稀有血型筛选用小鼠单克隆抗体的制备及鉴定

目的制备血型单克隆抗体,用于筛选稀有血型。方法用人红细胞作为免疫原免疫6周龄Balb/c小鼠(雌),通过小鼠B淋巴细胞杂交瘤技术制备单克隆抗体,用免疫原红细胞筛选阳性克隆,用已知表型的稀有血型红细胞筛选鉴定抗体特异性。用1 L培养袋扩大培养,以硫酸铵法粗提培养上清。以商品试剂盒检测抗体的免疫球蛋白亚类。检测抗体反应性,摸索在全自动血型仪上进行抗原筛选的使用条件。结果建立了3株单克隆抗体细胞株。抗-GPA/GPB(IgG1,κ)盐水法反应,抗体效价为102 400;抗-EnaTS(IgM,κ)盐水法反应,抗体效价为204 800;抗-K14(IgG1,κ)菠萝酶法反应,抗体效价为20 480。结论利用得到的单抗可在自动血型仪上实施快速高通量抗原筛选,可用于筛选MkMk型、En(a-)、Ko及K:-14型等稀有血型。