内固定治疗颈胸段脊柱结核

目的:探讨通过改良前方入路进行颈胸段脊柱结核病灶清除、同种异体骨移植、内固定治疗的疗效。方法:对6例C7～T3椎体结核患者采用标准颈椎前方入路联合胸骨柄正中劈开暴露病灶,彻底清除结核肉芽组织、脓液、死骨等进行脊髓减压,次全切除相应椎体,植入同种异体髂骨块重建前柱、前方钉板内固定,术后佩戴头颈胸支具6个月,正规抗痨12个月。结果:随访18～39个月,平均28个月,6例患者均获骨性愈合,结核病变无复发,后凸角无明显丢失。结论:颈胸段改良前方入路暴露C7～T3病灶充分、安全,病灶清除后植入异体髂骨块修复骨缺损、牢固内固定,重建颈胸段的稳定性、矫正后凸畸形可靠。

人间充质干细胞体外成骨诱导培养及其生物学特性变化

目的 确定人间充质干细胞 (MSCS)体外扩增培养、向成骨细胞表型转化的方法 ,了解其生物学特性变化。方法 分离人骨髓细胞 ,按不同种植密度、首次换液时间进行原代培养 ,对传代培养细胞用化学药物或生长因子进行成骨诱导培养 ,并检测成骨细胞表型、生长曲线、贴壁率。结果 人MSCS 原代培养种植细胞密度为 1× 10 5～ 3× 10 5/cm2 ,48h后半量换液 ,以后每 3d全量换液的方法较合理。经化学药物 (如地塞米松、β 甘油磷酸、维生素C)或生长因子 (rh BMP2 、BMPS)作用后 ,MSCS 表达碱性磷酸酶、Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原和骨钙素 ,细胞增殖速度减慢 ,贴壁率略降低。未诱导MSCS 形成细胞团后 ,可自动分化表达碱性磷酸酶活性。结论 合理的人MSCS 培养方法及可靠的诱导条件 ,可为体外构建组织工程化骨提供自体种子细胞。

BMP及TGF-β复合生物材料治疗股骨头坏死的组织学观察

目的 观察吸附有BMP 2和TGF β1的PLLA/CPPf多孔材料植入股骨头坏死 (Femurheadnecrosis ,FHN)病灶清除区后的组织学变化 ,评价其诱导成骨活性及生物降解性 ,以探索FHN治疗的新方法。方法 在激素诱导性兔FHN模型上行坏死病灶清除术 ,以该种材料充填骨腔 ,行大体和组织学光镜观察。结果 ①大体观察 ,术后 2周充填区周边出现反应带 ;6周周边反应带基本消失 ,有骨小梁长入充填区 ;12周骨小梁已布满充填区。②光镜观察 ,术后 1周充填区周围间充质细胞大量增生 ,纤维肉芽组织形成 ,开始且持续呈网状长入充填区 ;2周周边有新骨产生 ,以后不断增加并向充填区中心延伸 ,材料逐渐降解 ,12周充填区广布相对较成熟的骨小梁。结论 PLLA/CPPf多孔隙材料是生长因子的良好吸附载体 ,具有较好的生物相容性和生物可降解性 ,适合活组织长入。吸附有BMP 2和TGF β1的PLLA/CPPf多孔隙材料具有较强的诱导成骨能力 ,能有效地提高在骨坏死病理条件下股骨头的骨修复能力。

PVP与PKP治疗骨质疏松性骨折止痛效果分析

目的探讨PVP与PKP技术治疗骨质疏松性骨折止痛效果有无差异。方法35例（41个椎体）骨质疏松性骨折进行PVP治疗；39例（47个椎体）骨质疏松性骨折进行PKP治疗。术前、术后3d、1月、3月应用10分制视觉模拟评分（VAS）对患者疼痛进行评价。结果PVP组术前与术后各时间段比较，均有统计学差异，但术后各时间段无统计学差异；PKP组也得到同样结果。而两组间各时间段进行比较，差异均无显著性。结论PVP与PKP治疗骨质疏松性骨折均有迅速、明确的止痛作用，但二者间无差异。

腰椎间盘突出症术后复发原因探讨及处理对策

目的探讨腰椎间盘突出症术后复发的成因及其处理措施.方法对1995～2002年间本科收治的37例腰椎间盘突出症术后复发患者的病例资料进行回顾性分析.结果 37例中,男24例,女13例,年龄22～63岁,平均37岁.包括侧隐窝狭窄12例,术后复发4例,术中定位错误7例,神经根粘连6例,下腰椎手术后失稳10例.初次手术后症状未缓解或加重者17例,症状有暂时性缓解而后复发者20例.二次手术间隔时间7天～15年,平均2.4年.再次手术前临床表现为腰痛伴下肢放射性疼痛者14例,下肢放射性疼痛者10例,腰背部疼痛者7例,间歇性跛行者6例,会阴部麻木4例,全部患者患侧小腿外侧后侧皮肤感觉减退.再次手术方式为,扩大开窗及神经根管扩大减压术19例,半椎板切除术8例,椎间植骨融合及椎弓根内固定术10例.随访6月～6年2月,平均随访3年10月,再次手术术后优良率97.2%.结论术前周全的检查、准切的定位及术式的合理选择是防范椎间盘突出症术后复发的关键;术中应正确处理神经根管及椎管狭窄与椎体稳定性间的关系,既要避免椎管狭窄减压不足导致术后效果不佳,又要防止过分减压导致术后脊柱不稳;CT及MRI对于引起腰椎手术失败的多数病因有较好的诊断价值;二次手术除摘除突出的髓核和解除椎管狭窄外,一定要注意重建脊柱的稳定性.

曲安奈德对膝骨性关节炎关节镜术后早期疼痛的控制

关节镜清理术是膝关节轻中度骨性关节炎的主要治疗方法之一。部分患者术后出现明显的关节疼痛、肿胀,以致不能有效配合关节功能康复训练,严重时可导致关节功能障碍甚至僵硬[1-2]。曲安奈德（triamcinolone acetonide）具有抑制炎症反应,缓解疼痛的作用。

载银二氧化钛纳米羟基磷灰石／聚酰胺66复合材料的生物相容性及其安全性

背景:理想的修复材料是既具有良好生物相容性,又具有成骨能力。任何一种生物材料必须具备使用安全性和良好的生物相容性,这是生物材料获准临床使用的前提。目的:探讨载银二氧化钛纳米羟基磷灰石/聚酰胺66(TiO2-Ag-nHA/PA66)骨修复材料的体内生物相容性及安全性。设计、时间及地点:随机对照,重复测量设计,于2008-07/2009-07在重庆医科大学完成。材料:清洁级3周龄昆明小鼠40只,同窝同系健康成年新西兰大白兔32只,均由重庆医科大学实验动物中心提供。粉末状TiO2-Ag-nHA/PA66复合材料10g,直径5mm×长度25mm和直径3mm×长度5mm的TiO2-Ag-nHA/PA66复合材料各32根,由四川大学纳米生物材料研究中心提供。方法:①急性全身毒性试验:40只小鼠随机分为实验组和对照组,选择粉末状复合材料制备材料浸提液,将浸提液注入实验组小鼠腹腔内,对照组注入等量生理盐水。②肌内埋植实验:16只兔随机分为实验组和对照组,实验组每只兔左、右竖脊肌各植入2根直径5mm×长度25mm复合材料,对照组行相同的手术操作但不植入任何材料。③骨内埋植试验:取剩余16只兔,每只兔左、右外上髁各植入1根直径3mm×长度5mm柱状复合材料。④溶血试验:取抗凝兔血8mL,分别加入复合材料粉末0.1,0.15,0.2g。主要观察指标:TiO2-Ag-nHA/PA66的体内生物相容性及安全性。结果:急性全身毒性试验结果表明,两组小鼠活动及进食良好,呼吸正常,无瘫痪、惊厥及死亡发生,小鼠体质量稳定。肌内埋植试验和骨内埋植试验结果显示,植入前及植入后4d,1周,2周,两组丙氨酸氨基转移酶、天门冬酸氨基转移酶、尿素氮、肌酐水平及白细胞数量均无明显差异(P>0.05),且实验组内各时相点比较亦无明显差异(P>0.05)。肌内埋植中,实验组的组织切片示材料周围的包裹组织,材料周围炎性演变转归与对照组基本相似;骨内埋植中,实验组的组织切片示围绕材料出现新骨。溶血试验结果显示,3种浓度梯度的TiO2-Ag-nHA/PA66复合材料其溶血率均未超过5%,达到标准要求。结论:TiO2-Ag-nHA/PA66复合材料具有良好的生物相容性及生物安全性。

3种常用影像学指标在椎间融合器疗效评估中的比较

目的比较3种常用影像学指标在评估使用腰椎融合器患者疗效中的效果。方法回顾性分析80例使用腰椎融合器的腰椎退行性变患者的临床效果,以3种常用影像学指标进行评价。结果腰椎曲线指数及全腰椎前凸角均显示较术前改善,但无统计学差异,相对椎间隙高度存在统计学差异且与临床疗效指标相符合。结论相对椎间隙高度指标较为稳定,能较好的与临床疗效指标吻合。

经皮椎体成形术(PVP)治疗椎体压缩性骨折

目的探讨经皮椎体成形术（percutaneous vertebroplasty,PVP）治疗椎体压缩性骨折的临床效果。方法应用PVP治疗96例105个椎体病变,其中外伤压缩椎体骨折18例20椎,椎体转移肿瘤8例11椎,骨质疏松压缩性骨折70例74椎。胸椎38椎,腰椎58椎,新鲜压缩性骨折（3周以内）78例87椎,陈旧性骨折（骨折3个月以上）18例18椎。90例得到了半年以上的随访。PVP采取经皮经椎弓根入路穿刺病变椎体,将针尖置于椎体前1/3处,进行椎体骨内静脉造影。最后注入骨水泥2-7ml。术后观察PVP的操作成功率、治疗效果及并发症。结果94例101个椎体PVP治疗成功,按病例数成功率为97.9%（94/96）,按椎体数成功率为96.2%（101/105）。术后疼痛81例完全缓解（CR）,10例部分缓解（PR）,3例轻微缓解（MR）,2例无效（NR）,总有效率为97.9%（94/96）;无原椎体再发塌陷。未出现神经受累症状。结论PVP是一种微创、有效的椎体压缩性骨折的方法。

前路减压植骨融合及钛板固定治疗胸腰椎骨折合并脊髓损伤

目的观察前路减压、植骨融合及钛板固定治疗胸腰椎骨折合并脊髓损伤的临床疗效.方法1999年3月～2004年5月有68例胸腰椎骨折合并脊髓损伤的患者接受前路减压、结构性植骨及钛板固定治疗.本组男45例,女23例,年龄14～61岁,平均36.7岁.骨折节段:T11 1例、T12 20例、L1 33例、L212例,为L1,2 1例和L2,3 1例.神经功能情况:完全性截瘫10例,不全性截瘫58例.固定器材:Z-PLATE钛板43例,PROFILE钛板19例,ALPS钛板6例.植骨材料:自体髂骨块45例和充填自体碎骨的钛网23例.采用Frankel分级和ASIA评分评估神经功能恢复情况,通过影像学检查脊柱畸形角(Cobb角)的纠正、减压范围、骨块或钛网的位置及骨愈合情况.结果65例随访8～48个月(3例失访),平均15.6个月.61例术后神经功能均有不同程度的改善,平均提高了1.25级,ASIA评分明显提高.CT及MRI检查示椎管减压彻底.髂骨块和钛网均无松动、移位等变化.三种钛板均无松动、移位及断裂.所有随访病例脊柱畸形均获得良好矫正和骨性融合,无畸形矫正的丢失.结论胸腰椎骨折合并脊髓损伤行前路减压安全彻底,有利于神经功能恢复.钛板内固定和结构性植骨稳定性好,骨性愈合率高.

去卵巢大鼠骨质疏松模型的特点

目的:观察去卵巢致Wistar大鼠骨质疏松模型骨密度、结构、最大载荷等变化特点,探讨骨量与骨结构的可能关系。方法:实验于2002-09/2004-01在解放军第三军医大学动物研究所及中心实验室完成。选择雌性未孕Wistar大鼠20只,随机数字表法分为去势组、假手术组,各10只。去势组行双侧卵巢切除,假手术组不切除卵巢。术后8周测定以下指标:①骨密度:在双能X射线骨密度仪的探头下,应用小动物软件进行腰椎和股骨的扫描,测定骨密度值。②椎体压缩测试:将磨制好的椎体置于实验机上,取加载速度1mm/min进行测试,其结构力学参数由载荷-变形曲线获得,材料力学参数由应力-应变曲线获得。③骨形态计量学检查指标:骨小梁面积百分数(%Tb.Ar),代表骨量;骨小梁厚度(Tb.Th)、骨小梁数量(Tb.N),骨小梁分离度(Tb.Sp)。④血、尿生化指标的测定:血清钙、磷,尿钙、磷,尿肌酐,均采用BECKMAN自动生化分析仪。血清骨钙素、血清碱性磷酸酶、血清抗酒石酸酸性磷酸酶、尿羟脯氨酸具体参照试剂盒说明。结果:纳入动物20只,均进入结果分析。①去势组大鼠股骨骨密度明显低于假手术组[分别为(0.166±0.026),(0.195±0.027)g/cm2,P<0.05],腰椎骨密度尤其显著[分别为(0.190±0.011),(0.251±0.029)g/cm2,P<0.01]。②去势组大鼠股骨最大载荷与假手术组相比显著降低[分别为(94.43±8.96),(109.49±12.41)N,P<0.05],腰椎最大载荷降低尤其显著[分别为(98.75±8.19),(118.82±15.74)N,P<0.01]。③去势组大鼠骨小梁面积百分数(%Tb.Ar)、骨小梁厚度(Tb.Th)、骨小梁数量(Tb.N)与假手术组相比显著降低(去势组分别为4.78±0.76,46.29±9.96,0.64±0.08,假手术组分别为7.74±1.76,60.91±3.80,1.26±0.26,P<0.01);骨小梁分离度(Tb.Sp)显著增高(分别为2300.85±480.10,1112.27±65.81,P<0.01)。④血、尿生化指标显示:骨吸收大于骨形成。结论:Wistar大鼠去卵巢8周成功建立了绝经后骨质疏松模型,骨量与骨结构的一些参数可能存在某种关系。

仿生脉冲电磁场对去卵巢大鼠骨质疏松治疗作用及机理的初步探讨

目的观察仿生电磁场对去卵巢大鼠骨质疏松的治疗作用,探讨其作用机理。方法6月龄雌性未孕Wistar大鼠40只,按体质量随机分为模型组(OVX)、假手术组(Sham)、仿生电磁场治疗组(EM)、雌激素治疗组(E)。OVX、EM、E组行双侧卵巢切除术,Sham组行假手术。术后8周,E组苯甲酸雌二醇肌肉注射,0.5mg/kg,1次/2周。EM组大鼠暴露于仿生电磁场治疗,1h·1次-1·d-1,OVX、Sham组不予以任何处理,作为对照组。治疗10周后测量腰椎骨密度、椎体的最大载荷、右侧胫骨骨结构以及血尿生化。结果仿生电磁场显著改善了大鼠腰椎骨密度(P<0.01)、最大载荷(P<0.01),骨结构也明显改善。血尿生化显示骨形成大于骨吸收。结论仿生电磁场对去卵巢大鼠骨质疏松具有明显的治疗作用,增强成骨细胞功能,抑制破骨细胞功能是其治疗作用的可能机理之一。

控制性降压联合自体血回输在特发性脊柱侧凸矫形术中的应用价值

目的:探讨控制性降压联合自体血回输在特发性脊柱侧凸矫形术中的应用价值。方法:对39例特发性脊柱侧凸患者行后路矫形术时均进行术中控制性降压,其中12例未进行自体血回输,作为对照组(A组),全部输异体库存血;另外27例均采用自体血液回输,包括术前预存自体血及术中自体血回输,作为研究组(B组)。观察两组患者失血量及输血情况。结果:A组失血量为763±164ml(400～1000ml),B组为852±386ml(350～2100ml),两组间相比无差异性(P>0.05)。A组输入库存血量为1045±362ml(500～1800ml),B组为511±337ml(0～1300ml),两组间差异有显著性(P<0.01)。结论:控制性降压可减少术中出血量,同时采用自体血回输可明显减少异体库存血的需要量。