自噬在兔部分损伤前交叉韧带和内侧副韧带中的差异

目的:确定兔前交叉韧带和内侧副韧带部分损伤后自噬的存在,并比较损伤后不同时间两者之间自噬的表达差异,探讨其愈合能力差异与自噬的关系。方法:3月龄健康雄性新西兰大白兔18只,随机选取3只作为对照组,其余兔建立前交叉韧带和内侧副韧带部分损伤模型,随机分为5组,各组分别在造模后3 d、1周、2周、4周、6周取材。H-E染色观察损伤部位形态学变化,透射电镜观察损伤部位超微结构变化,免疫印迹检测自噬相关蛋白Beclin 1、LC3Ⅱ/Ⅰ、p62表达水平,RT-PCR检测自噬相关基因Beclin 1、ATG-5 mRNA表达水平。结果:在部分损伤后3 d、1周、2周、4周、6周5个时间点,前交叉韧带和内侧副韧带均未表现出明显的愈合趋势,观察到自噬小体的存在。与对照组相比,自噬相关蛋白Beclin 1、LC3Ⅱ/Ⅰ、p62在前交叉韧带中的高表达更为显著,在内侧副韧带中的表达更早恢复至正常水平,并继续降低;自噬相关基因ATG-5、Beclin 1在前交叉韧带中始终处于高表达状态,峰值出现在1周,内侧副韧带高表达峰值出现在2周,此后逐渐恢复至正常水平。结论:兔前交叉韧带、内侧副韧带部分损伤后自噬相关因子的表达随时间推移,总体呈现先升高后降低的变化趋势,损伤后不同时间点前交叉韧带、内侧副韧带中自噬的表达存在明显差异,推测前交叉韧带损伤后自噬的过度激活可能导致其内源性修复障碍。

兔部分损伤前交叉与内侧副韧带差异环状RNA的筛选与功能分析

目的:交叉对比兔前交叉韧带(ACL)与内侧副韧带(MCL)部分损伤前后环状RNA表达差异,并进行功能分析,探讨ACL内源性修复障碍可能的分子机制。方法:对兔ACL及MCL组织环状RNA建库测序,筛选符合标准的差异环状RNA,并用qRT-PCR验证,对筛选的差异环状RNA进行京都基因和基因组百科全书(KEGG)和基因本体论(GO)分析,并构建其ceRNA网络。结果:各组中共筛选出308个差异环状RNA,GO和KEGG分析表明,ACL与MCL损伤后的差异环状RNA在血管生成、炎症反应、细胞增殖与凋亡及mRNA转录与蛋白翻译方面均存在较大差异。ACL与MCL损伤后的ceRNA网络差异显著。结论:环状RNA在ACL与MCL损伤后的差异表达谱中存在明显差异,为进一步研究ACL损伤内源性修复障碍的机制提供了新思路。