海参溶菌酶基因克隆及在毕赤酵母中的表达与纯化

研究构建并筛选了具有抑菌活性的重组海参溶菌酶(Stichopus japonicuslysozyme,SJL)的毕赤酵母工程菌。从海参肠组织中提取总RNA,根据已经测得的SJL的基因序列(GenBank accession No.EF036468)设计引物,以总RNA为模板经RT-PCR获得目的基因,并将该基因与表达载体pPIC9K连接,构建重组质粒pPIC9K-SJL,再转化至毕赤酵母GS115中。利用MD、MM和含抗生素G418的YPD平板培养基筛选出表型为His+Muts的高拷贝阳性菌株。挑选具有抑菌活性的菌株进行甲醇诱导表达液体发酵,其上清液经硫酸铵沉淀、透析后得到溶菌酶粗品,再经CM52-纤维素阳离子交换柱进一步纯化,得到电泳纯的溶菌酶。结果显示,共筛选到7株有抑菌活性的重组酵母菌株,诱导72 h时表达量最高。SJL在毕赤酵母中得到成功表达。

重组海参溶菌酶理化特性及生物活性的初步研究

将构建好的重组海参溶菌酶毕赤酵母菌株进行诱导表达，用CM52-纤维素阳离子交换柱分离得到电泳纯的重组海参溶菌酶。利用浊度法测定该酶的活性，滤纸片液体扩散法测定其抑菌谱。结果显示，重组海参溶菌酶的最适pH值为6．5，最适温度为35℃，在pH5．0～7．5、50qC以下有较好的稳定性。抑菌谱测定结果显示重组海参溶菌酶对6种指示菌均表现出抑菌性，尤其对副溶血弧菌的抑制作用最强。上述结果均与天然海参溶菌酶一致。

国民军入甘及其对甘肃社会的影响

冯玉祥的国民军1925年10月进入甘肃,驻军5年之久,对甘肃社会产生了深刻的影响。国民军实行全省军政和财政统一,整顿吏治;宣传国民革命和新三民主义,使新思想和新思潮广泛传播;发展经济,创办学校,促进甘肃文化教育事业的发展,使甘肃社会发生了前所未有的变迁。

高校端正学生入党动机的对策研究

当前,大学生在入党动机方面存在着一些问题,所以高校基层党组织对入党积极分子队伍建设必须进行认真思考.加强大学生思想政治理论知识教育、注重大学生心理健康教育等对于发挥学生党员的先锋模范作用、端正大学生的入党动机、促进学风建设具有重要的意义.

高校毕业生就业难原因分析及相应对策

随着高校的扩招,高校毕业生也以较大的幅度逐年递增,"就业难"问题不仅成为困扰高校办学的症结,而且也成为教育部门和社会面临的一个棘手难题。必须要在学生、学校和国家的共同参与下,切实解决大学生就业难的问题。

大学历史“糊涂”教学法探讨

“授——受”教学模式在历史教学中一直占据着垄断地位，这种历史教学模式的主要缺陷在于“去问题化”。教师通过“糊涂”教学可以变“去问题化”的灌输式教学为探究式教学，其核心在于拓展学生的知识视野、激活学生的思维，引导他们自己去探索问题并解决问题，从而把历史学习从“接受式”学习转变为主动探究和积极建构式学习。

一种快速的消隐线算法及实现

本文提出了一个针对线框式图形表示、平行投影的快速消隐算法，并叙述了其程序实现。

汽车制造企业安全生产管理问题及对策探讨

近年来伴随着经济的发展,人们的生活质量进一步提升,汽车开始成为人们出行经常用到的交通工具。针对汽车企业而言,机械设备和企业职工安全管理工作意义重大。以此为前提,本文对汽车制造企业和安全生产相关的各项管理当中的不足之处进行了剖析,并针对这些安全生产问题给出了与之对应的处理措施,希望能够帮助汽车行业提升安全管理水平。

汽车被动安全测试技术发展现状及发展趋势分析

我国汽车消费市场规模处于不断扩张状态,交通通行流量也逐渐增多。在这种背景条件下,汽车安全性开始受到人民群众的广泛重视。在车辆安全应用技术中,被动安全方案属于常见类型之一。为进一步加强相关技术应用可靠性,需要进行深入分析,明确其发展现状与未来趋势。本文针对汽车被动安全测试技术发展现状、新测试类型、未来发展进行深入研究,以供相关行业与人员参考。

开封解放初期的统一货币和稳定物价工作

解放战争后期，随着大批城市被解放，中共的工作重心由乡村转向城市。稳固城市秩序，特别是经济秩序，是中国共产党进行城市政权建设的前提和基础。1948年10月24日，人民解放军解放开封。开封政治地位重要，又是中共在关内解放的第二个省会城市，因此，中共中央和中原局高度重视开封的经济重建工作。本文以河南开封为例，探讨解放初期中共统一货币和稳定物价的措施与成效。

建筑业劳动力市场的农村区域开发及培育

一、农村是建筑业劳动力市场开发的重点 随着经济的发展和人民生活水平的日益提高,建筑业已成为国民经济发展的支柱产业之一。然而建筑产业的劳动力及市场状况如何,在很大程度上促进或制约着建筑产业的稳定、高效及其可持续发展等问题。从改革开放以后的近二十年及今后相当一段时期以来,建筑产业是国民经济发展的最活跃和最强劲的行业之一,那么它的发展自然需要有适应生产过程所要求的丰富而有素的劳动力和对劳动力市场的开发培育。