热休克蛋白与老年肌少症关系的研究进展

肌少症(sarcopenia)是以骨骼肌量减少、肌肉力量下降和/或躯体功能减退为主要表现的进行性、广泛性的全身性疾病,与老年人跌倒、失能、骨折等不良事件密切相关。肌少症发病机制复杂,目前暂无特异性治疗药物。热休克蛋白(heat stress protein, HSP)是一类高度保守的应激蛋白,有研究发现HSP在维持肌肉健康方面具有重要意义。因此,本文拟就老年肌少症的特点及发病机制、HSP及其与老年肌少症关系和潜在机制进行综述,以期为国内外同行防治老年肌少症提供思路。

经典型及劳力型热射病大鼠心肌损伤对比研究

目的 比较劳力型热射病(exertional heat stroke, EHS)与经典型热射病(classical heat stroke, CHS)大鼠动物模型心肌损伤的差异,为热射病心肌损伤的临床治疗提供可能的实验室依据。方法 80只SD大鼠按随机数表法随机分为对照组(n=10)、运动对照组(EXC,n=10)、经典热射病组(CHS,n=30)和劳力型热射病组(EHS,n=30)。对照组和EXC组大鼠置于温度(25±0.5)℃,相对湿度(50±5)%环境中;EHS组和CHS组大鼠置于模拟热气候动物舱内,舱内环境温度(39±0.5)℃,相对湿度(50±5)%;EHS组和EXC组大鼠给予跑台运动处理,跑步速度设置为12 m/min,坡度为0°,每运动8 min休息2 min,以监测大鼠直肠温度等。核心体温达到42.3℃或出现瘫倒(掐尾反射消失)作为热射病的开始,之后将大鼠移至常温环境复温。采用超声心动图仪检测大鼠心功能指标,生化法检测血清心肌酶(AST、LDH、CK-MB、CK)水平,苏木精-伊红(HE)染色法检测大鼠心肌组织病理,TUNEL染色检测大鼠心肌细胞凋亡情况。采用蛋白免疫印迹法检测大鼠心肌组织中醌氧化还原酶1(Nrf2)、切割半胱天冬氨酸蛋白酶(Cl-Caspase-3)、抗凋亡蛋白(Bcl-2)、促凋亡蛋白(Bax)、血红素加氧酶-1(HO-1)的蛋白表达水平。结果 与CHS组大鼠比较,EHS组大鼠热射病潜伏期显著缩短(P<0.01),且诱发热射病所需的热负荷显著减少(P<0.01)。CHS组大鼠的脱水率显著大于EHS组(P<0.01),但EHS组大鼠的脱水速率显著高于CHS组(P<0.01)。两组大鼠热射病发生时的直肠温度无显著差异(P>0.05)。超声心动图提示,EHS组大鼠的左室射血分数(left ventricular ejection fraction, LVEF)显著低于CHS组大鼠(P<0.05)。EHS组大鼠的AST和LDH水平显著高于CHS组大鼠(P<0.01)。两组大鼠均出现急性心肌损伤的病理改变,表现为心肌细胞水肿、肌纤维排列混乱、断裂,可见炎性浸润,且EHS组心肌损伤病理评分高于CHS组(P<0.05),EHS组心肌细胞凋亡比率亦显著高于CHS组(P<0.05)。氧化应激相关信号通路中,EHS组大鼠心肌组织的蛋白质表达水平显著高于CHS组。结论 高温同时复合运动有更高的热射病易感性,EHS介导的心功能异常及心肌细胞凋亡较CHS更重,且可能与氧化应激相关信号通路活化相关。

乙肝病毒感染者外周血中CD4^+Foxp3^+T细胞亚群的表达及临床意义

目的研究外周血中3个CD4^+Foxp3^+T细胞亚群在乙肝病毒感染者外周血中频率及其可能的临床意义。方法分离来自无症状携带者(AsC)、慢性乙型肝炎患者(CHB)以及健康对照(Health)的外周血单个核细胞(PBMC),用流式细胞术分析PBMC中3个CD4^+Foxp3^+T细胞亚群占CD4^+T细胞的比例,并分析其与临床参数间的相关性,同时将CD4^+CD25^+Foxp3^+Treg作对比分析。结果CD4^+CD45RA^+Foxp3^(lo)(静息态Treg)频率在各实验组间无显著差别;CD4^+CD45RA^-Foxp3^(lo)(非Treg)频率在CHB组和AsC组间无明显差别,但两组相对Health组明显升高;CHB组CD4^+CD45RA^-Foxp3^(hi)(活动态Treg)明显高于AsC组和Health组。在CHB和AsC病例中活动态Treg与HBV病毒载量,HBeAg状态均无显著相关性。在CHB病例中活动态Treg与ALT水平不相关。结论相当比例的不具抑制功能的Foxp3^+T细胞可能混杂在CD4^+CD25^+Foxp3^+Treg的分析中,因此活动态Treg比CD4^+CD25^+Foxp3^+Treg更准确能反应Treg在乙肝病毒感染者中的状态。在CHB患者中活动态Treg生成增多并可能在肝内炎症损伤中发挥自我保护作用。

热习服训练复合缺氧训练增强耐热能力的研究

目的采用经典热习服训练方法复合缺氧训练以探索提升机体耐热能力的有效方法。方法在温度33℃以上、湿度大于70%的湿热条件下,以2018年某部队60名经严格筛查的男性健康志愿者为对象,进行为期12 d的热习服训练和测试。60名志愿者分为3组,分别为对照组、热习服组和缺氧训练复合热习服组,每组20名。采集热习服前后耳温、心率、出汗量、心肺功能、综合感受评分、生理紧张指数(physiological strain index,PSI)、最大摄氧量(maximal oxygen uptake, VO2max)、心率为170次/min时的体力工作能力(physical work capacity at heart rate of 170 beats per minute, PWC170)进行耐热能力的评估。结果与对照组相比,热习服组以及缺氧复合热习服组基础耳温、耐热测试后的耳温均显著下降(P<0.05),基础心率以及耐热测试后的心率均显著下降(P<0.05);PSI与呼吸频率也显著降低(P<0.05);出汗量、VO2max、PWC170、最大心输出量、氧耗量/最大心率、最大二氧化碳排出量、最大肺通气量均显著增加(P<0.05)。缺氧复合热习服组在耐热测试后的心率与耳温均低于热习服组(P<0.05),并且PSI与呼吸频率也出现显著降低(P<0.05)。与热习服组相比,缺氧复合热习服组的出汗量、VO2max、PWC170、最大心输出量、氧耗量/最大心率、最大二氧化碳排出量、最大肺通气量均显著增加(P<0.05)。结论在经典热习服训练基础上增加耐缺氧训练,能更有效地促进热习服的形成。

IFN-γ和TNF-α联合对MIN6细胞caspase-3活化的影响

目的研究细胞因子IFN-γ和TNF-α对小鼠胰岛瘤细胞株MIN6中caspase-3活化的影响。方法用IFN-γ、TNF-α单独或联合刺激MIN6细胞后,Western blot分析比较caspase-3活化的情况,并用免疫细胞化学法检测了其活化产物cleaved caspase-3的产生;酶学比色法测定细胞因子IFN-γ和TNF-α联合作用活化caspase-3的时间依赖性以及MTT法比较caspase-3特异性的抑制剂AC-DEVD预处理前后MIN6细胞活性的变化。结果 IFN-γ或TNF-α单独作用不能活化caspase-3,但两者联合作用24 h后可检测到caspase-3活化裂解片段的产生;Caspase-3的活性随着IFN-γ和TNF-α处理时间的增加而升高,呈现明显的时间依赖性;抑制caspase-3的活化可有效改善MIN6细胞的活性,并且呈剂量依赖性。结论 IFN-γ和TNF-α对MIN6细胞活性的抑制作用与caspase-3的活化密切相关。

基础医学研究生实验教学体会

实验教学作为科学训练的重要组成部分,对基础医学研究生的培养具有非常重要的意义。应采取培养研究生学习实验技术的自觉性、搭建实验平台、妥善管理课题经费,以及理论学习和实验相结合的带教等方法,以促进研究生实验教学方法的改进,提高研究生教育质量,培养基础医学研究生的科研创新能力。

肿瘤环境影响抗感染CD8^+T细胞应答启动的初步研究

目的探讨肿瘤环境下,机体对非肿瘤来源的外来微生物抗原特异性CD8+T细胞应答的变化及其可能机制,为肿瘤患者免疫调节治疗提供理论依据。方法在建立小鼠荷瘤模型的基础上,尾静脉感染李斯特菌(OVA-Listeria Monocytogenes,OVA-LM),观察其生存曲线的变化;在荷瘤后感染小鼠模型中,通过流式胞内细胞因子染色和Pentamer染色技术检测小鼠抗OVA257-264表位特异性CD8+T细胞免疫应答的变化;通过标记CFSE的OT-Ⅰ细胞过继转移小鼠,观察体内抗原特异性CD8+T细胞增殖和抗原呈递情况;FACS分析荷瘤情况下小鼠脾脏CD11b+Gr-1+细胞及Treg细胞比例和数量变化。结果荷瘤小鼠感染OVA-LM菌后生存期明显缩短;荷瘤小鼠脾脏抗OVA257-264表位特异性CD8+T细胞免疫应答显著下调;抗原特异性CD8+T细胞增殖速率没有显著变化,但是细胞总数明显下降;荷瘤小鼠脾脏调节性T细胞比例未见明显变化,但CD11b+Gr-1+细胞显著上调。结论荷瘤小鼠抗感染CD8+T细胞免疫反应下降,其脾脏CD11b+Gr-1+细胞显著上调,提示肿瘤环境下脾脏CD11b+Gr-1+细胞升高可能是影响抗感染CD8+T细胞应答的重要因素。

加强课外朗读指导 提升学生语文素养

朗读水平的提高，需要经常性训练，训练不能只靠课内练习，还要辅以多种课外朗读活动。通过朗读实践活动，能让学生认识朗读的意义，并得到实际锻炼，提高朗读能力。

高温高湿环境暴露对重度放创复合伤小鼠损伤恢复的影响

目的研究重度放创复合伤(R-W-CI)小鼠暴露于高温高湿环境(HHE)不同时间对小鼠存活率、造血损伤恢复、创面愈合及其病理学的影响。方法HHE模拟实验舱参数设定为温度(36±0.5)℃,相对湿度(70±5)%,通过肛温测评小鼠HHE暴露的效果。采用60 Coγ射线6.0 Gy全身照射,建立小鼠重度骨髓型急性放射病模型;照射后1.0 h内用刀片制成体表面积2.0%皮肤创伤模型。两种模型小鼠均于致伤前1.0 h放入模拟舱,转运与照射均由便携式高温高湿模拟舱维持HHE,致伤完毕后置于高温高湿模拟舱1.0 h和7.0 h后取出按常规条件饲养。急性放射损伤小鼠分为4组,即正常对照组(NC组)、放射损伤组(R组)、放射损伤HHE暴露1.0 h组(R+HHE 1.0 h组)、放射损伤HHE暴露7.0 h组(R+HHE 7.0 h组)。观察不同HHE暴露时间(1.0 h和7.0 h)对损伤后小鼠肛温、存活率、体重及外周血变化的影响。重度放创复合伤小鼠于伤后给予常规补液、创面包扎或左氧氟沙星(LEV)抗菌治疗,分为7组,即正常对照组(NC组)、放创复合伤组(R-W-CI组)、放创复合伤左氧氟沙星治疗组(R-W-CI+LEV组)、放创复合伤HHE暴露1.0 h组(R-W-CI+HHE 1.0 h组)、放创复合伤HHE暴露7.0 h组(R-W-CI+HHE 7.0 h组)、放创复合伤HHE暴露1.0 h左氧氟沙星治疗组(R-W-CI+HHE 1.0 h+LEV组)、放创复合伤HHE暴露7.0 h左氧氟沙星治疗组(R-W-CI+HHE 7.0 h+LEV组)。观察不同HHE暴露时间小鼠存活率、体重、外周血、创面愈合以及病理学指标变化。结果模拟实验舱设定HHE条件对小鼠的体温能够产生显著影响,达到HHE效果。HHE不同暴露时间对重度骨髓型急性放射病小鼠的体重恢复有不同影响,但对存活率无影响。在无左氧氟沙星抗菌治疗时,R-W-CI+HHE 1.0 h组小鼠存活率(40%)显著优于R-W-CI组(20%)(χ^(2)=5.496,P=0.019),但与R-W-CI+HHE 7.0组(30%)无显著差异。左氧氟沙星抗菌治疗能显著提高R-W-CI+LEV组与R-W-CI+HHE 1.0+LEV组小鼠存活率,但对R-W-CI+HHE 7.0+LEV组无明显影响。致伤后28 d,R-W-CI+HHE1.0 h+LEV组白细胞恢复显著优于R-W-CI+LEV组(F=6.549,P=0.021)和R-W-CI+HHE 7.0 h+LEV组(F=11.901,P=0.05)。R-W-CI+HHE 7.0 h+LEV组小鼠创面愈合显著延迟,而R-W-CI+HHE 1.0 h+LEV组小鼠创面愈合显著加快。结论HHE短时间(1.0 h)暴露有利于重度放创复合伤恢复,HHE长时间(7.0 h)暴露与之相反;抗生素治疗是有助于改善放创复合伤预后的基础支持疗法。

CD8^+调节性T细胞的研究进展

调节性T细胞(Treg)在外周免疫稳态控制中起着关键作用。在CD4+和CD8+T细胞中已有几种Treg被鉴定,它们在感染、移植、肿瘤和自身免疫中发挥着重要的负向调节机体免疫应答作用。本文对CD8+Treg的研究进展作一综述。

军事热带医学任职教育实践教学改革与探索

随着我国广泛参与国际事务,履行国际义务,我军执行特种军事任务和非战争军事行动渐呈常态化,对相应的卫勤保障工作提出了更全面更系统的要求。新军事变革形势下,防疫军医的任职能力亟待实时提升,院校任职教育是有效快速实现这一需求的途径。军事热带医学任职教育也是实现院校任职教育创新发展的重要方向。本文阐述军事热带医学任职教育实践教学改革及经验,为同类任职教育提供借鉴。

广州市2014年登革热暴发疫情中小儿登革热病例临床特征

目的描述小儿登革热病例的临床特征,为小儿登革热患者的早期诊断及时治疗提供参考依据。方法回顾性分析广州某三甲医院在2014年8月30日至10月31日期间,明确诊断、小于14岁的全部住院登革热病例的临床资料。结果共31例小儿普通型登革热病例纳入分析,其中男女比例为15：16,平均年龄（7.65±4.28）岁（1～13岁）,平均住院时间为（5.48±2.38）d（2～15）d。临床症状发生率前5位分别为：发热（100%,31/31）、皮疹（67.74%,24/31）、咳嗽（38.71%,12/31）、淋巴结肿大（32.26%,10/31）和关节/肌肉痛（35.48%,11/31）。77.42%（24/31）的病例登革Ig M呈现阳性;48.39%（15/31）的病例伴有肺炎支原体Ig M抗体阳性;分别有96.77%（30/31）和35.48%（11/31）的病例出现白细胞和血小板计数降低;分别有67.74%、12.90%和51.61%的病例分别出现AST、ALT以及肌酸激酶异常;约1/3的病例出现血钙和血钾异常。结论小儿登革热病例临床表现及实验室检测指标特征与成人病例存在一定差异,临床医生应重视小儿登革热病例的鉴别诊断。