微波消融肝癌对小鼠细胞免疫的影响

目的:探讨不同温度微波消融肝癌对小鼠细胞免疫的影响。方法:建立C57BL/6J小鼠Hepa1-6肝癌皮下移植模型,分别采用45℃、50℃、55℃和60℃×180s的消融条件对肝癌进行微波消融。用流式细胞仪分析外周血CD4+、CD8+T细胞和NK细胞的比例,用LDH法测脾NK细胞和灭活的Hepa1-6细胞活化的脾细胞毒T淋巴细胞(CTL)的细胞毒活性。结果:50℃和55℃组消融后21d外周血CD4+、CD8+T细胞和NK细胞比例明显升高,60℃组消融后21d外周血NK比例明显升高,但消融后42d与对照组相比均无明显差异。50℃和55℃组消融后21d和42d脾CTL和NK细胞毒活性均明显增强,且均明显强于同期45℃组。50℃和55℃组消融后21d脾CTL细胞毒活性明显强于同期60℃组。结论:在一定消融温度条件下,肝癌微波消融能促进机体产生细胞免疫反应。

微波消融对小鼠肝癌细胞活性和HSP70表达的影响

【目的】探讨微波消融对小鼠肝癌细胞活性和HSP70表达的影响。【方法】建立C57BL/6J小鼠Hepa1-6肝癌皮下移植模型,采用微波能量以不同的温度消融肝癌,分别用酶组织化学和Westernblot检测被消融肝癌组织细胞琥珀酸脱氢酶(SDH)的活性和HSP70的表达,并观察消融后30d肝癌局部残留率。【结果】经40℃、45℃或50℃,120s的条件微波消融后,50℃组消融后24h小鼠肝癌组织细胞的琥珀酸脱氢酶活性明显低于假消融组;该组消融后30d肝癌局部残留率明显低于假消融组(均P<0.01)。3个消融组消融后12h和24h肝癌组织HSP70的表达均明显高于相应的假消融组(均P<0.01),且随消融温度升高表达明显增强。【结论】微波消融可促进小鼠肝癌HSP70的表达,同时在一定消融条件下能明显降低肝癌细胞的活性。

联合转染血管生成抑素和Fas基因对裸鼠移植瘤生长的影响

目的探讨联合转染血管生成抑素(AS)基因和Fas基因对移植于裸鼠的人结肠癌生长的影响。方法构建pcDNA3-AS和pcDNA3-Fas质粒,建立裸鼠皮下移植人结肠癌模型,通过瘤内注射分别将AS、Fas、AS和Fas基因转染皮下肿瘤,定期检测肿瘤大小,用免疫组化检测肿瘤的微血管密度(MVD)。结果成功构建了pcDNA3-AS和pcDNA3-Fas质粒。质粒转染后6d,Fas组和联合转染组的肿瘤体积明显小于对照组(P<0.05);质粒转染后9d,AS组的肿瘤体积明显小于对照组(P<0.05);质粒转染后12d,联合转染组的肿瘤体积明显小于Fas组和AS组(P<0.05)。质粒转染后15d,联合转染组和AS组肿瘤的MVD明显小于对照组(P<0.05)。结论联合转染AS和Fas基因对裸鼠移植人结肠肿瘤有协同抑制作用。

加速康复外科在胃肠手术中的应用经验浅析

加速康复外科(enhanced recovery after surgery,ERAS)是指围术期采取一系列有循证医学证据的措施,优化围术期的全过程,核心是降低患者生理和心理创伤应激,减少术后并发症,促进患者术后快速康复。目前虽然ERAS在各个外科专业中得到迅速发展与推广,但各级医院在临床实施ERAS过程中仍存在较多困难,其原因较复杂,各种实施方案也尚未规范化。针对上述情况,本文结合笔者所在中心在胃肠手术中实施ERAS的经验以及最新循证医学证据进行述评。

Fas基因对裸鼠腹腔移植结肠癌的抑制作用

目的:探讨Fas基因对裸鼠腹腔移植人结肠癌的抑制作用。方法:构建pcDNA3-Fas质粒,用脂质体法分别将Fas基因转染体外培养的人结肠癌细胞系LOVO,用Western blot法检测目的基因的表达,用MTT法检测转染Fas基因对体外培养的人结肠癌细胞生长的影响。建立裸鼠腹腔移植人结肠癌模型,将高、中、低三种不同剂量的pcDNA3-Fas质粒注射入荷瘤小鼠腹腔,观察对荷瘤小鼠生存的影响。结果:基因转染后36h,Fas组对人结肠癌LOVO细胞的抑制作用明显强于对照组(P<0.01)。与对照组相比,高、中、低3个剂量组小鼠的生存率明显提高(P<0.01);与低剂量组相比,高、中剂量组小鼠的生存率明显提高(P<0.01),而高、中剂量组小鼠的生存率无明显差异(P>0.05)。结论:Fas基因对腹腔内结肠转移癌有抑制作用,并存在剂量依赖性。

不同温度微波消融肝癌效果的酶组织化学检测

目的比较HE染色和酶组织化学染色对判断微波消融灭活肝癌细胞效果的价值。方法分别用60℃、3min和50℃、3min两种条件的微波消融,依次治疗A、B两组(每组6只)小鼠移植型肝癌,取微波消融前、后的肿瘤组织标本制成石蜡和冰冻切片,进行常规HE染色及烟酰胺腺嘌呤二核苷酸黄递酶(NADH-diaphorase)化学染色,并在显微镜下观察两种染色情况。结果从HE染色观察,两组小鼠肝癌组织在微波消融后的即刻,其细胞核形态和排列较消融前无明显改变;酶组织化学染色显示,A组肿瘤消融区内的NADH-diaphorase活性均消失,说明癌细胞灭活;B组肿瘤消融区内上述酶活性都呈散在阳性,提示部分癌细胞仍存活;两组肿瘤灭活效果明显不同(P<0.01)。结论HE染色不能评价微波消融对肝癌的即刻灭活效应,酶组织化学染色测定NADH-diaphorase活性能判定微波消融对肝癌的灭活效果。

探讨Fas/FasL的表达与大肠癌发展及转移的关系

【目的】探讨Fas/FasL在大肠癌组织细胞的表达以及它们与肿瘤的发展及转移的关系。【方法】应用免疫组化(SABC)法对41例(包括各个不同Dukes分期)的大肠癌组织以及正常大肠组织的Fas/FasL进行检测。【结果】大肠癌组织Fas阳性率为48.8%,低于正常大肠黏膜组织的Fas阳性率92.7%(P<0.01)。大肠癌组织FasL阳性率为53.7%,高于正常大肠黏膜组织的FasL阳性率4.9%(P<0.01)。在不同分期的大肠癌组织中,Fas阳性率分别为:A期87.5%,B期66.7%,C期25.0%,D期21.2%。而FasL阳性率分别为:A期25.0%,B期33.3%,C期66.7%,D期88.8%。随着Dukes分期的递升,Fas阳性率呈递减趋势,而FasL阳性率呈递升趋势。【结论】在大肠癌组织中,Fas表达下调,以及FasL表达上调,肿瘤细胞凋亡减少,这有利于肿瘤细胞的增殖。Fas/FasL在大肠癌的发生、发展和转移中起着重要的作用,为大肠癌的基因治疗提供了新思路。

微波凝固肝癌细胞活性的酶组织化学检测

目的比较HE染色和酶组织化学染色对判断微波消融灭活肝癌细胞活性的价值。方法用10W、1.5～2min(85～95℃)和5W、1.5～2min(55～65℃)两种条件的微波消融,分别治疗A、B两组(每组3只)小鼠移植型肝癌,并取微波消融前后的肿瘤组织标本制成切片,进行常规HE染色及琥珀酸脱氢酶的酶组织化学染色,在显微镜下观察两种染色的情况。结果从HE染色观察到,A、B两组小鼠肝癌组织在微波消融后的即刻,其细胞核形态和排列较消融前无明显改变。酶组织化学染色显示,A组肿瘤消融区内的琥珀酸脱氢酶的活性均消失,这说明了癌细胞的灭活;B组肿瘤消融区内上述的酶活性都呈散在阳性,提示部分癌细胞仍存活,A、B两组的肿瘤灭活效果明显不同(Ρ<0.01)。结论HE染色不能评价微波消融对肝癌的即刻灭活效应,用酶组织化学染色测琥珀酸脱氢酶的活性能判定MA对肝癌的灭活效果。

小鼠肝癌微波消融对宿主Th2/Th1免疫应答的影响

目的探讨小鼠肝癌微波消融(microwaveablation,MA)对宿主Th2/Th1免疫应答的影响。方法建立C57BL/6J小鼠Hepa1-6细胞移植肝癌模型,对肿瘤微波消融或手术切除,取正常、荷瘤、手术后及MA后四组小鼠,每组6只,用ELISA法检测各组周围血血浆Th1(IL-12I、FN-γ)和Th2(IL-4I、L-10)细胞因子水平(pg/ml)。结果荷瘤组比正常组,细胞因子IL-10增加,IL-4I、L-12和IFN-γ下降(均P>0.05)。MA组较荷瘤组,IL-12、IFN-γ显著上升(均P<0.01),IL-4明显降低(P<0.05),IL-10有所下降(P>0.05)。手术组比荷瘤组,IL-12I、FN-γ上升,IL-4I、L-10下降(均P>0.05)。MA组比手术组,IL-12明显上升(P<0.05),IFN-γ升高,IL-4和IL-10下降(均P>0.05)。结论MA原位灭活小鼠肝癌可促进宿主免疫应答的Th2/Th1偏移,并且MA较手术切除具有较强的免疫刺激效应。

腹腔镜在慢性阑尾炎诊治中的应用价值(附296例报告)

目的:比较腹腔镜手术与开腹手术在慢性阑尾炎治疗中的应用价值。方法:回顾分析2000年1月至2008年12月我院施行296例慢性阑尾炎手术的临床资料,164例行开腹手术,132例行腹腔镜手术,对比两组手术时间、术中出血、住院时间、术中发现和处理情况,并随访患者术后慢性腹痛的改善情况。结果:手术时间开腹组(52.76±21.82)m in,腹腔镜组(49.78±18.01)m in,t=0.88,P>0.05;术中出血开腹组(16.60±8.28)m l,腹腔镜组(9.68±4.22)m l,t=3.48,P<0.05;住院时间开腹组(7.84±3.27)d,腹腔镜组(6.80±2.98)d,t=2.98,P<0.05。腹腔镜组30例(22.7%)术中发现不同程度的腹腔粘连,阑尾与周围粘连10例,回盲部与前侧腹壁粘连8例,大网膜与腹壁及肠管粘连6例,升结肠与周围及腹腔内其他粘连6例,均在术中给予松解;开腹组18例(11.0%)术中发现阑尾与周围粘连,松解粘连行阑尾切除术,两组比较χ2=8.06,P<0.05;成功随访122例开腹手术者术后26例(21.3%)仍有慢性腹痛,98例腹腔镜手术者术后10例(10.2%)仍有慢性腹痛,两组比较χ2=6.68,P<0.05。结论:腹腔镜对慢性阑尾炎的诊治有一定的优势。

小鼠肝癌微波消融对宿主免疫细胞和细胞因子的影响

目的探讨小鼠肝癌微波消融(microwave ablation,MA)对宿主免疫细胞组成和细胞因子分泌的影响。方法建立C57BL/6J小鼠Hepa1-6细胞移植肝癌模型,对肿瘤进行微波消融或手术切除,分别用流式细胞仪和ELISA法检测治疗前后宿主周围血中的CD4+、CD8+、NK1.1+细胞组成(%)及血浆细胞因子IL-2、IL-10、IL-12、IFN-γ水平(ng/L)。结果荷瘤2～3周组鼠与正常组鼠比较,免疫细胞和细胞因子区别不显著。MA组较荷瘤组CD8+、CD4+T细胞及IL-2、IL-10无明显差别,NK1.1+细胞明显升高(P<0.05,n=6),IL-12、IFN-γ显著上升(均P<0.01,n=6)。手术组比荷瘤组免疫细胞和细胞因子也无明显变化。MA组比手术组CD8+、CD4+T细胞及IL-2、IFN-γ、IL-10无明显区别,NK1.1+细胞、IL-12明显上升(分别P<0.01、P<0.05,n=6)。结论MA原位灭活小鼠肝癌可促进Th2/Th1偏移及NK细胞组成的显著升高。

胸腹腔镜下治疗贲门失弛缓症的临床对比研究

目的比较胸腹腔镜下治疗贲门失弛缓症的手术方法和疗效。方法将39例贲门失弛缓症患者分为胸腔镜Heller术组、腹腔镜Heller术组和腹腔镜Heller-Dor术组,对手术时间、术中出血量、术后住院时间、并发症发生率和手术满意率等指标进行比较。结果在手术时间方面腹腔镜Heller-Dor术组长于胸腔镜Heller术组,腹腔镜Heller术组和胸腔镜Heller术组差异无统计学意义。在术中出血量和住院时间方面,腹腔镜Heller术组和腹腔镜Heller-Dor术组均少于胸腔镜Heller术组(P<0.05)。在并发症发生率和手术满意率方面,3组差异无统计学意义。结论胸腔镜和腹腔镜Heller手术均可作为贲门失弛缓症的首选方法。在保证手术效果和手术安全的前提下,选择何种术式可根据术者的经验、操作习惯及患者的情况而定。是否附加抗反流手术有待进一步研究,不必强求均加行抗反流手术。

气腹与非气腹腹腔镜胆囊切除的随机对照研究

目的探讨腹壁悬吊式非气腹装置在腹腔镜手术中的应用价值。方法采用随机对照方法比较非气腹(n=37)与CO2气腹(n=38)腹腔镜胆囊切除术的手术时间、术中出血量、术后即时动脉血气分析、术后住院时间、术后第1天血ACTH变化及术后并发症情况。结果2组均顺利完成手术,气腹组手术时间(34.2±7.7)min显著短于非气腹组(46.7±16.8)min(t=-4.160,P=0.000),气腹组术中出血量(10.4±2.0)ml显著少于非气腹组(14.8±7.2)ml(t=-3.627,P=0.000)。术后即时动脉血气分析、术后住院时间[气腹组为(3.7±0.7)d,非气腹组为(3.9±1.2)d,t=0.884,P=0.379)]和术后第1天ACTH(气腹组中位数为5.66pmol/L,非气腹组中位数为5.48pmol/L,Z=0.748,P=0.436)2组比较差异无统计学意义。术后2组均无严重并发症,非气腹组37例中有20例出现了右季肋部皮下气肿,气腹组无此并发症出现。结论腹壁悬吊式非气腹装置安全简单,患者术后恢复好,并可避免气腹手术的相关并发症,拓宽了腹腔镜手术的应用范围,具有在临床推广应用的价值。

气腹与非气腹腹腔镜腹部手术后肩痛的对照研究

目的对照气腹与非气腹腹腔镜腹部手术后肩痛的不同,以进一步明确肩痛发生的机制和预防策略。方法分3组对照非气腹腹腔镜、气腹腹腔镜胆囊切除术后及腹腔镜阑尾切除术后肩痛的发生率及疼痛程度。采用改良视觉模拟评分法(VAS)来评定术后6小时、24小时、48小时、72小时的肩部疼痛。结果 34例非气腹胆囊切除术后6小时有16例出现肩痛,平均值为4.5±1.4;24小时有20例出现肩痛,平均值为4.4±1.2;48小时后有11例有肩痛,平均值为2.3±0.7;72小时后有5例仍有肩痛,平均值为1.5±0.4。38例气腹腹腔镜胆囊切除术后6小时有20例出现肩痛,平均值为4.3±1.6;24小时后有22例出现肩痛,平均值为5.3±1.8;48小时后有10例有肩痛,平均值为2.6±1.1;72小时后有8例有肩痛,平均值为1.6±0.2。2组间比较从计数和计量上均无统计学意义。92例慢性阑尾炎行腹腔镜手术后6小时有16例出现肩痛,平均值为3.2±1.2;24小时有17例出现肩痛,其平均值为3.4±0.8;48小时后有9例有肩痛,平均值为1.3±0.6;72小时后有4例肩痛,平均值为1.4±0.3;阑尾组与上2组胆囊术后比较在计数和计量上的差异均有统计学意义。结论腹腔镜手术术后肩部疼痛不仅与CO_2对膈肌的刺激和牵拉有关,而且与胆囊床受到的刺激引起的炎性反应有关。而非气腹胆囊切除术后的肩痛还与提拉腹壁导致的膈肌牵拉有关。

腹腔镜联合胆道镜治疗胆囊及胆总管结石的临床体会

目的探讨腹腔镜联合纤维胆道镜治疗胆总管结石的可行性及临床应用价值。方法比较2000年～2007年我院对110例术前通过B超或内镜超声确诊的胆总管结石患者行腹腔镜联合纤维胆道镜胆总管切开取石术与同期100例开腹手术者的疗效。结果2组手术均获成功,腹腔镜组胆总管Ⅰ期缝合46例,置T管引流64例。开腹组均置T管引流。2组比较手术时间、术中出血量、住院日差异有统计学意义(P<0.05);术后并发症发生率、腹腔或切口感染率、残石率差异无统计学意义(P>0.05)。结论腹腔镜联合纤维胆道镜是治疗胆囊及胆总管结石安全、有效的方法,具有创伤小、痛苦轻、恢复快等微创优势,取净结石的情况下行胆总管Ⅰ期缝合,微创效果尤为明显。

腹腔镜胆囊切除意外胆囊癌的临床分析

目的总结腹腔镜胆囊切除术中(laparoscopic cholecystectomy,LC)意外胆囊癌(unsuspected gallbladder carcinoma,UGC)的治疗经验,探讨其应对策略。方法回顾性分析我院8000例LC术中及术后诊断为UGC的16例临床资料。结果所有16例胆囊癌病例中,在LC术中诊断7例,LC术后诊断有9例,其中NevinⅠ期2例、Ⅱ期6例、Ⅲ期7例、Ⅳ期1例。患者的5年存活率NevinⅠ期为100%,Ⅱ期的5年存活率为66.7%,Ⅲ期和Ⅳ期未有5年存活者。结论 UGC患者的存活与肿瘤分期相关,NevinⅠ期胆囊癌,行LC即可。LC术中怀疑有胆囊癌应及时行冰冻病理检查,对于确诊NevinⅠ期以外的UGC应该尽早开腹行胆囊癌根治术。

改良kugel修补技术在腹沟股疝中的应用

无张力疝修补术的改良kugel修补术是近两年国外引进技术，患者在手术中的创伤更小，其切口张力小，手术后恢复较快，患者能够更快地出院，其经济压力小。慢性腹股沟区疼痛发生率更低，复发率更低等优点，现将自2010年3月至2012年3月以来，实施改良kugel修补手术的患者资料进行回顾性分析，报告如下。

下腹部正中小切口后入路腹膜前腹股沟疝修补术疗效分析

目的探讨下腹部正中小切口后入路腹膜前腹股沟疝修补术的临床疗效。方法选取2009年1月至2014年10月我院收治的200例腹股沟疝患者,随机分为两组各100例。观察组采用后入路腹膜前腹股沟疝修补术进行治疗,对照组采用前入路腹膜前腹股沟疝修补术进行治疗。比较两组患者的手术时间、住院时间、术后并发症和复发情况。结果观察组手术时间和住院时间明显短于对照组;观察组术后并发症发生率显著低于对照组(8.0%vs.18.0%),差异均具有统计学意义(P<0.05)。两组复发率相比差异不显著(P>0.05)。结论下腹部正中小切口后入路腹膜前腹股沟疝修补术具有手术创伤小、恢复快、并发症少、复发少、费用低、简便易行、易于推广等优点。

辩题四:减重术后复胖患者的优选减重方式

【导语】自20世纪50年代以来,减重代谢外科历经半个多世纪的发展,其治疗代谢相关疾病的安全性和有效性已获得广泛认可。但患者术后复胖,进而导致代谢相关疾病复发和生活质量下降是常见和不容忽视的问题。由于目前不同减重中心对术后复胖的定义各不相同,不同医学中心减重术后患者复胖的发生率无法进行横向比较。减重术后复胖的病因包括不规范手术、遗传、心理和个人行为等多个方面。术后复胖的治疗主要包括四种方案,即饮食控制、加强运动、药物治疗和修正手术治疗。但学术界对于复胖选择强化体重管理加胰高糖素样肽-1受体激动剂(glucagon like peptide-1 receptor agonist,GLP-1RA)还是修正手术,尚存在争议。

内镜超声检查对胆总管无扩张伴可疑胆总管结石的诊断价值

目的 探讨胆总管无扩张伴可疑胆总管结石患者（CBDS）行超声内镜检查（EUS）的价值.方法 对33例经多次腹部B超检查诊断胆囊结石,胆总管直径〈8 mm,未发现CBDS但有急性胰腺炎、阻塞性黄疸或反复胆绞痛等病史之一的患者行EUS,并与手术或ERCP结果进行比较.结果 33例患者行EUS,20例发现CBDS.经进一步手术或ERCP,该20例患者中有16例证实有CBDS.EUS对本组病例CBDS诊断的灵敏度为100%,特异度为76.5%,阳性预测价值为80%,阴性预测价值为100%.结论 对胆总管无扩张但有可疑CBDS者行EUS检查有较高的临床价值.