微波消解-ICP-MS法测定金银花和白芷中5种有害重金属元素

选取了不同产地及不同等级的10批次金银花和白芷进行测定,并建立了微波消解-ICP-MS法测定中药材中5种有害元素含量的分析方法,各元素的线性关系良好,灵敏度(cps/ng/mL)959～18116,相关系数0.999992～1.000000,定量限0.03～0.3ng/mL,线性范围0～100ng/mL。因其低检出限及高灵敏度,该方法能满足中药材样品质量控制中5种有害元素的测定要求。为中药材中该5种有害元素的准确测定提供参考。

UPLC测定黄连中盐酸小檗碱和盐酸巴马汀的含量

建立UPLC测定黄连中盐酸小檗碱和盐酸巴马汀含量的方法。采用ACQUITY UPLC BEH-C18色谱柱(2.1mm×50 mm×1.7μm),以乙腈-0.05mol/L磷酸二氢钾溶液为流动相,梯度洗脱,流速为0.2 mL/min,检测波长为350 nm。结果表明盐酸小檗碱和盐酸巴马汀分别在0.037 2～0.297 6μg/mL,0.008 2～0.065 6μg/mL的浓度范围内均有良好的线性关系(r=0.9999),回收率均大于95%,RSD均小于2%。该方法快速、准确、重现性好,可用于测定黄连中盐酸小檗碱和盐酸巴马汀的含量。

胃内漂浮缓释制剂在复方左金和元胡止痛片中的应用研究

目的:制备复方左金和元胡止痛的胃内缓控释片剂,评价其体外释药性能。方法:以羟丙基甲基纤维素(HPMC)为亲水性凝胶骨架,碳酸氢钠为起泡剂制备漂浮片,以释放度、漂浮性能以及外观作为考察指标,用正交设计法优化制剂配方。结果:最佳处方片剂能在人工胃液中立即起漂,体外漂浮时间达10h以上,其体外释放规律1～10h符合peppas方程。结论:所选定处方的复方胃内缓控释片剂具有起漂时间快、缓释效果明显的特点。

SPE-GC/MS法测定有机氯、拟除虫菊酯和有机磷

针对现今中药材普遍存在农药混合残留及中药材出口受限的问题,采用SPE与GC/MS联用法,选取常用药材白芷,测定其中3大类主要农药的残留量。测定结果表明,各组分的线性关系良好,相关系数为0.99～1.00,检出限为0.007～0.5μg/mL,线性范围为0.05～5μg/mL。该方法能满足中药材样品质量控制中3大类主要农药残留量的测定要求,可为以根入药的中药材中有机氯、有机磷和拟除虫菊酯这3种农药残留量的准确测定提供参考。

UPLC同时测定决明子中橙黄决明素、大黄素、大黄酚和大黄素甲醚的含量

建立UPLC同时测定决明子中橙黄决明素、大黄素、大黄酚和大黄素甲醚含量的方法,采用ACQUITY UPLCBEH-C18色谱柱(2.1 mm×50 mm×1.7μm),乙腈和0.1%磷酸水溶液为流动相,采用梯度洗脱,流速为0.6 mL/min,检测波长为284nm。结果表明橙黄决明素、大黄素、大黄酚和大黄素甲醚分别在3.002～30.02μg/mL、2.500～25.00μg/mL、10.430～104.30μg/mL和5.916～59.16μg/mL的浓度范围内均有良好的线性关系(r=0.999 9),回收率均大于95%,RSD均小于2%。该方法快速,准确,重现性好,可用于测定决明子中橙黄决明素、大黄素、大黄酚和大黄素甲醚的含量。

三七不同药用部位的质量研究

目的研究并测定三七主根和根茎中三七皂苷R1和人参皂苷Rg1、Rb1的含量及指纹图谱。方法采用RP-HPLC法,色谱柱为Phenomenex C18(150 mm×4.60 mm,5μm);流动相为乙腈-水(梯度洗脱);流速1.0 ml.min-1;检测波长203nm。结果含量测定中三七皂苷R1和人参皂苷Rg1、Rb1的线性范围分别为0.184~1.840、0.994~9.940、0.896~8.960μg(r=0.9999),平均回收率分别为99.7%(RSD=1.21%)、101.3%(RSD=1.32%)、100.7%(RSD=0.93%)(n=9)。三七主根和根茎的HPLC指纹图谱分离效果好。结论所建含量测定和指纹图谱的方法简便、准确,重复性好。测定结果显示,无论是三七各成分的含量,还是色谱峰的数目,根茎均明显高于三七主根。

RP-HPLC同时测定复方三七制剂中的人参皂苷Rg_1、Rb_1

目的建立复方三七制剂中人参皂苷Rg1、Rb1含量测定的方法。方法采用RP-HPLC法，色谱柱为Phenomenex C18（250mm×4．6mm，5μm）；流速1．0ml·min^-1；检测波长203nm；柱温30℃；流动相为乙腈-水（梯度洗脱）。结果人参皂苷Rg1的线性范围为0．2124-2．1240μg（r=0．9999），平均回收率为100．24％，RSD=1．14％（n=9）；人参皂苷Rb1的线性范围为0．2108～2．1080μg（r=0．9999），平均回收率为99．71％，RSD=0．79％（n=9）。结论所建方法简便、准确，重复性好，可同时测定复方三七制剂中人参皂苷Rg1和人参皂苷Rb1的含量。

高效液相色谱法测定川滇产亚贡叶中咖啡酸的含量

目的：建立亚贡叶中咖啡酸的含量测定方法,并测定川滇不同产地、不同采收期的亚贡叶的咖啡酸含量,为亚贡叶的药用价值的开发及适宜采收期提供参考。方法：以咖啡酸为含量测定指标,采用HPLC法测定不同产地、同一产地不同采收期的亚贡叶中咖啡酸的含量。色谱柱为Dikma Diamonsil C18（250 mm×4.6 mm,5μm）;采用梯度洗脱,流动相：乙腈-0.5%磷酸水=10∶90（0 min）→70∶30（30min）,流速：1 mL/min;柱温：25℃;检测波长：323 nm。结果：咖啡酸的含量在0.04~2.69μg范围内,进样量与峰面积积分呈良好的线性关系,r=0.9990;平均回收率为98.06%,RSD=0.55%。结论：此方法能准确、快速地进行定量检测,可作为亚贡叶咖啡酸的质量控制方法。

白桦脂酸及其衍生物的制备方法和药理作用研究进展

目的:了解白桦脂酸(BA)及其衍生物的制备方法和药理作用的最新研究进展,为其进一步研究和开发提供理论基础。方法:以"白桦脂酸""衍生物""提取""合成""药理作用""Betulinic acid""Derivatives""Extraction""Synthesis""Pharmacological activities"等为关键词,在中国知网、维普、万方、PubMed、Web of Science等数据库中组合查询发表于2000年-2018年6月的相关文献,对BA及其衍生物的制备方法和药理作用方面的研究成果进行综述。结果与结论:共检索到文献2 414篇,其中有效文献62篇。BA及其衍生物的制备方法主要包括植物提取法、化学合成法和生物转化法。其中以化学合成法为主,其产率和产品纯度均较高;植物提取法主要适用于前期研究;生物转化法则具有绿色、选择性高的优点但产率较低,仍需进一步优化。BA及其衍生物具有显著的抗肿瘤和抗病毒作用,对肺癌、卵巢癌、子宫颈癌、乳腺癌、黑色素瘤等多种肿瘤细胞以及对人类免疫缺陷病毒等多种病毒均有明显的抑制/杀伤作用;其还具有抗炎、抗糖尿病、抗高血脂等药理作用。通过对BA化学结构中的C-3、C-28、C-20位进行结构修饰或以白桦脂醇和BA为原料直接进行生物转化可获得不同类型、药理活性更强的衍生物。在后续研究中,应进一步明确BA及其衍生物的构效关系,并侧重于开发具有良好药动学特性的高活性BA衍生物。

黄芪桂枝五物汤提取工艺的优化

目的优化黄芪桂枝五物汤提取工艺。方法基于质量源于设计(QbD)理念,采用鱼骨图考察潜在工艺参数,并通过失效模式与效应(FMEA)对其进行定量风险分析。以提取时间、提取次数、溶剂用量为影响因素,黄芪甲苷、毛蕊异黄酮葡萄糖苷、芍药苷、肉桂酸、总多糖提取率及干膏率为评价指标,Box-Behnken响应面法优化提取工艺。结果最优设计空间为提取时间60~78 min,提取次数3次,溶剂用量10.5~11.5倍。结论该方法稳定可靠,可用于提取黄芪桂枝五物汤。

马甲子总三萜中2种成分油水分配系数的测定

目的测定马甲子总三萜中马甲子素、白桦脂酸的油水分配系数。方法饱和法测定2种成分在蒸馏水、40%乙醇、75%乙醇、95%乙醇、无水乙醇、乙腈、乙酸乙酯、正辛醇、0.5%吐温-80、0.5%十二烷基硫酸钠中的溶解度,摇瓶法测定两者在正辛醇-水、磷酸盐溶液、人工胃液、人工肠液中的油水分配系数(pH值2.5、3、4、5、6、7、8)。结果马甲子素、白桦脂酸在有机溶剂中的溶解度明显高于在蒸馏水中,吐温-80、十二烷基硫酸钠也可提高两者溶解度。2种成分在不同pH值下的油水分配系数(lgP值)分别为812.83～1 412.54(2.91～3.15)、90.45～135.34(1.96～2.13)。结论马甲子总三萜中马甲子素、白桦脂酸为亲脂性成分,可用于胃肠道药物吸收。

星点设计-效应面法优化马甲子总三萜磷脂复合物的制备工艺

目的:采用星点设计-效应面法优化马甲子总三萜磷脂复合物(PRTT-PC)的制备工艺,并对其理化性质进行研究。方法:采用溶剂挥发法制备PRTT-PC,单因素考察反应溶剂、药脂比、反应温度、反应时间、药物浓度对复合率的影响,星点设计-效应面法优化制备工艺,通过傅里叶红外光谱分析、X射线衍射扫描分析、扫描电镜分析、溶解度、表观油水分配系数对磷脂复合物进行理化性质研究。结果:最佳制备工艺为:无水乙醇为反应溶剂,药脂比为1∶1.8,药物浓度为5.0 mg/mL,反应温度为25℃,反应时间为60 min。复合率实际值(97.43%±1.42%),与预测值97.58%的偏差<3%。IR验证了PRTT-PC的形成,其在水和正辛醇中的溶解度有了较大的提高。结论:采用星点设计-效应面法成功制备了PRTT-PC,改善了水溶性和脂溶性,为后续制剂研究提供帮助。

LC-MS测定白桦脂酸在大鼠体内的血药浓度

建立LC-MS检测大鼠血清中白桦脂酸浓度的方法。取内标物齐墩果酸,加100μL血清,乙酸乙酯萃取,取上清液以氮气吹干,乙腈复溶,进样1μL,在电喷雾离子源下进行负离子检测(SIM)分析。色谱柱为BEHC18柱(2.1mm×50mm,1.7μm),流动相为乙腈-0.1%甲酸水溶液(62:38)。白桦脂酸和内标物的质荷比(m/z)均为455.4。白桦脂酸在3.328~832ng·mL^-1内线性良好,检出限为3.328ng·mL^-1,提取回收率均大于80%.日内、日间精密度RSD值均小于10%,日内、日间准确度为92%~96%,本法成功检测了白桦脂酸在大鼠体内的血药浓度。且本方法稳定、灵敏度较好,适用于白桦脂酸在大鼠体内血药浓度测定。

马甲子总三萜的HPLC指纹图谱建立、聚类分析和主成分分析及含量测定

目的:建立马甲子总三萜的指纹图谱,进行聚类分析和主成分分析,并测定其中主要成分马甲子素的含量。方法:采用高效液相色谱法(HPLC)。色谱柱为Agilent PheHex,流动相为甲醇-0.05%磷酸水溶液(梯度洗脱),检测波长为320 nm,流速为1mL/min,柱温为30℃,进样量为5μL。以马甲子素为参照,绘制10批马甲子总三萜的HPLC指纹图谱,采用《中药色谱指纹图谱相似度评价系统(2012版)》进行相似度评价,确定共有峰;采用SPSS 26.0软件进行聚类分析和主成分分析。采用同一HPLC法测定马甲子素的含量。结果:10批马甲子总三萜共有6个共有峰,相似度均大于0.990;指认马甲子素1个特征峰。聚类分析结果显示,10批马甲子总三萜样品可聚为4类,其中S1为一类、S2为一类、S3~S6为一类、S7~S10为一类。主成分分析结果显示,前2个主成分的累积方差贡献率为99.430%。综合评分由高到低依次为S1>S9>S8>S7>S10>S2>S3>S5>S6>S4。马甲子素检测质量浓度的线性范围为33.7~844.0μg/mL(r=0.9999);精密度、重复性、稳定性(24 h)试验的RSD均小于2%,平均加样回收率为99.75%(RSD=1.13%,n=6);10批马甲子总三萜样品中马甲子素的平均含量为0.576%~0.712%。结论:所建HPLC指纹图谱和含量测定方法稳定、可靠,可用于马甲子的质量控制。

马甲子叶提取物抗肿瘤活性部位的筛选

目的:从药用植物马甲子叶醇提物中分离筛选具有抗肿瘤作用的活性组分。方法:采用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇萃取马甲子叶醇提物,并将这三个萃取部位进行体外抗肿瘤实验,再把筛选得到的具有较好抗肿瘤活性的部位进行硅胶柱层析分离,并采用MTT法对分离得到的组分进行体外抗肿瘤活性比较。结果:通过体外抗Hep G-2细胞和He La细胞实验表明,乙酸乙酯萃取部位具有较好抗肿瘤活性。通过硅胶柱分离,获得5个组分,通过MTT实验发现这5个组分中,石油醚:乙酸乙酯为1∶1和1∶2洗脱所得到的两个组分具有明显的体外抗肿瘤活性,其中石油醚:乙酸乙酯为1∶2的洗脱具有更好的杀伤作用,对Hep G-2细胞和He La细胞的IC_(50)分别为45.79,13.16μg/m L。结论:从马甲子叶醇提物乙酸乙酯部位中分离得到2种具有抗肿瘤作用的活性组分,为进一步分离抗肿瘤活性成分提供一定的指导作用。

HPLC测定马甲子药材中马甲子1~#的含量

建立HPLC测定马甲子1#含量的方法,采用BDS HYPERSIL C18色谱柱(4.6 mm×100 mm×2.4μm),以乙腈-0.1%甲酸溶液为流动相,梯度洗脱,流速为1.0 m L/min,检测波长为320 nm。结果表明马甲子1#在0.021 4~0.854 4μg(r=0.999 9)范围进样量与峰面积线性关系良好,平均加样回收率为99.4%(RSD=1.18%)。该方法快速,准确,重现性好,可用于测定马甲子中马甲子1#的含量。

单纯形网格法优选马甲子总三萜自微乳处方

目的采用单纯形网格法优化马甲子总三萜自微乳处方,并对其进行质量评价。方法通过溶解度考察、配伍实验及伪三元相图优化处方;以油相、乳化剂及助乳化剂比例为考察因素,以平均粒径、多分散系数以及载药量为评价指标,采用单纯形网格法优化马甲子总三萜自微乳的处方,并对自微乳的理化性质、体外溶出度进行评价。结果马甲子总三萜自微乳处方中油相为油酸乙酯(10%)、乳化剂为聚山梨酯-80(Tween-80,45%)、助乳化剂为二乙二醇单乙基醚(Transcutol P,45%)。所得自微乳外观棕黄均一透明,自微乳平均粒径(46.3±0.34)nm,多分散系数(0.198±0.012),Zeta电位(-8.1±0.13)mV,载药量(13.1±0.28)mg·g^(-1)。溶出度实验表明,马甲子总三萜自微乳20 min累积溶出率达80%。结论马甲子总三萜自微乳制备工艺简单,可显著改善马甲子素总三萜的水溶性和溶出度,有望提高其口服生物利用度。

LC-MS定量研究白桦脂酸的体外细胞摄取与转运

建立一种快速专一测定白桦脂酸(BA)含量的LC-MS方法,采用选择离子检测方式,测定Caco-2细胞中BA的含量,用于研究BA在Caco-2细胞中的摄取与转运情况。采用色谱柱Agilent SB-C18(2.1 mm×50 mm,1.8μm),流动相0.1%甲酸-甲醇(22∶78),流量0.3 mL/min。采用电喷雾离子源(ESI),负离子模式下定量分析BA和齐墩果酸(内标)碎片离子质荷比(m/z)455.4。BA在8.4~840 ng/mL范围内线性关系良好(r>0.996),定量限为8.4 ng/mL;日内、日间精密度RSD均小于10%,基质效应为107.9%~114.5%,提取回收率为97.2%~103.0%;样品室温、长期和冻融稳定性良好,RSD小于10%。该法快速、灵敏、简单、专属性强,可用于定量分析BA在Caco-2细胞的摄取与转运。

UPLC法测定马甲子药材中马甲子素和messagenic acid B

建立UPLC同时测定马甲子药材中马甲子素和messagenic acid B 2种抗肿瘤活性成分的方法。采用Waters ACQUITY UPLC BEH-C18(2.1 mm×50 mm,1.7μm)色谱柱,乙腈-0.1%甲酸溶液流动相梯度洗脱;流量:0.45 m L/min;柱温30℃;检测波长320 nm。结果表明:马甲子素和messagenic acid B分别在0.198 6~3.972μg,0.151 4~3.028μg范围进样量与峰面积呈现良好的线性关系,平均加标回收率分别为99.20%(RSD=1.34%)和99.69%(RSD=0.56%)。该方法能在3.5 min内使马甲子素和messagenic acid B最大程度地分离,相比较HPLC而言,更加快捷、高效。

氯雷他定胶囊联合糠酸莫米松乳膏治疗特应性皮炎疗效观察

目的:观察氯雷他定胶囊联合糠酸莫米松乳膏治疗特应性皮炎(AD)的疗效。方法:选取2017年1月-2019年6月笔者医院收治的82例AD患者,按随机数字表法将所有患者按1:1分为对照组与研究组,每组41例,对照组使用曲安奈德乳膏治疗,研究组使用氯雷他定胶囊+糠酸莫米松乳膏治疗。对比两组患者治疗4周后的临床疗效,比较治疗前、治疗4周后病情严重程度(SCORAD评分)、炎症因子[白细胞介素-4、13、17(IL-4、IL-13、IL-17),干扰素-γ(IFN-γ)]、生活质量(DLQI评分)差异,并记录治疗4周期间药物不良反应发生情况及治疗结束后随访6个月复发情况。结果:治疗4周后,研究组总有效率为90.24%,显著高于对照组的70.73%(P<0.05);治疗4周后,研究组患者SCORAD评分,IL-4、IL-13、IL-17水平、DLQI评分较治疗前显著降低而IFN-γ水平显著上升(P<0.05),且研究组患者上述指标与同期对照组对比有显著性差异(P<0.05)。治疗期间,研究组患者不良反应发生率显著低于对照组(P<0.05);治疗结束后随访6个月,研究组复发率显著低于对照组(P<0.05)。结论:对于特应性皮炎患者,应用氯雷他定胶囊联合糠酸莫米松乳膏治疗效果显著,可明显改善临床症状,降低炎症反应,提升患者生活质量,且安全性较高,复发率较低,具有较好的应用价值。