川芎嗪促进同基因骨髓移植小鼠骨髓造血重建机制的探讨

本研究探讨川芎嗪对骨髓移植(BMT)后小鼠骨髓中干细胞因子(stem cell factor,SCF)mRNA表达水平的影响及其促进骨髓造血重建的机制。BMT后统计小鼠存活率和计数脾集落形成单位(CFU-S),并采用RT-PCR方法从mRNA水平动态检测骨髓基质细胞中SCF的表达。结果表明:川芎嗪组小鼠在BMT后第10天CFU-S计数、第7、14、21天存活率及川芎嗪组干细胞因子的表达水平均显著高于对照组(p<0.01或p<0.05)。结论:川芎嗪能够促进骨髓造血细胞的恢复,改善骨髓微环境,促进骨髓造血重建。

APNF_(0134)清除活性氧及抗超氧阴离子诱导的血小板聚集作用的研究

以化学发光法测定了①黄嘌呤－黄嘌呤氧化酶及碱性二甲亚砜二体系产生的O2；②H2O2的释放；③VitC－H2O2－Cu(2+)-酵母多糖产生OH·。观察APNF(0134)对上述体系产生的活性氧的影响。并以比浊法观察了O2诱导的人洗涤血小板的聚集及APNF(0134)对其的影响。结果表明APNF(0134)具有清除O2（两体系产生）、H2O2、OH·及抑制O2诱导的血小板聚集作用，呈剂量依赖性，IC(50)依次为4．39、4．89、13．62、7．19、122.48mg／L。

人CyclinD3基因启动子区的分子克隆及在A2780细胞中的功能分析

目的对Cyclin D3启动子的结构和功能进行分析。方法用PCR的方法扩增不同长度的Cyclin D3启动子片段。将PCR产物克隆入荧光素酶报道载体pGL3-Basic Vector,构建含有Cyclin D3启动子片段的重组子pD3-。双荧光素酶报道系统检测重组子pD3-在A2780细胞中的启动子活性,筛选关键转录调控区域。TFSEARCH 1.3 v分析该区域,结合文献复习筛选可能的转录因子。结果用PCR方法扩增出了不同长度的Cyclin D3启动子片段。上述片段克隆到pGL3-Basic中,构建了重组子pD3-。双荧光素酶报道系统发现在Cyclin D3启动子上游-1044 bp至-766 bp之间、-362 bp至-197 bp之间,分别存在一个正性调控区域。-766 bp至-551 bp之间存在一负性调控区域。TFSEARCH发现在上述调控区中存在C/EBP、SP1、AP1、HSF和MZF1等转录因子的结合基序。结论在Cyclin D3启动子片段上游-1044 bp至-766 bp之间、-362 bp至-197 bp之间,分别存在一个正性调控区域;-766 bp和-551 bp之间存在一负性调控区域。转录因子C/EBP、SP1、AP1、HSF和MZF1等可能在Cyclin D3的转录调控中发挥重要作用。

钙离子载体A23187诱导人外周血单个核细胞生成树突状细胞

目的:研究钙离子载体(CI)A23187诱导健康人外周血单个核细胞(PBMNCs)生成树突状细胞(DCs),探索DCs扩增的新方法。方法:分离健康人PBMNCs,分别加入GM-CSF+IL-4,A23187。体外培养72 h后,于光镜、电镜下观察细胞的形态,流式细胞仪检测细胞的表面标志,MTT比色法检测其对同种异体T细胞的刺激增殖作用,ELISA法检测IL-12、IFN-γ的水平。结果:健康人PBMNCs在A23187的条件下培养72 h后,就可以看到典型的DCs形态,CD40、CD86、CD83分子的表达均明显增高,但CD1α分子的表达增高不明显。具有明显刺激同种异体T细胞增殖的能力。IL-12、IFN-γ的水平比其他组明显增高。结论:健康人PBMNCs在钙离子载体A23187作用下能更有效地诱导生成成熟DCs。

再生障碍性贫血患者血清对脐血CD34^+细胞cyclin D关键亚型表达的影响

目的:确定控制脐血造血干/祖细胞增殖的细胞周期蛋白D(cyclinD)关键亚型,体外观察再生障碍性贫血(再障)患者血清对脐血造血干/祖细胞cyclinD关键亚型表达的影响,以探讨再障的发病机制。方法:用免疫磁珠阳性分选的方法分离脐带血CD34+细胞,用RT-PCR和Westernblotting方法检测其cyclinD各亚型的表达以筛选其关键亚型;用甲基纤维素半固体培养方法,观察再障血清对脐血CD34+细胞粒单系-集落形成单位(CFU-GM)形成的影响;再用半定量RT-PCR和Westernblotting方法检测再障血清对脐血CD34+细胞cyclinD关键亚型表达的影响。结果:RT-PCR和Westernblotting结果显示:控制脐血CD34+细胞增殖的cyclinD关键亚型为cyclinD3;再障血清可以显著抑制脐血CFU-GM的形成,并分别可以从mRNA和蛋白质水平抑制cyclinD3亚型的表达。结论:CyclinD3是控制脐血CD34+细胞增殖的关键cyclinD亚型,再障血清可以抑制其表达,这可能是再障造血抑制的一种机制。

脐带血造血干/祖细胞关键细胞周期蛋白D亚型的鉴定

目的 确定控制脐带血造血干 /祖细胞增殖的细胞周期蛋白D (CyclinD)关键亚型。 方法 用Midi MACS免疫磁珠阳性分选的方法分离出脐带血CD34+ 细胞 ,在体外扩增以后 ,用RT PCR和WesternBlot分别在mR NA水平和蛋白水平检测CyclinD不同亚型的表达。 结果 mRNA在CyclinD1无表达 ,CyclinD2、CyclinD3有表达 ;蛋白在CyclinD1无表达 ,CyclinD2弱表达 ,CyclinD3高表达。 结论 控制脐带血造血干 /祖细胞增殖的CyclinD关键亚型是CyclinD3。

干扰素-γ对脐血造血干/祖细胞细胞周期蛋白D各亚型表达的影响(英文)

体外观察干扰素 γ(interferon γ ,IFN γ)对脐血造血干 /祖细胞细胞周期蛋白D (cyclinD)不同亚型表达的影响 ,以探讨IFN γ造血抑制的机制。用免疫磁珠阳性分选的方法分离脐带血CD34+细胞 ,并进行体外扩增 ;用甲基纤维素半固体培养方法 ,观察IFN γ对脐血造血干 /祖细胞CFU GM形成的影响 ;用半定量RT PCR检测IFN γ对脐血造血干 /祖细胞cyclinD不同亚型表达的影响。结果显示IFN γ可以显著抑制脐血CFU GM的形成 ,并可以从mRNA水平抑制cyclinD2和CyclinD3亚型的表达。由此得出结论 ,IFN γ可以显著抑制cyclinD的表达 ,这可能是IFN γ介导造血抑制的一种机制。

纵隔和大脑髓样肉瘤1例报告并文献复习

目的:提高对髓样肉瘤(MS)的认识。方法:报道1例相继发生纵隔和大脑髓样肉瘤的诊断及治疗经过,并进行文献复习。结果:经标准DA方案化疗及局部放疗,髓样肉瘤达完全缓解。结论:髓样肉瘤在石蜡切片上因其形态学与非霍杰金淋巴瘤极其相似而容易造成误诊,免疫组化并结合血和骨髓常规可提高诊断率。联合化疗和局部放疗,有望改善不良预后。

红斑狼疮大面积皮肤出血性坏死1例

我院曾收治1例系统性红斑狼疮(SLE)出现大面积皮肤出血性坏死患者,报道如下:患者女性,31岁.因皮肤水泡伴低热半月,出血性丘疹1d入院.曾在门诊诊断脓泡疮,静注青霉素效果欠佳.入院前1d于前胸部、背部、左肘关节、双踝关节、双侧乳房及乳房周围皮肤先后出现出血性丘疹,伴局部疼痛、鼻衄、心悸、头昏.体检:T37.8℃,P96次/min,R22次/min,BP12/8kPa.贫血貌.面部可见蝶形红斑,头部皮肤可见白癜风样改变,脱发.前胸、背部、左肘关节、双踝关节、左臀部可见大片状出血性丘疹,局部皮肤呈黑色,变硬,有触痛,并可见散在性水泡.双踝关节附近可见溃疡灶,局部渗血不止.浅表淋巴结无肿大,巩膜无黄染,外鼻道可见血迹,胸骨无叩痛.心、肺、腹未发现异常.四肢关节无畸形.化验:Hb56G/L,RBC1.90×10^(12)/L,WBC8.3×10~9/L。

Effects of Serum from Aplastic Anemia patients on the Expression of Cyclin D3 Isoform in Umbilical Cord Blood CD34^+ Cells

Summary: The pathogenesis of aplastic anemia (AA) was explored and the effects of AA serum on the expression of crucial cyclin D isoform (cyclin D3) in umbilical cord blood hematopoietic stem/progenitor cells were observed. The CD34+ cells were isolated from the cord blood with MIDI-MACS Semi-solid methylcellulose culture technique was used to measure the formation of CFU-GM; The expression level of cyclin D3 was assayed by semi-quantitative RT-PCR and Western-blot after the hematopoietic stem/progenitor cells were incubated in AA serum. The results showed that the AA serum could inhibit the formation of CFU-GM and down regulate the expression level of the cyclin D3 at the mRNA and protein level respectively. In conclusion, the AA serum could inhibit the proliferation of hematopoietic stem cells and down regulate level of cyclin D3, which might be one mechanism of hematopoiesis inhibition in AA.

柚皮素诱导的K562细胞凋亡机制中P13K和Akt的表达

目的研究柚皮素（naringenin）对人慢性髓系白血病K562细胞株凋亡作用与P13K／Akt路径的关系。方法MTF法检测柚皮素在不同浓度、不同培养时间对K562细胞凋亡的影响；用免疫组织化学的方法检测柚皮素作用下K562细胞中的P13K和Akt的表达。结果柚皮素对K562细胞凋亡有明显诱导作用；P13K和Akt的表达与柚皮素作用浓度和时间呈负相关关系。结论柚皮素对K562细胞具有明显的诱导凋亡作用，其作用机制可能是通过减少K562细胞表达P13K和Akt来实现。

黄连解毒汤通过抑制血红素加氧酶-1发挥逆转慢性粒细胞白血病加速期的作用

目的:探讨黄连解毒汤(HLJDT)对慢性粒细胞白血病(CML)加速期的治疗作用,以及HLJDT及其主要活性成份之一的黄芩素对血红素加氧酶-1(HO-1)表达的影响。方法:通过对1例CML的患者口服HLJDT治疗6个月的观察,外周血检查和骨髓穿刺分析治疗前后外周血象和骨髓象的变化;流式细胞术分析HLJDT和黄芩素对CML细胞系K562的活细胞计数的影响;逆转录多聚酶链反应(RT-PCR)检测患者骨髓单个核细胞HO-1基因的表达;蛋白印记检测经黄芩素处理后K562细胞HO-1蛋白的表达水平。结果:口服HLJDT对CML加速期的治疗有效,可明显降低骨髓和外周血原始粒细胞和早幼粒细胞数,使疾病重新回复到慢性期;并且在体内能降低肿瘤细胞HO-1基因的表达,在体外,HLJDT能抑制K562细胞的增殖,且其主要成份黄芩素亦有相同作用,并且下调HO-1蛋白的表达。结论:HLJDT具有治疗CML加速期的作用,其机理与抑制HO-1基因和蛋白的表达有关;因此,HLJDT具有潜在的临床应用价值。