小青龙汤对β_(2)肾上腺素能受体减敏哮喘小鼠RhoGDI_(2)/GRK_(2)/β-arrestin信号传导的影响

目的探讨小青龙汤对β_(2)肾上腺素能受体(β_(2)-AR)减敏哮喘小鼠的可能作用机制。方法30只SPF级雌性BALB/c小鼠随机分为空白组、模型组、小青龙汤组(中药组)、地塞米松组及小青龙汤加地塞米松组(中药加地塞米松组),每组6只。除空白对照组外,其余各组小鼠通过用卵蛋白(OVA)致敏激发及沙丁胺醇反复刺激来进行造模。造模后自激发第1天起,小青龙汤组每天灌服小青龙汤0.76 g/100 g,地塞米松组每天以腹腔注射地塞米松0.07 mg/100 g,小青龙汤加地塞米松组每天灌服小青龙汤及腹腔注射地塞米松,剂量同前,连续7 d。末次给予OVA激发后24 h,采用EMK动物肺功能测量系统监测各组小鼠的气道阻力,苏木素-伊红(HE)染色法观察小鼠肺组织病理情况,逆转录PCR(RT-PCR)分别检测肺组织中β_(2)-AR、Rho鸟苷酸解离抑制因子2(RhoGDI_(2))、β-AR激酶(GRK_(2))、β-抑制蛋白(β-arrestin)的mRNA表达,Western blot测定肺组织中β_(2)-AR、RhoGDI_(2)、GRK_(2)、β-arrestin含量。结果病理组织学观察发现β_(2)-AR减敏哮喘小鼠气道炎症浸润,各级支气管管壁显著增厚,管道狭窄,且较空白组的病理表现明显加重,经给药后均有不同减轻,以小青龙汤加地塞米松组最优;小鼠气道阻力测定显示随着乙酰甲胆碱(Mch)给药浓度的增加,模型组气道阻力较空白组逐渐增加,给药后各组均有下降趋势,以中药加地塞米松组下降最为明显(P<0.05);肺组织中β_(2)-ARmRNA及β_(2)-AR的表达明显下降,经药物干预后两者均有不同程度的上升,其中肺组织中β_(2)-ARmRNA的表达以小青龙汤加地塞米松组最优,而小青龙汤与地塞米松组之间差异无统计学意义;经造模后与空白组相比,小鼠肺组织中RhoGDI_(2)、GRK_(2)、β-arrestin及它们的mRNA的表达均有不同程度的增强(P<0.05),经药物干预后与模型组相比,小青龙汤组、地塞米松组及小青龙汤加地塞米松组中RhoGDI_(2)、GRK_(2)、β-arrestin及它们的mRNA的表达均下降(P<0.05),且小青龙汤组与地塞米松组之间无明显差异(P>0.05)。结论小青龙汤对β_(2)-AR减敏哮喘小鼠的作用机制可能通过影响肺组织β_(2)-AR的表达及RhoGDI_(2)/GRK_(2)/β-arrestin信号传导来实现,且效果与地塞米松相当。

儿童支气管哮喘急性发作期中医核心用药挖掘及机制分析

目的利用数据挖掘及网络药理学技术探究儿童支气管哮喘急性发作期中医核心用药及其作用机制。方法收集儿童支气管哮喘急性发作期中医治疗的医案,借助中医传承辅助平台获取核心用药。基于TCSMP数据库获取核心药物的主要活性成分,通过Swiss Target Prediction数据库和SEA数据库预测主要活性成分的靶点;在TTD数据库、Drugbank数据库检索支气管哮喘的相关靶点,将药物靶点与疾病靶点映射,获得核心药物治疗支气管哮喘的靶点,导入STRING数据库构建PPI网络并通过Cytoscape 3.2.1软件进行拓扑参数分析。通过DAVID数据库对核心靶点进行GO分析。结果查阅相关书籍25本,纳入医案130篇,获取4味核心药物及其主要化学成分150个,预测药物靶点数目为601个。获取支气管哮喘相关疾病靶点172个,核心药物治疗支气管哮喘的靶点79个。GO分析获得273条通路。结论儿童支气管哮喘急性发作期中医治疗核心用药为麻黄、苦杏仁、紫苏子和甘草,其作用机制可能与炎症应答、G蛋白偶联受体信号通路、类固醇激素生物合成等多通路相关。

金匮肾气丸加减方对小儿闭塞性细支气管炎中医证素的影响研究

目的:探讨金匮肾气丸加减方对小儿闭塞性细支气管炎(BO)中医证素的影响。方法:采用随机对照试验的研究方法,将符合纳排标准的BO患儿60例平分为两组,每组各30例。其中治疗组给予金匮肾气丸加减方治疗,对照组给予西医常规治疗,疗程均为14d。根据证素辨证方法,分别提取病位证素及病性证素,观察两组证素分布情况及治疗前后病位及病性证素积分的变化。结果:最终治疗组完成28例、治疗组完成27例,两组病位证素出现频率>20%的分别为肺、肾、脾、表,病性证素分别为阳虚、气虚、阴虚、血虚、痰、饮。经治疗后,治疗组各病位证素积分均较治疗前下降(P<0.05),且与对照组相比,肾、脾、表病位证素积分均明显下降(P<0.05);对照组肺、表2个病位证素积分,在治疗后较治疗前均有下降(P<0.05)。治疗组各病性证素积分均较治疗前下降(P<0.05),且与对照组相比,阳虚、气虚、阴虚、血虚4个病性证素积分均明显下降(P<0.05);对照组痰、饮2个病性证素积分,在治疗后较治疗前下降(P<0.05)。结论:金匮肾气丸可有效改善脾肾阳虚型BO患儿病位证素肺、脾、肾、表及病性证素阳虚、气虚、阴虚、血虚、痰、饮的积分情况,研究为金匮肾气方治疗儿童BO的有效性提供了客观依据。

基于网络药理学探讨小青龙汤治疗变应性鼻炎的作用机制

目的:基于网络药理学技术探讨小青龙汤治疗变应性鼻炎(Allergic Rhinitis,AR)的作用机制。方法:通过中药系统药理学数据库与分析平台获取小青龙汤中8味药物的化学成分并筛选主要活性成分,通过Swiss Target Prediction数据库、SEA数据库预测主要活性成分作用靶点,并将其导入Cytoscape 3.2.1软件构建"成分-靶点"网络;检索TTD、Drugbank及DisGeNET数据库收集与AR有关的疾病靶点,取交集获取小青龙汤治疗AR的靶点,导入STRING数据库构建蛋白质-蛋白质相互作用(Protein-Protein Interoution,PPI)网络并通过Cytoscape 3.2.1软件进行网络可视化及拓扑结构分析,通过Clue GO插件和DAVID数据库对核心靶点进行基因本体(The Gene Ontology,GO)分析和京都基因和基因组数据库(Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes,KEGG)通路富集分析。结果:本研究得到小青龙汤主要活性成分150个,作用于364个靶点,疾病靶点209个,小青龙汤与AR共有靶点38个,通过GO分析获得11个生物过程,KEGG富集显示与77个信号通路相关。结论:小青龙汤可通过多靶点、多途径发挥治疗AR的作用,可为进一步临床和实验研究提供一定的理论基础。