动态观察肝脏JNK信号通路在非酒精性脂肪肝病中的表达

目的动态观察c-jun氨基末端激酶(c-JunN-terminal kinase,JNK)信号传导通路在非酒精性脂肪肝病(non-alcoholic fatty liver disease,NAFLD)大鼠肝脏中的表达及探讨其在该病发生中的意义。方法雄性SD大鼠192只,随机分为对照组(NG)和高脂组(HG)各96只,各组分别于第1周开始至第16周末,每2周随机抽取8只大鼠使用正糖高胰岛素钳夹实验技术检测葡萄糖输注率(GIR),另抽取8只大鼠门静脉采血检测转氨酶、血脂等指标,制备肝匀浆测定氧化指标;Western blot检测肝组织JNK1、胰岛素受体底物1(IRS-1)、胰岛素受体底物1丝氨酸307磷酸化(p-IRS-1Ser307)、蛋白激酶B(PKB)、蛋白激酶B丝氨酸473磷酸化(p-PKB Ser473)水平。结果从第4周末起,HG与同期NG比较,HG各组间两两比较:GIR水平降低,差异均有显著性(均P<0.05)。从第2周末起,HG与同期NG比较,HG各组间两两比较:肝组织JNK1蛋白表达、p-IRS1Ser307水平增高,p-PKBSer473水平降低,差异均具有显著性(均P<0.05)。JNK1的蛋白表达强度与IR呈正相关(Pearson相关系数为0.968,P<0.01)。结论高脂饮食可诱导肝组织JNK1增高,通过影响胰岛素信号蛋白IRS-1、PKB的磷酸化功能导致IR;肝组织的IR出现在全身IR和肝脏脂肪变性之前,肝组织的IR可能是NAFLD发病的启动因素。

饮食调整对非酒精性脂肪肝病的治疗作用及机制

目的:观察饮食调整对SD大鼠非酒精性脂肪肝病(NAFLD)的治疗作用,并探讨其作用机制.方法:SD大鼠,♂,80只,随机分为8wk对照组(NG8wk组)、12wk对照组(NG12wk组)、8wk高脂组(HG8wk组)、12wk高脂组(HG12wk组)及饮食调整组(DG组)各16只.NG组喂饲普通饲料,HG组喂饲高脂饲料,DG组喂饲高脂饲料,8wk后改普通饲料继续喂饲4wk.正糖高胰岛素钳夹实验检测葡萄糖输注率(GIR),放射免疫法和生化法检测血清及肝匀浆生化指标;Westernblot检测肝组织c-jun氨基末端激酶(JNK)1、胰岛素受体底物-1(IRS-1)、胰岛素受体底物-1丝氨酸307磷酸化(phospho-IRS-1Ser307,p-IRS-1Ser307)的表达.结果:HG组与同期NG组大鼠比较,体质量、肝指数、血清ALT、AST、TG、TC、FFAs、FIns、TNF-α及肝匀浆TG、TC、FFAs、MDA均明显升高(P<0.05或0.01),肝匀浆SOD降低(t=4.88,7.92);GIR降低(均P<0.05);肝组织JNK1蛋白表达、p-IRS1Ser307水平增高(t=4.39,5.81;4.60,6.48),JNK1蛋白表达强度与胰岛素抵抗呈正相关;HG12wk组和HG8wk组大鼠上述各项指标比较,差异均具有统计学意义(P<0.05或0.01);随着喂养时间的延长,HG组大鼠肝细胞脂肪变性明显加重;而DG组大鼠的上述各项指标均得到明显改善,但仍未达到同期NG组大鼠水平(均P<0.05).结论:高脂饮食喂养8wk及12wk分别能够构建SD大鼠NAFLD及NASH模型,仅恢复正常饮食对于高脂饮食诱导的NAFLD有一定的治疗作用.

临床教学管理中应用链式管理理念的总结分析

目的总结在临床教学管理中应用链式管理的体会。方法介绍2018-2019年我院试行对临床教学进行网络支持下链式管理的实施过程,并分析其效果。结果链式管理能够强化纪律性,更好地体现以学生为主体的教学理念,更好地协调各部门工作,充分发挥教学督导的作用。结论链式管理有利于提高临床教学的质量。

吡格列酮对SD大鼠非酒精性脂肪肝病形成的预防作用及其机制

目的:探讨吡格列酮(pioglitazone,PIO)对SD大鼠非酒精性脂肪肝病(non-alcoholic fatty liver disease,NAFLD)形成的干预作用及机制.方法:♂SD大鼠72只,随机分为正常饮食组(NG)、高脂饮食组(HG)和PIO干预组(PIOG)各24只.PIOG喂饲高脂饲料,并同时予PIO药物灌胃8wk.正糖高胰岛素钳夹实验检测IR水平,放免法和全自动生化仪检测血清生化指标,RT-PCR检测过氧化物酶体增殖物激活受体(peroxisome proliferator-activated receptorγ,PPARγ)mRNA表达,Western blot检测肝组织c-Jun氨基末端激酶(c-Jun amino-terminal kinase1,JNK1)和PPARγ蛋白表达.结果:HG大鼠GIR水平降低和JNK1蛋白表达增高,均呈明显时间依赖性(均P<0.05);8wk末HG大鼠肝细胞出现明显脂肪变性,与NG相比,体质量、肝指数,TG、ALT、AST、FFAs、FINS、TNF-α水平明显增高,IR加重,JNK1蛋白表达明显升高,肝组织PPARγ表达明显降低(TG:1.23±0.08vs0.62±0.12,ALT:92.80±7.09vs51.34±8.12;AST:153.22±20.65vs119.26±13.61;FFAs:511.94±24.88vs335.31±15.71;FINS:41.23±1.84vs22.65±2.25;TNF-α:1.02±0.12vs0.34±0.07,均P<0.05);而PIOG大鼠,上述各项指标均得到明显改善,但仍不能完全达到NG大鼠水平(均P<0.05).结论:PIO对于由高脂饮食诱导的NAFLD的形成及其他IR相关疾病有预防作用.

c-jun氨基末端激酶在非酒精性脂肪肝病胰岛素抵抗大鼠中的表达及意义

目的观察c-jun氨基末端激酶(JNK)在非酒精性脂肪肝病(NAFLD)大鼠中的表达及在胰岛素抵抗(IR)发生中的意义。方法雄性SD大鼠32只,随机分为8周对照组、12周对照组、8周模型组和12周模型组各8只,分别给予正常饮食或高脂饮食喂养8周和12周。于第8周和第12周用生化法检测大鼠血清甘油三酯(TG)、空腹血糖(BS)含量;正糖高胰岛素钳夹实验检测IR水平;免疫组织化学和Western blot技术检测肝组织中JNK表达变化。结果大鼠NAFLDIR模型组TG、BS含量较对照组增高,随着喂养时间的延长,大鼠肝细胞脂肪变性及IR水平逐渐加重,JNK阳性细胞和JNK蛋白表达强度逐渐增加,JNK的表达强度与IR呈正相关。差异均有显著性(P<0.05)。结论高脂饮食喂养8周能够成功构建NAFLDIR大鼠模型,肝细胞JNK可能参与了NAFLDIR的发生和发展。

Klinefelter综合征并糖脂代谢异常一例

Klinefelter综合征是一种以性腺发育异常、性功能减退为主要表现的性染色体异常疾病。该综合征可合并糖尿病、糖耐量异常或代谢综合征,国内仅有少量报道。现将我们收治的1例患者报道如下:1病例简介1.1主诉、病史及体格检查患者,男性,29岁,2014年9月12日因'性发育迟缓10年'入住中山大学附属第三医院内分泌科。10年前患者无明显诱因出现阴茎生长迟缓,伴有晨勃及遗精次数减少,

采用PDCA法确定目标督促执行检查反馈提高病历质量

采用计划-执行-检查-处理(Plan-Do-Check-Action,PDCA)法来指导和管理病历两年,发现可以显著提高运行病历、终末病历质控中入院记录和病程记录、抗生素使用记录情况,较之原有方式有显著性差别;对于终末病历质控中的基本要求、医嘱单、辅助检查和知情同意书则和原有方式类似。PDCA在目标制定时应力求单纯,在每一个循环中如能增加"总结分析"的过程,则可能效果更好。

借助网络技术对见习进行链式管理的探讨

目的:探讨用网络技术对见习进行链式管理的效果。方法:对2017年至2019年216位学生和10位带教老师进行链式管理;2014年至2016年212位学生和11位带教老师作为对照。结果:采用链式管理后,缺勤率下降;见习、小讲课和教学查房迟到减少;课前预习增多;作业按时完成率提高;带教老师小讲课和教学查房分数提高,教师完成批改作业按时率上升,完成评价学生时间缩短。结论:采用链式管理可以强化师生的纪律性。

“激越四段式”教学法在线上授课的初步探讨

目的探讨线上教学采用“激越四段式”教学法的效果。方法对2020年5—6月线上学习的医学本科生在5月采用“激越四段式”教学法,在6月采用常规授课,比较这两种教学法的效果。结果采用“激越四段式”教学法,平均每次课点赞数和互动的消息数较多,学生的见习资格考试成绩较高,从期末到见习之前成绩下降较少(P<0.05)。结论“激越四段式”教学法能够增加师生互动,活跃课堂气氛,有助于学生更牢固地掌握所学的知识。

借助网络技术对住院医师规范化培训进行链式管理的实践和体会

过程管理是保证培训质量的重要环节,中山大学附属第三医院对住院医师规范化培训(简称住培)进行链式管理。试运行1年,本院住院医师在国家年度业务水平测试的成绩百分位由59.0%±8.7%升至67.4%±9.5%,医院住培工作在全国排名由2018年的54位升至2019年的25位,1个专业排名全省第一,3个专业进入全省前三,进入全省前十名的专业由3个增加至9个。链式管理能够确保住院医师遵守纪律,带教老师认真教学,提高技能中心的利用率以及充分发挥教学督导的作用。这种管理模式运行时间还不长,需要进行更多更深入的研究,以达到通过过程管理提高住培工作质量的目的。

头孢哌酮钠/舒巴坦钠致凝血功能障碍1例报告

目的通过报告1例头孢哌酮钠/舒巴坦钠致乙肝肝硬化患者凝血功能障碍,以强调乙肝肝硬化患者应谨慎使用该药。方法对患者的病史、用药情况和住院期间的检查结果和治疗情况进行分析。结果患者出现凝血功能障碍和头孢哌酮钠/舒巴坦钠很可能相关。结论对肝硬化患者,使用头孢哌酮钠/舒巴坦钠时应警惕可能出现凝血功能障碍,应定期监测凝血功能以便及时发现,必要时适当补充维生素K以防止出现严重后果。

建立自发缓解2型糖尿病动物模型可行性探讨

目的探讨建立2型糖尿病自然病程中高血糖自发缓解现象动物模型的可行性。方法将8只C57BL/6J品系雄性小鼠(体质量21 g)随机分为高脂饮食组(4只)和对照饮食组(4只),分别予高脂饲料(20%碳水化合物、20%蛋白质、60%脂肪)和匹配对照饲料(70%碳水化合物、20%蛋白质、10%脂肪)喂养。每周监测2组体质量、血糖、摄食量,为期12个月。高脂饮食诱导高血糖出现及自发缓解时行葡萄糖耐量实验、胰岛素耐量实验。观察终点检测2组小鼠血清胰岛素、血脂、肾脏功能及评价胰岛β细胞质量。结果高脂饮食组空腹血糖呈现动态变化,第3个月开始出现空腹高血糖,与对照饮食组比较差异有统计学意义(P<0.01),这一趋势持续至第7个月;第8个月空腹血糖开始下降,与对照饮食组比较差异无统计学意义(P>0.05),直至观察终点。上述高血糖自发缓解表型伴随体质量持续增加、胰岛素抵抗进展、平均胰岛面积增大、血清胰岛素水平显著升高。结论12个月单纯高脂饮食喂养C57BL/6J小鼠可作为2型糖尿病自发诱导缓解的动物模型。

新型降糖药物的减重效果可以替代减重手术吗?

肥胖和糖尿病及其并发症的发生密切相关,因而减重对于预防糖尿病的发生发展非常重要。减重手术的疗效确切,但仍存在一定局限性。近几年,新型降糖药物的减重效果表现尤为亮眼,药物治疗是否可以替代减重手术?该文分别从减重手术和新型降糖药物的优缺点方面展开阐述,认为药物和手术治疗都是目前在减重降糖治疗中的有效手段,临床上应该根据实际情况选择最适合患者的安全有效的减重治疗方法。

建筑桩基工程中旋挖钻孔成桩施工技术

社会经济的快速发展为我国城市化建设提供了有利的条件。目前,我国正处于城市建设发展的高潮,所以导致城市建设在发展的过程中面临着土地资源短缺的问题。为了能够有效的满足在社会经济快速发展,今天人们对住房以及建筑物各方面的需求,我国建筑行业逐渐向高层建筑方向发展。

JNK信号通路在非酒精性脂肪肝病形成中的作用及其机制

目的观察c-Jun氨基末端激酶（JNK）信号传导通路在非酒精性脂肪肝病（NAFLD）大鼠中的表达，探讨其在NAFLD发病中的作用。方法雄性SD大鼠64只，随机分为8周对照组、12周对照组、8周高脂组及12周高脂组各16只，对照组喂饲普通饲料，高脂组喂饲高脂饲料。正糖高胰岛素钳夹实验技术检测葡萄糖输注率（GIR），生物化学法检测空腹血糖（FBS）、ALT、AST、甘油三酯（TG）、总胆固醇（TC）；放射免疫法检测空腹胰岛素（Fins）、肿瘤坏死因子α（TNFα）；分光光度计测定超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）、游离脂肪酸（FFAs）；Western blot检测肝组织JNK1、胰岛素受体底物1（IRS-1）、胰岛素受体底物1丝氨酸307磷酸化（pIRS-1^Ser307）、蛋白激酶B（PKB）、蛋白激酶B丝氨酸473磷酸化（P—PKB^Ser473）。正态分布数据采用t检验，偏态分布数据采用秩和检验。结果8周高脂组与8周对照组、12周高脂组与12周对照组比较：体质量、肝指数、血清ALT、AST、TG、TC、Fins、FFAs、TNFα、及肝匀浆TG、TC，FFAs、MDA，高脂组（8、12周）均明显高于对照组（8、12周），t值分别为5．90和7．92、9．91和7．42、5．49、4．99和5．31、7．37、2．30和5．86、2．64和3．85、3．86和6．61、10．53、7．07和8．45、T=89．5和T=100、5．20和6．18、11．90和17．83，P值均〈0．05或〈0．01。肝匀浆每毫克蛋白SOD：8周对照组、12周和8周高脂组、12周分别为（21．6±4．0）U、（22．0±3．6）U、（13．0±3．0）U、（10．1±2．2）U，高脂组明显降低，t值分别为4．88、7．92，P值均〈0．01；GIR：8周对照组、12周和8周高脂组、12周分别为（10．8±1．3）mg·kg^-1·min^-1、（10．7±1．2）mg·kg^-1·min^-1、（8．1±1．1）mg·kg^-1·min^-1、（6．3±1．5）mg·kg^-1·min^-1，高脂组明显降低，t值分别为4．52、6．41，P值均〈0．01；高脂组与同期对照组比较：肝组织JNK1蛋白表达、p—IRS-1^Ser307水平均增高，t值分别为4．39、5．81和4．06、6．48，P值均〈0．01，P—PKB^Ser473水平降低，t值分别为3．32、4．96，P值均〈0．01。JNK1的蛋白表达强度与IR呈正相关（Pearson相关系数为0．718，P〈0．01）。随着喂养时间的延长，高脂组大鼠肝细胞脂肪变性逐渐加重，8周形成NAFLD，12周可形成非酒精性脂肪性肝炎。结论高脂饮食可诱导肝组织JNK1增高，通过影响胰岛素信号蛋白IRS-1、PKB的磷酸化功能，导致IR从而参与了NAFLD的发生和发展。

持续皮下胰岛素输注对评估胰岛β细胞功能的影响

目的探讨2型糖尿病患者接受持续皮下胰岛素输注（CSII）治疗时CSII对胰岛功能评估的影响。方法2015年5至12月于中山大学附属第三医院内分泌与代谢病学科住院的125例2型糖尿病患者停用原降糖药物1d后检测空腹血糖、糖化血红蛋白、血脂、C肽（空腹、固定餐餐后30min、2h），检测后接受CSII治疗。血糖达标后在继续使用CSII的情况下检测空腹、固定餐餐后30min、2hC肽。检测当天晚上22时开始停止CSII治疗，第2天重复前1天检测。结果与CSII治疗前比较，停CSII后空腹[（0．41±0．16）比（0．35±0．20）nmol／L，P=0．015]、餐后30min[（0．71±0．33）比（0．57±0．31）nmol／L，P=0．005]、餐后2h[（1．37±0．75）比（0．84±0．54）nmol／L，P〈0．001]C肽水平均较治疗前各相应时间点C肽水平升高，而停CSII前空腹[（0．23±0．13）nmol／L]、餐后30min[（n39±0．26）nmol／L]、餐后2h[（0．67±0．50）nmol／L]C肽水平则低于治疗前相应时间点C肽水平（P〈0．001，P〈0．001，P=0．023）。经CSⅡ治疗后，停CSⅡ后各时间点的C肽水平较停CSⅡ前明显升高（均P〈0．001），各时间点C肽升高百分比分别为：141％（空腹）、127％（餐后1h）及219％（餐后2h）。结论为提高评估胰岛功能的准确性，使用CSII治疗的2型糖尿病患者评估胰岛功能时最好停用CSⅡ。

表达人JNK基因重组腺病毒的构建和鉴定

目的制备表达人c-jun氨基末端激酶（JNK）复制缺陷型重组腺病毒。方法将重组穿梭载体pAdTrack-CMV-WT-JNK线性化后，与pAdEasy-1共转化大肠杆菌BJ5138，进行同源重组得到重组腺病毒载体。将重组腺病毒载体转染入包装细胞HEK293内制备复制缺陷型重组腺病毒，并经PCR及DNA测序鉴定。结果JNK重组腺病毒载体能有效转染HEK293细胞并在细胞内成功包装，5d后可以观察到绿色荧光蛋白（GFP）明显表达，搜集的病毒经过PCR扩增得到特定JNK基因片段并测序鉴定，动物实验证实构建的Ad-WT-JNK能有效在肝组织表达。结论该研究成功构建了JNK重组腺病毒载体及相应重组腺病毒颗粒，为进一步研究JNK的作用及应用JNK进行相关疾病的基因治疗奠定了基础。

甲巯咪唑致胰岛素自身免疫综合征的诊断学特征分析

目的探讨胰岛素自身免疫综合征(IAS)的诊断学特征。方法回顾性分析2016年5月19日中山大学附属第三医院内分泌科收治的1例IAS患者的临床资料,并复习相关文献。结果患者女性,19岁,Graves病史1年,服用甲巯咪唑10余天出现严重低血糖。血糖2.73 mmol/L时胰岛素释放指数为4.13;空腹胰岛素/C肽波动于8.20～15.12;胰岛素抗体(IAA)强阳性;腹部增强核磁共振(MR)显示胰腺未见异常。结论自身免疫疾病患者特别是服用含巯基药物时,如果出现低血糖,要警惕IAS。

DN—JNK基因重组腺病毒的构建和鉴定

目的制备表达人c-jun氨基末端激酶（JNK）复制缺陷型重组腺病毒（Ad—DN—JNK），并通过动物实验进行功能鉴定。方法将重组穿梭载体pAdTrack—CMV—DN—JNK线性化后，与pAdEasy—1共转化大肠杆菌BJ5138，进行同源重组得到重组腺病毒载体。将重组腺病毒载体转染入包装细胞HEK293内制备复制缺陷型重组腺病毒，并经PCR及DNA测序鉴定。Western blot检测Ad—DN-JNK在SD大鼠肝组织中JNK1蛋白表达情况，及胰岛素受体底物1丝氨酸307（IRS-1^Ser307）磷酸化水平。结果JNK重组腺病毒载体能有效转染HEK293细胞并在细胞内成功包装，5d后观察到绿色荧光蛋白（GFP）明显表达，搜集的病毒经过PCR扩增得到了特定JNK基因片段并测序鉴定。所制备的Ad—DN—JNK滴度为2．5×10^10pfu／ml，动物实验证实构建的Ad—DN-JNK能有效在肝组织表达。结论该研究成功构建了DN—JNK重组腺病毒载体及相应重组腺病毒颗粒，动物实验证明Ad—DN—JNK能有效介导DN—JNK基因蛋白表达并下调IRS-1^Ser307磷酸化水平。为进一步研究JNK的作用及应用DN—JNK进行相关疾病的基因治疗奠定基础。

利拉鲁肽对高脂饮食诱导的糖尿病小鼠肾损伤的影响及机制初步探讨

目的探讨利拉鲁肽对高脂饮食诱导的糖尿病小鼠的肾脏保护作用及其可能机制。方法C57BL/6J雄性8周龄小鼠高脂诱导12周,采用随机数字表法分为高脂饮食组(8只)和高脂干预组(9只),同时设对照组,分为正常饮食组(4只)、正常干预组(4只)。正常干预组和高脂干预组腹腔注射利拉鲁肽(400 μg·kg-1·d^-1),正常饮食组和高脂饮食组腹腔注射等量生理盐水,连续注射8周。酶联免疫吸附(ELISA)法检测尿白蛋白、肌酐水平,HE染色观察肾脏组织形态学特征,Western印迹检测肾脏沉默信息调节因子2相关酶1(SIRT1)和硫氧还蛋白相互作用蛋白(TXNIP)的表达水平。结果高脂干预组与高脂饮食组相比,利拉鲁肽干预后糖尿病小鼠体重[(30.98±1.29)g比(39.43±2.58)g]、空腹血糖[(7.21±0.15)mmol/L比(9.55±0.29)mmol/L]及尿白蛋白肌酐比[(205.48±17.14)μg/mg比(319.86±34.14)μg/mg]均降低(均P<0.05)。HE染色显示,高脂干预组糖尿病小鼠比高脂饮食组小鼠的肾小球肥大情况改善。Western印迹结果显示,与高脂饮食组相比,高脂干预组小鼠肾脏TXNIP表达(0.41±0.10比3.50±0.70)下降,SIRT1表达(0.75±0.15比0.32±0.04)升高(均P<0.05)。结论利拉鲁肽可能通过上调SIRT1和下调TXNIP表达改善高脂饮食诱导的糖尿病小鼠肾脏损伤。