猪场常用疫苗的合理使用

免疫接种是有效防制猪场疫病的重要手段,合理有效地使用疫苗,可以将疫病的危害降低至最小,因此,如何选择和使用疫苗是养殖户极为关注的问题。本文简要介绍了如何选择和使用好猪场常用的疫苗,较少免疫失败的发生,保障养猪业的健康发展。

猪群呼吸道综合征病毒性疾病感染情况的调查分析

为了调查引起辽宁省猪群呼吸道综合征的病毒性疾病的感染情况，选取420份组织和605份血清样品，采用荧光RT-PCR／PCR方法，分别对PRRSV、PCV2和PRV进行检测，结果显示，PRRSV、PCV：和PRV在组织中单一感染率分别为0．95％、22．6％、4．8％，在血清中单一感染率分别为1．5％、11．7％、1．8％。而三种疾病的混合感染已经超过单一感染，其中以二重感染最为常见，PRRSV＋PCV2为主要临床表现形式，PRRSV＋PCV2混合感染率在组织和血清中分别为16．7％、17．9％。

猪群呼吸道综合征病毒性疾病感染情况的调查分析

为了调查引起辽宁省猪群呼吸道综合征的病毒性疾病的感染情况,选取420份组织和605份血清样品,采用荧光RT-PCR/PCR方法,分别对PRRSV、PCV2和PRV进行检测,结果显示,PRRSV、PCV2和PRV在组织中单一感染率分别为0.95%、22.6%、4.8%,在血清中单一感染率分别为1.5%、11.7%、1.8%。而三种疾病的混合感染已经超过单一感染,其中以二重感染最为常见,PRRSV+PCV2为主要临床表现形式,PRRSV+PCV2混合感染率在组织和血清中分别为16.7%、17.9%。

枯草芽孢杆菌中质粒的遗传稳定性

检测天然质粒pGJ在宿主菌(枯草芽孢杆菌)中的遗传稳定性,将枯草芽孢杆菌AS.1700连续传代至120代,每隔五代做1次质粒稳定性测定。结果表明,载体pGJ在氯霉素选择压力下遗传稳定性较好,稳定率约为95%左右,而无选择压力下,质粒的遗传稳定率从第47代开始缓慢下降,至120代时,质粒的遗传稳定性约为45%左右。

重组杆状病毒表达H9亚型禽流感HA基因的研究

为研究通过体外表达的方式获得具有生物学活性的禽流感HA蛋白的方法,根据GenBank公布的禽流感H9亚型的基因序列设计引物,扩增出HA基因全长片段,将扩增片段克隆到pFastBacHTa载体上,构建重组杆粒rBacmid-HA,在脂质体介导下转染Sf9细胞制备重组杆状病毒,表达HA蛋白,并通过血凝抑制试验、Westernt-blot、间接免疫荧光试验研究其生物学活性。结果显示,在Sf9细胞中成功表达了HA蛋白,分子量约为65kD,且表达蛋白具有良好的生物学活性。

1株Ⅶ型新城疫病毒融合蛋白基因的克隆与生物信息学分析

为了研究Ⅶ型新城疫病毒(Newcastle disease virus,NDV)CY1株的进化情况,分析其遗传变异和基因功能,试验应用RT-PCR扩增NDV辽宁分离株CY1株的融合蛋白(fusion,F)基因,进行测序分析,构建系统进化树,并用生物信息软件对蛋白结构功能进行分析。结果显示,NDVF基因全长1662bp,编码553个氨基酸。生物信息学分析结果表明,F蛋白的分子质量为58991.0u,理论等电点为8.48,半衰期为30h(哺乳动物类网状细胞),不稳定系数31.62,脂肪指数为108.12,总平均疏水性0.174,最大疏水性为3.078,最小疏水性为-2.578,信号肽序列为第1-31位氨基酸残基,跨膜区结构分析结果表明该蛋白为跨膜蛋白,预测可能含有6个N-糖基化作用位点、9个酪蛋白激酶Ⅱ磷酸化位点、7个蛋白激酶C磷酸化位点、14个N-豆蔻酰化位点、1个酰胺化位点、1个亮氨酸拉链、1个微体C端靶信号位点、1个双向核定位信号。系统进化分析结果表明,NDV CY1株与zj1株进化距离最近。

兽医工作在“同一健康”实践中的作用与地位

"同一健康"理念和方法着眼于人类、动物和环境健康的联系,强调跨学科、跨领域、跨部门、跨区域的共同协作,考虑的是通过改善环境来降低人和动物传染病或慢性病的发病和传播扩散风险。该理念已经被联合国粮农组织(FAO)、世界动物卫生组织(OIE)和世界卫生组织(WHO)等国际组织以及部分国家机构和跨学科专业团体看作疫病预防控制策略的主要构成元素。本文以国际化视野,从兽医的角度阐释"同一健康"理念,分析兽医工作在"同一健康"实践中的作用与地位。

辽宁省某市奶牛布病感染状况及群间传播风险因素调查

为了解辽宁省某市的奶牛布鲁氏菌病(简称奶牛布病)流行现状及该市奶牛布病群间传播风险因素,开展本研究。对该市辖区内所有奶牛进行布鲁氏菌病的普查,获知该市奶牛布病的表观个体血清流行率和表观群血清流行率;采用问卷调查方式进一步开展病例-对照研究,初步筛选出14项该市奶牛布病群间传播可能风险因素,经相关性检验结合生物学知识,选取了5个变量进入多因素分析,最终通过非条件logistic回归方法初步建立了该市奶牛布病群间传播风险因素回归模型,并建立ROC曲线计算了模型的预测概率。研究结果显示,该市奶牛个体流行率为0.99%,群流行率12.44%。非条件logistic回归分析结果显示,该市奶牛布病群间传播的风险因素包括:"无专用购销车辆"(OR=3.57,95%CI:1.04-12.5,p=0.04),"进圈时不穿专用工作服和胶靴"(OR=5.0,95%CI:0.97-25.00,p=0.06),"与犬混养"(OR=12.39,95%CI:0.97-157.56,p=0.05)。该结果表明与犬混养可能是该市奶牛布病群间传播重要的风险因素,而奶牛销售时自有购销专用车辆和场内生物安全措施的采取如进圈穿专用工作服可使奶牛布病在场群间传播的风险降低。针对回归模型建立的ROC曲线下面积为71.6%,表明此模型解释该市奶牛布病群间传播风险的能力为中等。

辽宁省一起输入性小反刍兽疫紧急流行病学调查

2014年3月9-17日,辽宁省北镇市和黑山县的两个养羊户发生小反刍兽疫,为了解疫情来源并评估疫点向外传播疫病的风险,开展本次调查。调查发现本次发病局限于2户羊群中,在总共67只羊中检出24只PPR疑似病例,其中11只死亡。经临床和实验室诊断,该起疫情被确定为输入性小反刍兽疫;来源追踪分析显示发病羊来自S省某活羊交易市场;扩散风险评估结果表明,该起疫情向周围羊场扩散的风险较低。

一株基因Ⅱ型新城疫病毒的检测及HN、F基因序列分析

为了掌握辽宁省新城疫病毒(NDV)的分布特点,试验采用新城疫荧光RT-PCR方法检测到1株新城疫病毒,通过接种鸡胚分离鉴定后将其命名为CK/YK1/2013,通过PCR扩增得到HN、F基因全长片段并测定了基因序列。结果表明:该毒株可以使接种鸡胚在38 h内死亡,具备强毒株的生物学特性。CK/YK1/2013的F基因在裂解位点的氨基酸序列为111GGRQGRL117,与弱毒株LaSota序列相同,与其他已知强毒株的裂解位点不同。CK/YK1/2013的HN、F基因与Ⅱ型LaSota毒株的同源性为99.6%,与F48E9及Ⅶ型的同源性分别为89.1%和83.0%,基因进化树分析表明该毒株属于Ⅱ型NDV。

辽宁省小反刍兽疫疫苗临床免疫效果跟踪试验及抗体水平动态观察

通过抽检小反刍兽疫疫苗免疫后的部分羊群,分别于免疫后的7、14、21、28 d对免疫羊进行抗体及病毒核酸(包括疫苗毒)跟踪监测,并对监测数据进行整理比对分析,继而掌握小反刍兽疫免疫抗体在机体内的消长规律及影响因素,进一步了解该疫苗辽宁省羊群中的免疫效果及安全性。结果表明,该疫苗在免疫7 d后,免疫群体均能够达到免疫合格率高于70%的标准,且未出现疫苗排毒现象,证明该疫苗的免疫效果确实、安全性好。

猪圆环病毒2型灭活疫苗免疫效果试验

本试验将10窝同期出生的共105头仔猪,随机分为试验组和对照组,试验组于14日龄、45日龄分别进行猪圆环病毒2型灭活疫苗免疫,对照组不免疫。通过临床跟踪观测和定期采血进行猪圆环病毒2型ELISA抗体和PCR病毒核酸检测。结果表明,临床免疫猪群成活率及生长指标明显好于不免疫猪群;试验组及对照组病毒核酸阳性检出率和抗体阳性率差异不显著,且可同时检出圆环病毒核酸及抗体。

合理调整免疫程序 科学实施动物免疫

现阶段我国动物疫病的防控主要采取免疫的策略,现行的免疫方案中存在着一些问题,各地区和养殖企业应结合本地区和/或本场的实际情况,制定出具有更强的指导性、可操作性和自己特色的免疫方案,更好地指导动物的免疫工作。

猪瘟活疫苗与口蹄疫灭活疫苗同期与分期免疫效果对比试验

本试验采用单因子试验设计方法,将2窝同期出生的18头仔猪,随机分为试验组和对照组。试验组8头仔猪分别于35、65日龄进行2轮次猪瘟活疫苗和口蹄疫灭活疫苗同期免疫;对照组10头仔猪分别于25、35、55、65日龄进行相同疫苗的分期免疫。通过所有供试猪免疫后进行临床跟踪观察,并于免疫前的23日龄、免疫后的55、95日龄分别检测免疫抗体水平(应用国家规定的ELISA检测方法)。试验结果表明,两种免疫方法免疫后7 d内均未观察明显的应激反应,试验组与对照组两种疫苗的免疫抗体合格率差异均不显著。

种公牛口蹄疫免疫抗体跟踪监测报告

为探索目前使用的口蹄疫O型-亚I双价灭活苗对种公牛的免疫效果,本试验对某场的种公牛连续17个月的口蹄疫O-亚I双价苗免疫抗体进行跟踪监测,每2个月采集1次血清,用液相阻断ELISA法检测O型和亚洲I型口蹄疫免疫抗体水平,科学评估同一厂家生产的同一毒株疫苗对不同品种牛的保护期以及免疫抗体水平与牛的品种、年龄关联性,进行"差别化"免疫,确保每头种公牛都能获得有效的免疫保护。结果表明,抗体水平与牛的年龄无明显关联性;O型口蹄疫的免疫效果优于亚洲I型;不同品种牛由于遗传上的差异,对疫苗免疫的反应不同,其中,疫苗免疫对HS种公牛的保护效果最差;总体来说,O型和亚洲I型疫苗免疫后,对种公牛的有效保护期可维持在10个月以上。

辽宁省H1N1亚型猪流感病毒的分离鉴定与遗传演化分析

本研究2012年底从辽宁省某屠宰场猪鼻咽拭子样品中分离到1株流感病毒,经HA-HI试验和RT-PCR鉴定为H1N1亚型猪流感病毒株,命名为A/swine/Liaoning/01/2012(H1N1),通过对病毒的8个基因片段克隆并测序,并利用分子生物学软件进行遗传演化分析。结果表明,分离株HA基因裂解位点附近的氨基酸序列为IPSIOSR↓G,符合低致病力流感病毒的分子特征。全基因组进化树结果表明,分离株的8个基因片段与A/swine/Jiangsu/40/2011(H1N1)株核苷酸同源性最高,分离株处在类禽型H1N1亚型遗传进化分支上;由于类禽型H1N1猪流感病毒具有潜在感染人的潜力,在国外和国内均有感染人的报道,因此,辽宁省首次分离到该型猪流感病毒对全省养猪业和公共卫生安全具有重要意义,值得深入研究。

浅谈牛结核病的几种实验室诊断方法

牛结核病被OIE列为必须通报疫病,在我国属二类动物传染病,列为检疫扑杀对象。对牛结核病进行早期的可靠诊断是本病的重要防控措施。本文将对几种在临床上广泛应用的牛结核病实验室诊断方法逐一作简要介绍,并结合辽宁省牛结核病防控现状,对未来全省可用的牛结核病诊断方法作一展望。

禽流感与鸡新城疫免疫距离测定技术的初步研究

鸡禽流感与新城疫免疫评价指标对科学指导家禽疫苗免疫工作意义重大,不仅关系到家禽免疫程序制定与免疫时机把握,更直接关系到家禽的健康生产与经济效益。本文根据近几年鸡禽流感与新城疫免疫抗体监测数据,结合当前禽病的流行情况、病原变异情况、免疫情况、饲养环境变化情况等,通过测定家禽免疫HI距离,研究建立了界差率(Q)指标,同现行的抗体合格率等免疫评价指标相比,通过本指标可以对家禽免疫水平和健康状态作出科学分析和评估,对适时掌握禽流感、新城疫免疫状态和免疫时机做好二者的免疫预防工作意义重大。

辽宁省新城疫病毒F基因和HN基因的分子特征与致病性

采用RT-PCR对新城疫病毒辽宁分离株的F基因和HN基因进行扩增并测序,初步研究其分子特性分析和致病性。结果表明,分离株CY1株、DD2株、YK1株和TL4株的致死鸡胚平均时间(MDT)分别为50.6 h、76.3 h、62.9 h和81.3 h,CY1株具有强毒特征。F基因分型显示,CY1株属于Ⅶ型,其F蛋白多肽裂解位点的序列为112RRQKRF117,符合NDV强毒氨基酸基序特征,与流行株js02株的亲缘关系非常近,与疫苗株LaSota、Queensland V4亲缘关系均较远。DD2株、YK1株和TL4株均属于基因Ⅱ型,其F蛋白多肽裂解位点的序列为112GRQGRL117,符合NDV非强毒氨基酸基序特征,与LaSota株亲缘关系最近。本研究将为本省新城疫防制对策的制定提供参考。

流感病毒血凝抑制试验非特异性因子去除方法

血凝抑制试验(HI)是判断流感病毒感染情况及检测流感抗体水平最常用的血清学方法。多种动物血清中存在非特异性凝集因子和非特异性凝集抑制因子,这两类因子如果不去除,会造成HI结果偏差,出现假阴性(抗体效价偏低)或假阳性(抗体效价偏高)。在HI试验前,需要对某些动物血清进行处理。文章对两类非特异性因子的处理方法及其应用进行了总结。