功能性老年乳粉中300种非法添加药物及其类似物的液相色谱-高分辨质谱分析

随着老龄化进程不断加剧,各类声称保健功能的老年乳粉不断涌现,一些生产企业通过非法添加化学药物来实现产品声称的显著功效,危害消费者健康。现有标准方法需要按照功能声称分类别进行检测,不仅耗费人力物力,还严重制约了日常监管工作对未知风险物质的侦查能力。本工作应用QuEChERS净化结合具有Zeno SWATH®全息式数据非依赖型采集定量(data-independent acquisition,DIA)技术的超高效液相色谱-四极杆飞行时间质谱,建立了适用于功能性老年乳粉中300种非法添加化学药物的高通量筛查定量分析方法及未知结构类似物识别策略。针对乳粉基质特点开发了QuEChERS净化流程,通过Kinetex F5色谱柱(100 mm×3.0 mm,2.6μm)分离,以5 mmol/L甲酸铵水溶液(含0.1%(v/v)甲酸)和甲醇-乙腈(1∶1,v/v)作为流动相进行梯度洗脱。从线性范围、灵敏度、基质效应、精密度和准确度等方面对定量分析方法进行验证。在建立300种已知药物定性筛查数据库的基础上,应用电子激活解离(electron-activated dissociation,EAD)碎裂技术,获得丰富的二级质谱裂解碎片信息,通过归属分析对未知风险物质进行鉴别和确证。所有已知目标药物在相应浓度范围内呈良好的线性关系,相关系数>0.99,检出限(LOD)和LOQ分别在0.04~2.7和0.2~8.0μg/kg范围内。3个水平下的平均加标回收率为73.1%~125.2%,相对标准偏差(RSD)≤14.8%。将该方法应用于60份实际样品中非法添加物质的检测,在两份样品中分别检出苯乙双胍及西地那非药物,并成功识别出一种安非他明结构类似物乙非他明。该方法简便、灵敏、准确,对于功能性乳粉的日常监督执法工作具有实际应用价值。

母乳脂质对婴儿肠道功能影响研究进展

婴幼儿出生后免疫系统不成熟,依赖先天免疫系统进行保护,肠道是先天免疫的重要执行者。母乳提供了婴幼儿足够数量的脂质和最适宜消化吸收的脂质结构,脂质以乳脂肪球的形式存在并被乳脂肪球膜所包裹。母乳脂质的结构、组成也直接影响对婴幼儿肠道功能的调节。本文对母乳中饱和脂肪酸、长链多不饱和脂肪酸和脂肪球膜以及复合脂质在婴儿肠道发育和免疫调节方面的作用做一综述。为婴幼儿配方奶粉母乳化的应用以及婴儿肠道疾病的治疗提供新的理论支撑。

新型呼肠病毒S1基因与宿主细胞相互作用的初步研究

目的筛选出新型呼肠病毒S1基因和宿主相互作用的关键区段,为后续的宿主受体蛋白筛选工作提供可靠的基础。方法将编码全长S1基因,以及N端和C端阅读框分别克隆入真核表达载体pIRSE2-EGFP,转染敏感细胞株鼠成纤维细胞(L929)和人宫颈癌细胞(Hela)后,通过荧光报告基因EGFP的表达分析,筛选出S1基因与宿主细胞相互作用时起决定性影响的区段。结果同等量的3种真核表达质粒在单独转染L929时,pGSN质粒转染后荧光表达量最大,pGSC质粒转染后荧光表达量最小。不同比例混合的pGS与pGSN进行共转染时,pGSN在转染质粒中的比例越高,荧光表达量也越高。在Hela细胞中的转染结果与L929相同。结论新型呼肠病毒R4株的S1基因N端阅读框编码区(62—406 bp)在S1基因转染时起关键作用。

不同人群中新型呼肠病毒既往感染状况调查

目的调查不同人群中新型呼肠病毒既往感染情况。方法选取健康人群以及手足口病、腹泻、麻疹、乙型肝炎等患者的血清标本,利用微量中和试验检测其血清标本中新型呼肠病毒IgG抗体。结果中和试验结果表明,健康人群中新型呼肠病毒IgG抗体阳性率为29.90%,抗体滴度的中位数为1:32;手足口病患者中抗体阳性率为70.83%,抗体滴度的中位数为1:64;乙型肝炎和麻疹患者抗体阳性率分别为90.22%和90.70%,抗体滴度的中位数均为1:128;腹泻患者中抗体阳性率和抗体滴度的中位数均最高,分别为100%和1:256。结论健康人群与不同疾病患者中薪型呼肠病毒特异性IgG抗体阳性率及滴度存在显著差异。

超高效液相色谱-串联质谱法测定功能饮料中的牛磺酸和赖氨酸

目的建立超高效液相色谱-串联质谱法测定功能饮料中牛磺酸和赖氨酸的检测方法。方法采用衍生化的方法,将稀释之后的饮料样品中的牛磺酸和赖氨酸与苯甲氧羰酰琥珀酰亚胺在碱性条件下进行反应,之后采用超高效液相色谱-串联质谱法测定衍生化后的化合物含量。结果牛磺酸和赖氨酸分别衍生之后的化合物在1~200ng/mL的范围内线性良好,牛磺酸的检出限为20pg/mL,定量限为50pg/mL;赖氨酸的检出限为100 pg/mL,定量限为250 pg/mL。2种物质在低、中、高3个浓度的加标回收率为92.77%~107.59%,相对标准偏差均小于10%(n=6)。结论本方法样品制备步骤简便、检测灵敏度高、重复性好,可用于快速准确的测定饮料中的牛磺酸和赖氨酸的含量。

实时荧光定量PCR法鉴定婴幼儿配方乳粉中动物双歧杆菌乳亚种

该研究通过系统发育树分析确定目标基因,并设计引物和探针,建立一种婴幼儿配方乳粉中动物双歧杆菌乳亚种(Bifidobacterium animalis subsp.lactis)的实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-fqPCR)鉴定方法。通过特异性、灵敏性和抗干扰实验对该方法进行验证,并对市售的64份标识含有动物双歧杆菌乳亚种的婴幼儿配方乳粉样品进行检测。结果表明,atpD基因在动物双歧杆菌乳亚种间具有较高的种间特异性,种间差异率>10%,确定其为目标基因。基于该基因建立的RT-fqPCR方法能够特异性的检测动物双歧杆菌乳亚种,检测绝对灵敏度可以达到1 pg/μL,相对灵敏度可以达到10^(3) CFU/mL;基因水平和培养物水平抗干扰能力良好。采用该方法从64份标识含有动物双歧杆菌乳亚种的乳粉样品中均能检测出动物双歧杆菌乳亚种,表明基于atpD基因建立的RT-fqPCR方法能够快速准确的对动物双歧杆菌乳亚种进行检测。

实时荧光定量PCR法鉴定发酵乳中嗜热链球菌

该研究通过系统发育树分析确定目标基因,根据目的基因设计特异性引物和探针,建立一种能够快速准确鉴定发酵乳中嗜热链球菌的实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-fqPCR)法,通过特异性、灵敏性和抗干扰实验对所建立方法进行验证,并使用该方法对市售的60份标识含有嗜热链球菌的发酵乳样品进行检测。结果表明,recA基因具有种间特异性,种间差异率>10%,以其为目的基因建立的RT-fqPCR方法能够特异性的检测嗜热链球菌;绝对灵敏度达1 pg/μL,相对灵敏度达10^(3) CFU/mL;在培养物水平和基因组水平抗干扰能力良好。采用该方法从60份标识含有嗜热链球菌的发酵乳样品中均能检测出嗜热链球菌,说明实时荧光定量PCR方法能够快速、准确的对发酵乳中嗜热链球菌进行检测。

干扰物对食品检验定性影响的风险实证和控制分析

化学分析领域工作中,方法优化及过程质量控制都是为了得到准确可靠的检验结果.检验结果的正确性、准确性和可靠性一直是人们关注的重点.2020年底,媒体爆出日本药企小林化工株式会社发生严重混药事故,导致服用该药物的患者2人死亡、上百人健康受损.据报道,该批次药物在出厂前曾采用液相色谱进行成分分析,出现了一个未知色谱峰,表明其主要成分可能不同,有异物混入,但并未引起公司重视,最终造成事故发生.由此可见,忽略任何一个微小或异常的因素都可能严重影响检验结果.

食品抽检监测新风险挖掘及应对策略

食品安全抽检监测工作存在的指标设置靶向性不足、风险发现能力欠缺的问题,造成新风险监管出现缺失和抽检监测结果合格率较高的反差。对食品抽检监测新风险挖掘方法的研究,可以加强抽检监测工作的靶向性,提升其风险发现能力,提高其工作质量。基于食品抽检监测新风险的主要来源及特点,对新风险挖掘的多条途径进行研究,包括进出口和国际预警的信息分析、舆情信息的收集分析、文献期刊检索分析、网络销售平台信息搜索、检验机构日常监测和实地调研,并从监管技术和监管模式两方面提出多条食品抽检监测新风险挖掘应对策略的建议。

搭建监测预警平台 保障食品质量安全

食品安全溯源体系是1997年欧盟为应对“疯牛病”问题而逐步建立并完善起来的食品安全管理制度，目的是在消费者端出现食品安全质量问题时，可以通过食品标签上的溯源码进行联网查询，查出该食品的生产企业、食品的产地、具体农户等生产流通信息，明确事故方相应的法律责任。