溪黄草对circ_0091579/miR-515-5p、肺癌细胞A549增殖及凋亡的影响

目的探讨溪黄草对circ_0091579/miR-515-5p及肺癌细胞A549增殖和凋亡的影响。方法将肺癌A549细胞分为对照组、溪黄草(20、40、80 mg/L)组、si-circ_0091579组、si-NC组、pcDNA-circ_0091579组、pcDNA组、溪黄草+pcDNA-circ_0091579组。CCK-8、平板克隆实验、流式细胞术检测A549细胞抑制率、克隆形成数以及凋亡率。qRT-PCR检测circ_0091579和miR-515-5p表达。双荧光素酶报告实验验证circ_0091579和miR-515-5p相互作用。结果溪黄草显著降低A549细胞的增殖和克隆形成能力,促进细胞凋亡,诱导cleaved-Caspase-3表达上调及circ_0091579下调,且呈质量浓度依赖性。下调circ_0091579可降低A549细胞的增殖和克隆形成能力,促进细胞凋亡,诱导cleaved-Caspase-3表达上调。上调circ_0091579可逆转溪黄草对A549细胞的增殖抑制和凋亡促进功能。circ_0091579和miR-515-5p直接特异性结合。结论溪黄草可抑制肺癌细胞A549增殖,诱导其凋亡,其机制与下调circ_0091579/miR-515-5p途径有关。

氯喹靶向溶酶体增加非小细胞肺癌A549细胞对紫杉醇的敏感性

目的:探讨靶向溶酶体药物氯喹对非小细胞肺癌A549细胞对紫杉醇的化疗敏感性的影响。方法:以紫杉醇及氯喹作用于A549细胞,Lyso-Tracker Red DND-99进行细胞内溶酶体染色,采用荧光显微镜观察细胞内溶酶体变化,应用MTT比色法比较药物对A549细胞的生长抑制作用。结果:在紫杉醇作用的A549细胞浆内可观察到大量的点灶状红色荧光囊泡,而在氯喹及联合紫杉醇作用后红色荧光囊泡数量显著减少并伴囊泡体积增大及囊泡内弥散荧光染色,氯喹使得紫杉醇对A549细胞的IC_(50)从6.815μmol/L下降至2.611μmol/L,氯喹显著提高紫杉醇对A549细胞的生长抑制作用。结论:氯喹靶向溶酶体提高A549细胞对紫杉醇的化疗敏感性。

重组人血管内皮抑制素靶向治疗联合化疗治疗恶性肿瘤的临床效果

目的 观察重组人血管内皮抑制素靶向治疗联合化疗治疗恶性肿瘤的临床效果。方法 选取54例恶性肿瘤患者,均使用重组人血管内皮抑制素靶向治疗联合化疗治疗,观察患者临床治疗效果、生活质量和不良反应发生状况。结果 54例恶性肿瘤患者通过临床治疗后临床治疗总有效率为70.4%,治疗后生活质量评分显著高于治疗前,差异有统计学意义（P〈0.05）;9例患者出现Ⅲ-Ⅳ级不良反应,其中,2例白细胞下降,3例恶心呕吐,4例血小板下降;3例出现短暂心电图改变,其中,1例为室上速、室性早搏,2例为心悸、气短。1例咯血,通过对症处理后症状缓解,没有出现药物相关性死亡现象。结论 重组人血管内皮抑制素靶向治疗联合化疗措施可显著改善恶性肿瘤患者临床症状,提高其生活质量。

非甾体类抗炎药联合他汀类药的肿瘤化学预防作用

肿瘤的化学预防是通过直接调节基因癌变的某些过程，如预防自由基对DNA损伤、抑制上皮细胞过度增殖或调节上皮细胞分化和凋亡来达到阻止癌变发生的目的。目前有许多化学预防药物正在开发和试验的不同阶段，主要有视黄醇、类胡萝卜素、激素类药物、经典以及非经典抗氧化剂，目前研究比较多的是非甾体抗炎药（NSAIDs）。

肿瘤疫苗在肿瘤治疗中的应用进展

随着肿瘤发病率及死亡率的不断上升,肿瘤的治疗引起了广泛的关注。肿瘤治疗方法除手术、放疗、化疗三大治疗手段外,生物治疗目前已成为肿瘤治疗的第四大手段,采用疫苗治疗的方法成为肿瘤生物治疗的新途径之一。目前,在肿瘤治疗中应用的疫苗主要包括以下几种类型:肿瘤细胞疫苗,肿瘤抗原疫苗(肿瘤多肽疫苗),单克隆抗体疫苗,核酸疫苗,DC疫苗等,尤其是肿瘤多肽疫苗,在肿瘤治疗中具有广泛的应用前景。

人LIGHT和HSV-TK-EGFP基因共转染的MSCs体外抗肿瘤免疫研究

目的研究与单纯疱疹病毒的糖蛋白D竞争结合单纯疱疹病毒进入介导物(herpes virus entry mediator,HVEM)的淋巴毒素类似物(homologous to lymphotoxins,exhibits inducible expression,and competes with HSV glycoprotein D for HVEM,a receptor expressed by T lymphocytes,LIGHT)基因和单纯疱疹病毒胸苷激酶(herpes simplex virus thymidine kinase,HSV-TK)基因共转染的骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)在体外的抗肿瘤免疫功能。方法将p IRES2-LIGHT基因和HSV-TK-EGFP基因共转染小鼠骨髓间充质干细胞(MSCs/LT组),以转染空载体(MSCs/mock组)和转染HSV-TK-EGFP基因(MSCs/T组)的骨髓间充质干细胞作对照。流式细胞仪检测LIGHT分子和HSV-TK-EGFP分子在稳定转染的骨髓间充质干细胞上的表达。MTT法和ELISA法检测3组骨髓间充质干细胞在体外对T淋巴细胞的增殖以及其分泌细胞因子白介素-2(interleukin-2,IL-2)、干扰素-γ(interferon-gamma,IFN-γ)和IL-10的影响,并进一步观察3组细胞在体外向乳腺癌细胞株TUBO的迁移情况。结果流式细胞仪检测发现,MSCs/LT能稳定高表达LIGHT分子和HSV-TK-EGFP分子,在加入20μmol/L更昔洛韦诱导3天后99.6%细胞发生凋亡。体外细胞共培养实验表明,与MSCs/mock和MSCs/T组比较,MSCs/LT组骨髓间充质干细胞能显著地促进抗人CD3单抗刺激的T细胞增殖(P<0.05);同时能明显促进T细胞分泌IL-2、IFN-γ和IL-10(均P<0.05)。体外迁移实验结果表明,MSCs/LT、MSCs/mock和MSCs/T组细胞均有向乳腺癌细胞株迁移的特性,3组间差异无统计学意义(P>0.05)。结论共转染人LIGHT和HSV-TK-EGFP基因的骨髓间充质干细胞稳定高表达LIGHT和HSV-TK-EGFP分子,通过促进T淋巴细胞增殖和IL-2、IFN-γ和IL-10等细胞因子的分泌而发挥抗肿瘤免疫功能。

circ_0061140靶向miR-6838-5p促进非小细胞肺癌细胞的增殖、阻滞细胞周期、诱导细胞凋亡

目的通过实验研究确认环状RNA(circRNA)circ_0061140是否能靶向miR-6838-5p调控非小细胞肺癌细胞的增殖、细胞周期和凋亡。方法采用逆转录-定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测circ_0061140和miR-6838-5p在非小细胞肺癌细胞中的表达情况。将非小细胞肺癌NCI-H1299细胞分为si-circ_0061140组(转染si-circ_0061140;低表达circ_0061140)、si-NC组(转染si-NC;阴性对照)、NC组(未转染;空白对照)、miR-6838-5p组(转染miR-6838-5p模拟物;高表达miR-6838-5p)、miR-NC组(转染miR-NC;高表达miR-6838-5p的阴性对照)、si-circ_0061140+anti-miR-NC组(共转染si-circ_0061140与anti-miR-NC)、si-circ_0061140+anti-miR-6838-5p组(共转染si-circ_0061140与anti-miR-6838-5p)。采用Western印迹检测细胞周期蛋白D1(cyclinD1)、活化的含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶-3(cleavedcaspase-3)蛋白表达,MTT法检测细胞增殖能力,流式细胞仪检测细胞周期和凋亡情况。双荧光素酶活性检测circ_0061140和miR-6838-5p的靶向结合。结果非小细胞肺癌组织、细胞NCI-H1299、NCI-H2170、NCI-H1975中的circ_0061140表达量均比癌旁组织或正常肺上皮细胞BEAS-2B高,miR-6838-5p表达量比癌旁组织或BEAS-2B细胞低(P_(均)<0.05)。si-circ_0061140组或miR-6838-5p组NCI-H1299细胞的CyclinD1蛋白表达量、增殖能力、S期细胞比例比NC组减少,Cleaved-caspase-3蛋白表达量、G_(0)/G_(1)期细胞比例、凋亡率比si-NC组或miR-NC组增加(P均<0.05)。circ_0061140靶向调控miR-6838-5p的表达。共转染si-circ_0061140、anti-miR-6838-5p可减弱转染si-circ_0061140对细胞生物学行为的作用。结论低表达circ_0061140通过靶向非小细胞肺癌细胞的miR-6838-5p,抑制细胞增殖、阻滞G_(0)/G_(1)期细胞周期,并加速凋亡。