cpxR基因对大肠杆菌E41株生物学特性及生物被膜形成的影响研究

为研究双组份系统cpxR基因缺失对大肠杆菌临床分离野生株E41生物学特性的影响、培养条件与其生物被膜(BF)形成能力的关系及黄芩苷对BF的清除作用,本研究以野生株E41、缺失株E41ΔcpxR、回补株E41ΔcpxR/pcpxR为对象进行试验。比较3株菌的生长特性,结果显示三者生长曲线无显著性差异。比较3株菌的运动性,结果显示E41ΔcpxR的游泳运动和群集运动能力弱于野生株及回补株。采用平板计数检测3株菌的抗鸡血清杀菌能力,结果显示E41ΔcpxR株抗鸡血清杀菌能力弱于野生株及回补株。采用微量肉汤稀释法检测菌株的药物敏感性,结果显示与野生株和回补株相比,卡那霉素、阿米卡星和环丙沙星对缺失株的MIC降低1/2,但氟苯尼考对其MIC升高了2倍。采用结晶紫染色法检测不同成膜载体和培养温度对BF形成的影响,结果显示3株菌均在硅胶载体上的BF形成能力最强,但25℃条件下适于E41和E41ΔcpxR/pcpxR株BF的形成,37℃条件下则更适于E41ΔcpxR株BF的形成。采用平板计数法检测黄芩苷对BF的清除作用,结果显示,不加黄芩苷的空白对照组,E41和E41ΔcpxR/pcpxR株在试验起始时就有菌株开始从BF中游离,而E41ΔcpxR在24 h才有菌株从BF中游离;加入1 MIC和1/2 MIC黄芩苷分别与3株菌共培养条件下,3株菌均在试验起始时即从BF中开始游离。但加入1/4 MIC黄芩苷时,E41和E41ΔcpxR/pcpxR株在试验起始时有菌株从BF中游离,E41ΔcpxR株在12 h开始从BF中游离。本研究结果表明,当cpxR基因缺失后,其运动性和抗血清杀菌能力降低,对氨基糖苷类、喹诺酮类和酰胺醇类药物的敏感性改变,硅胶载体更有利于菌株附着形成BF,黄芩苷对其BF有清除作用。本研究为探究大肠杆菌cpxR基因功能奠定了基础,同时也为BF抑制剂的研发提供了参考依据。

郑州地区宠物犬体内常见细菌的分离鉴定及药敏试验

为了解宠物犬体内常见细菌种类及其对临床常用抗生素的耐药情况,选取郑州市数家宠物医院对患病犬和健康犬分别进行样本采集。通过分离培养纯化,16S rRNA序列分析鉴定,获得大肠杆菌12株、葡萄球菌8株、肠球菌17株、肺炎克雷伯菌5株及沙门氏菌2株。采用微量肉汤稀释法测定7大类14种抗生素的最小抑菌浓度(MIC值),进行药物敏感性和多重耐药表型分析。结果表明,所有细菌总体对替加环素和黏菌素的敏感性较高,对其它抗菌药物的敏感性因细菌种类不同而产生差异。犬源细菌多重耐药现象较为普遍,本试验菌株的多重耐药率为59%(26/44),其中大肠杆菌、葡萄球菌和肺炎克雷伯菌的多重耐药率分别为19.2%、30.8%和7.7%。本试验初步探明了郑州地区宠物犬源常见细菌的药物敏感性及多重耐药情况,对宠物犬临床应用抗菌药具有指导意义。