亚洲分枝杆菌肺病一例并文献复习

目的:报道1例亚洲分枝杆菌肺病患者临床诊治过程,并结合文献分析该病临床特征、影像特点及预后。方法:以1971年1月至2019年9月为检索时间,分别从PubMed数据库中以“Mycobacterium asiaticum”为检索词检索到27篇相关文献,其中仅有7例为亚洲分枝杆菌肺病患者报道;而以“亚洲分枝杆菌,肺病”为检索词在万方数据库和中国知网数据库中均未检索到相关文献。总结本例患者特征并进行入选患者文献复习。结果:本例亚洲分枝杆菌肺病患者为中老年女性,且合并结构性肺病,以咳嗽、咳痰为主诉,以支气管扩张、空洞为主要影像表现,痰液及肺泡灌洗液抗酸杆菌涂片及快速分枝杆菌培养均为阳性,DNA微阵列芯片法菌种鉴定均为结核分枝杆菌复合群,药物敏感性试验(液体法)提示对利福平、异烟肼、左氧氟沙星、贝达喹啉均耐药,血γ-干扰素释放试验、痰液及肺泡灌洗液TB-RNA和TB-DNA、探针熔解曲线法检测结核分枝杆菌对利福平和异烟肼耐药均为阴性,经肺泡灌洗液多种病原体靶向测序(tNGS)提示为亚洲分枝杆菌而临床确诊。抗非结核分枝杆菌药物治疗8个月后,患者呼吸道症状缓解、病灶好转,痰液及肺泡灌洗液分枝杆菌培养阴转,治疗有效。另7例报道患者中,合并结构性肺病4例,合并肿瘤1例(未启动治疗),5例肺部病灶以结节和空洞形成为主;治疗方案存在差异,其中3例接受1年以上治疗后实现临床治愈,2例临床症状及影像学有好转(包括1例实现细菌学阴转),1例复发。结论:亚洲分枝杆菌肺病相关报道较少,临床表现不典型,易误诊,对抗酸杆菌涂片及分枝杆菌培养阳性且菌种鉴定提示为结核分枝杆菌复合群但TB-RNA和TB-DNA阴性的患者,应注意排除非结核分枝杆菌肺病,tNGS检测有助于临床诊断,值得临床医生重视。

氟喹诺酮类药物体外药敏试验分析

目的了解氟喹诺酮类药物对结核分支杆菌的耐药情况。方法采用罗氏终点法对1 247株结核分支杆菌临床分离株进行体外药敏试验。结果1 247株结核分支杆菌对OFLX,CPLX,LVFX,SPFX,MXFX的耐药率分别为17.8%,18.5%,13.3%,10.3%,8.6%;235株初治肺结核分离株对OFLX,CPLX,LVFX,SPFX,MXFX的耐药率分别为10.6%,11.9%,6.0%,4.7%,4.9%。2004年OFLX及CPLX的耐药率显著上升(P<0.05)。结论氟喹诺酮类药物的抗结核活性以MXFX及SPFX较好,同时发现OFLX及CPLX的耐药性有逐年升高趋势。

聚合酶链反应检测结核菌的应用研究

采用38KD－419bP系统检1098例病人的标本，并同时进行涂片找结核菌、结核菌培养等检查。结果表明，结核病PCR检测的阳性率为54．7％（428／782），菌阳率为27．l％（190／782），说明PCR是敏感性和特异性均较好的方法。在实验过程中使用了简易的热起动法，同时限定了敏感度，设立一系列的质控，并对影响PCR检测结核菌的各种因素作了分析。

噬菌体生物扩增法测定痰标本结核分枝杆菌利福平耐药性

目的建立快速测定痰标本中结核分枝杆菌利福平(RFP)耐药性的噬菌体生物扩增法,探讨其在临床应用的可行性。方法噬菌体生物扩增法测定362份涂阳痰标本结核分枝杆菌对RFP的耐药性,并与罗氏绝对浓度法结果进行比较,对不符合的样本,用基因芯片的方法分析rpoB基因的突变情况。结果362份涂阳痰标本,培养阳性360份,菌种初步鉴定有17份样本为非结核分枝杆菌,噬菌体生物扩增法RFP耐药为123份,敏感的196份,两法结果一致的为88.6,如以绝对浓度法药敏结果为标准,则噬菌体生物扩增法测定利福平耐药的敏感性为93.3,特异性为87.9,阴性预测值为96.4,阳性预测值为78.9,准确性为89.7,涂阳等级(1+～3+)与实验的有效性相关。结论噬菌体生物扩增法测定痰标本利福平的耐药性只需2d,可作为快速筛选方法应用于临床。

103例肺结核病人血清胰岛素RIA测定的结果分析

糖尿病与肺结核在临床上常并发,据WHO的资料统计,近两年的并发率又有增加的趋势。现阶段血清胰岛素测定,主要为RIA法,但其正常参考值因地区、试剂厂家及操作方法。操作技术不尽相同,另因结核病所致胰岛损害可影响碳水化合物代谢,结核病所致的发热、消耗及中毒症状可导致胰腺代谢功能调节障碍。本室于去年对肺结核病人的血清胰岛素RIA法进行测定,现将结果报告如下。

肺结核患者CD4^+T淋巴细胞凋亡及相关细胞因子水平变化

目的探讨肺结核患者外周血CD4+T淋巴细胞凋亡及相关细胞因子水平的变化。方法分离肺结核患者和正常人外周血单核细胞标记后用流式细胞仪测定CD4+T淋巴细胞凋亡率,用ELISA法检测白细胞介素-10(IL-10)与干扰素-γ(IFN-γ)的浓度。结果肺结核患者外周血CD4+T淋巴细胞凋亡率明显高于正常对照组,淋巴细胞培养上清液IL-10水平显著高于对照组,而IFN-γ水平显著低于对照组。涂阳组外周血CD4+T细胞凋亡率高于涂阴组与健康对照组,复治组外周血CD4+T细胞凋亡率显著高于初治组与健康对照组。外周血CD4+T细胞凋亡率与IL-10,IFN-γ水平相关。结论外周血CD4+T淋巴细胞凋亡增加可能是肺结核的免疫发病机制之一,对诱导或抗凋亡的某些因素进行干预有望为结核病的治疗带来新的希望和突破。

利福平耐药实时荧光定量核酸扩增检测技术的诊断效果对比研究

目的 评价利福平耐药实时荧光定量核酸扩增检测技术（GeneXpert Mtb/RIF）检测临床标本诊断结核病和耐利福平结核病的效能.方法 2011年1-5月从解放军第三○九医院、广州市胸科医院和河南省疾病预防控制中心3家单位,连续收集门诊就诊的1971例疑似结核病患者的痰标本,进行涂片、金标准培养和金标准比例法传统药敏试验和GeneXpert Mtb/RIF检测.应用SPSS 11.5统计软件对GeneXpert Mtb/RIF与不同检测方法进行敏感度和特异度分析,以P＜0.05为差异有统计学意义.结果 与涂片及培养比较,GeneXpert Mtb/RIF检测1968例（1971例中有3例污染排除）痰标本诊断结核病的敏感度和特异度分别为93.27％（748/802）、91.93％（797/867）和91.60％（1068/1166）、95.55％（1052/1101）;与临床诊断比较,GeneXpert Mtb/RIF检测1945例（1971例中有26例无法定诊）痰标本诊断结核病的敏感度和特异度分别为78.66％（822/1045）、98.67％（888/900）;与金标准传统药敏试验比较,GeneXpert Mtb/RIF检测797例标本诊断耐利福平结核病的敏感度和特异度分别为97.92％（188/192）、100.00％（595/595）.结论 GeneXpert Mtb/RIF是一种检测痰标本诊断结核病及耐利福平结核病的快速简便、自动化、敏感度和特异度较高的分子生物学方法,适用于结核病和耐利福平结核病的临床诊断.

治疗期肺结核患者外周血CD4^+ T细胞变化的临床意义

目的：探讨肺结核患者强化治疗期外周血CD4＋T细胞变化的临床意义。方法：应用流式细胞术对62例肺结核患者外周血的CD4＋T细胞计数，根据患者治疗前影像学肺部病灶累及程度及治疗前后影像学变化进行分组比较，并与30例健康者作比较。结果：治疗前肺结核组CD4＋T细胞计数（439．21±210．56）／mm^3明显低于健康对照组（748．47±261．85）／mm^3（P〈0．01）。治疗前多叶受累组的CD4＋T细胞计数（399．83±194．17）／mm^3低于局限组对应的（521．90±224．40）／mm^3（P〈0．05）；治疗后病灶吸收明显组的CD4＋T细胞计数从（480．75±228．49）／mm^3上升至（616．75±280．57）／mm^3，达健康组水平（P〉0．05），而病灶吸收不明显的CD4＋T细胞计数仅从（412．97±197．00）／mm^3上升至（447．55±204．60）／mm^3，仍低于健康水平（P〈0．01）。结论：肺结核患者存在外周血CD4＋T细胞减少，经抗结核治疗后，外周血减少的CD4＋T细胞部分可恢复，外周血CD4＋T细胞与肺结核病情严重性相关，病情越严重CD4＋T细胞数越低。

γ-干扰素释放试验诊断活动性结核病的临床评价

目的:评价γ-干扰素释放试验(interferon-gamma release assay,IGRA,T-SPOT·TB)在活动性结核病诊断中的价值。方法:整理我院2012年11月至2013年6月进行IGRA检验的病例资料,共745个病例,其中结核病353例(包括肺结核294例,肺外结核59例),非结核分枝杆菌病19例,其他疾病132例,另外241例样本因其病历资料不全,视为无效数据,不纳入统计分析;依据疾病临床诊断结核IGRA检验结果进行分组分层比较,计算灵敏度、特异性、阳性预测值(PPV)、阴性预值(NPV)、阳性似然比(LR+)及阴性似然比(LR-)。结果:353例结核病患者T-SPOT·TB灵敏度和特异性分别是89.2%(95%CI:85.5%～92.3%),77.5%(95%CI:70.0%～83.9%),PPV、NPV、LR+、LR-分别是90.2%、75.5%、3.96、0.14,患病率是70.0%,确诊结核病(菌阳)与临床诊断结核病(菌阴)灵敏度比较,P=0.221 5;肺结核和肺外结核检测的灵敏度分别是90.1%、84.7%,特异性均是77.5%;19例非结核分枝杆菌病无发现阳性。结论:IGRA对确诊结核病(菌阳)和临床诊断结核病(菌阴)灵敏度、特异性差异无显著性,同时NPV均大于PPV,提示IGRA可用于排除活动性结核病的诊断。

初治肺结核患者外周血CD4^+/CD8^+T细胞、IgG/IgM抗体与感染程度的相关性

目的探索外周血CD4+,CD8+T淋巴细胞、免疫IgG,IgM抗体在初治肺结核患者外周血的改变及其结核杆菌感染程度的关系。方法选择72例初治肺结核患者和25例正常人,采用免疫金斑点渗滤法检测其血清抗结核抗体;分别用流式细胞术和淋巴细胞转化试验测定外周血T淋巴细胞的亚群水平。结果患者CD4+/CD8+T细胞水平较正常人低,CD4+/CD8+比值和结核易感性呈负相关;IgM抗体与CD8+T细胞水平呈正相关;机体感染结核杆菌的程度与外周血IgG抗体、CD8+T细胞水平呈正相关。结论初治肺结核患者外周血CD4+,CD8+T细胞免疫与IgG,IgM抗体免疫存在客观的关联,但其相互影响机制有待进一步研究。

1819株非结核分枝杆菌行药物敏感性试验的结果分析

目的对广州市1819株非结核分枝杆菌临床分离株行药物敏感度试验的结果进行回顾性分析,为临床第一线治疗非结核分枝杆菌病提供可靠的科学依据。方法按照中国防痨协会制定的《结核病诊断实验室检验规程》,对2009—2011年来自广州市胸科医院门诊就诊和住院患者以及少部分院外单位在实验室中从痰液、支气管冲洗液、胸腹腔积液、尿液以及咽拭子等样品培养出的14 095株分枝杆菌进行菌型鉴定,对确认为NTM的实验菌株3264株,选择没有混合感染的株种1819株采用临床上常用的一、二线药物(包括INH、RFP、S、EMB、Am、Clr、Lfx、Mfx、环丙沙星(CIP)、力克菲蒺、Rfb、Pto和Cm共计13种药物)进行敏感度试验。结果非结核分枝杆菌对INH和力克菲蒺耐药率达96.15%(1749/1819)和95.41%(1248/1308);其他依次为S 76.25%(1387/1819)、Pto 73.94%(817/1105)、Lfx 72.94%(954/1308)、RFP 72.51%(1319/1819)、EMB 70.42%(1281/1819)、Mfx65.29%(854/1308)、CIP 60.13%(543/903)、Rfb 56.87%(236/415)和Cm 50.50%(102/202);而Clr和Am对非结核分枝杆菌的敏感率为88.17%(1163/1319)和67.73%(892/1317)。结论非结核分枝杆菌对一线抗结核药物具有高度的原始耐受性,而大环内酯类的Clr和氨基糖甙类的Am则对非结核分枝杆菌有较强的抑菌效能,因而对实验室中分离出的非结核分枝杆菌有必要进行药物敏感度试验。

肿瘤标志在良恶性胸水鉴定的应用

目的:探讨胸腔积液肿瘤标志CEA、CA19-9、CA12-5、NSE、CYFRA21-1的检测在鉴别结核性胸积液与癌性胸积液的意义.方法:应用生物素-链霉亲和素双抗夹心法测定.……

SAT技术检测结核杆菌rRNA对肺结核的快速诊断价值

目的研究结核分枝杆菌RNA恒温扩增实时检测技术(SAT)检测痰、支冲液等标本中对肺结核的诊断价值。方法收集广州市胸科医院疑似肺结核患者的痰液169份、支冲液151份。同时行快培法(BD960法)及SAT-TB法检测同时进行比较,记录结果。分别以BD960法及临床诊断作为参考标准,计算SAT-TB法的敏感度、特异性、阳性预测值、阴性预测值。结果以BD960法为参考标准,SAT法对肺结核患者在痰液、支冲液标本的敏感度、特异度、阳性预测值、阴性预测值分别为:84.00%、93.06%、89.36%、89.33%;89.19%、95.12%、94.29%、42.39%。以临床诊断作为参考标准,SAT法和BD960法在痰液、支冲液标本对肺结核的敏感度、特异度、阳性预测值、阴性预测值分别为:57.73%、93.06%、91.80%、62.04%;51.82%、94.29%、96.61%、42.39%;51.55%、95.83%、94.34%、59.48%;33.64%、90.24%、90.24%、33.64%。结论 SAT-TB法检测痰液和支冲液标本中的结核杆菌具有快速、敏感度高的优点,可提高结核分枝杆菌的检出率。

广东省地区结核分枝杆菌寡核苷酸基因分型及耐药相关性

目的研究结核分枝杆菌(MTB)不同基因型在广东省各地区的流行情况及其耐药相关性。方法随机数字法抽取广州市胸科医院2014-2015年临床分离的来自于广东省不同地区的504株结核分枝杆菌菌株,采用比例法进行药物敏感性实验,选用间隔区寡核苷酸分型方法(Spoligotyping)对结核分枝杆菌进行基因分型。基因型耐药率差异比较采用χ2检验。结果 (1)在504株结核分枝杆菌临床分离株中北京家族和非北京家族分别是386株和118株。非北京家族中,T家族高达48株;其余是H3家族、EAI家族、MANU家族、AMBIGO家族、LAM家族以及新发基因型。北京家族构成比在性别、年龄上无统计学差异(P>0.05),但在汕头、汕尾、揭阳、东莞四个地级市的构成比低于广州市,差异有统计学意义(P<0.05)。(2)504株结核分枝杆菌中,453株在SPOIDB 4.0数据库中分为49种寡核苷酸类型归类于30个簇,其主要流行簇依次为:SIT1、SIT53、SIT52、SIT19、SIT523。SIT1基因型的异烟肼(INH)、利福平(RFP)、链霉素(SM)、乙胺丁醇(EMB)、吡嗪酰胺(PZA)、阿米卡星(AMK)、左氧氟沙星(LVFX)、耐多药(MDR)、泛耐药(XDR)的耐药率均高于SIT53、SIT52、SIT19,而SIT523在RFP、SM、EMB、MDR的耐药率方面高于SIT1(3)主要流行基因型北京家族的INH、PZA、AMK的耐药率高于非北京家族,差异有统计学意义(P<0.05),其余药物的耐药性无显著性差异(P>0.05)。结论广东省结核分枝杆菌呈基因多态性,北京基因型菌株为本省结核分枝杆菌主要流行株,而且与异烟肼、吡嗪酰胺、阿米卡星耐药相关。非北京基因型在潮汕和东莞等华侨之乡比例有所增加。

广州地区临床分离非结核分枝杆菌菌种鉴定及耐药结果分析

目的分析广州地区临床分离的非结核分枝杆菌(NTM)的菌种鉴定结果及耐药情况。方法用改良罗氏培养基培养法分离680例疑似结核病患者痰液,对确诊为NTM的38例,用传统生化反应进行菌种鉴定,采用以罗氏培养基为基础的绝对浓度法做NTM药物敏感试验。结果 38株NTM按Runyon分类法,检出感染菌种分布为Ⅰ群1株(2.6%),Ⅱ群7株(18.4%),Ⅲ群18株(47.4%),Ⅳ群12株(31.6%);单一耐药有13株(34.2%),且只耐异烟肼;同时耐2种药的比例为10.5%(4/38);同时耐3种药的比例为10.5%(4/38);同时耐4种药耐药率为44.7%(17/38)。大多数NTM对常用的抗结核药物呈高度耐药。结论广州地区NTM感染菌种以鸟-胞内分枝杆菌复合群分离率比例最高,为44.7%(17/38);耐药方式以单一耐异烟肼和同时耐4种药物为主;NTM对常用的抗结核药物呈高度耐药现象。

交叉引物扩增法对初诊肺结核患者检测效能的多中心研究

目的 评估交叉引物扩增法（cross priming amplication,CPA）对初诊疑似肺结核患者的检测效能及推广价值.方法 选取2015年2-12月于首都医科大学附属北京胸科医院、北京市昌平区结核病防治所、天津市海河医院等21家医疗机构门诊就诊的初诊疑似肺结核患者作为研究对象,共1020例.收集研究对象3份痰标本,由实验室人员按要求对痰标本进行痰涂片和痰培养[17家单位使用罗氏固体培养检测819例患者,4家单位只使用BACTEC MGIT 960培养（检测151例）或其他液体培养（检测50例）]和CPA检测,评估CPA检测效能,并于试验结束后对实验室操作人员进行CPA检测技术可接受度问卷调查.结果 现场共纳入肺结核可疑症状的初诊患者1020例,涂阳患者334例,涂阴患者685例,1例无涂片结果.痰培养阳性率为45.3％（462/1020）,CPA检测阳性率为47.6％（485/1019）.以培养法作为参照,CPA检测结核分枝杆菌的敏感度为89.8％（415/462）,特异度为87.4％（487/557）;在涂阳患者中,CPA检测结核分枝杆菌的敏感度为93.8％（289/308）,特异度为34.6％（9/26）;在涂阴患者中,CPA检测结核分枝杆菌的敏感度为81.8％（126/154）,特异度为90.0％（478/531）.CPA检测法与固体（液体）培养法一致性较好（Kappa=0.769）.通过可接受度问卷调查,81.8％（18/22）的操作人员认为CPA检测操作比较容易和便捷;相比培养法,所有操作人员均认为CPA检测对实验室人员的感染风险较小.结论 CPA检测方法具有较高的敏感度和特异度,并且与培养法一致性较好,有助于早期、快速发现结核病患者,在我国结核病诊断发现中具有推广应用的前景.

白介素-10基因多态性与肺结核病易感性的研究

目的 研究白介素-10（IL-10）基因（-1082 G/A）多态性与肺结核病易感性的关系.方法 利用序列特异性引物多聚酶链反应（RCR-SSP）技术对40例肺结核患者及40例对照人群IL-10（-1082 G/A）多态性进行检测,并对其易感性进行分析.结果 对照组IL-10（-1082 G/A）AA基因型频率（0.825）显著高于患者组（0.55）（P＜0.01）.GA基因型患者组显著高于对照组（P＜0.05）.患者纽G等位基因频率（0.25）显著高于对照组（0.1）（P＜0.01）,RR为1.57,95%CI（1.10～2.24）,P＜0.05.结论 IL-10（-1082 G/A）多态性可能与肺结核病的易感性相关,因此其多态性检测可作为遗传标记进行检测,用于早期发现对肺结核病易感的高风险人群,对于结核病防治工作具有重要意义.

体外γ-干扰素释放试验在儿童结核病密切接触者筛查结核病的作用

目的:探讨体外γ-干扰素释放试验(IGRA)在儿童结核病密切接触者结核病筛查的可行性。方法:对我院儿科门诊就诊185例儿童结核病密切接触者采用IGRA检测,对其与结核病诊断相关性进行分析。结果:IGRA阳性组中,儿童结核病密切接触者PPD强阳性率(PDD≥15 mm)为50.9%,明显高于IGRA阴性组的9.1%(χ2=37.263,P<0.00);IGRA阳性组中,儿童结核病密切接触者发病率为30.2%,明显高于IGRA阴性组的3.0%(χ2=28.928,P<0.00);IGRA在儿童筛查结核病敏感性为80.0%,特异性为77.6%;联合TST检测其敏感性达到95.0%。结论:对儿童结核病密切接触者开展IGRA筛查,可提高患者发现率和减少儿童结核病密切接触者影像学筛查。