神经导航技术在锁孔手术中的应用

目的探讨神经导航技术在神经外科锁孔手术中的应用。方法使用史赛克导航仪,对18例颅内病变的影像学资料进行三维重建或融合后,指导相应的锁孔手术。结果图像重建、融合均成功。病变全切率为81.3%,2例动脉瘤夹闭满意。术后痊愈率72.2%。结论先进的导航技术(包括特殊的图像处理技术)辅助下的锁孔显微手术具有术前计划周密,术中定位准确可靠,皮肤切口小而隐秘,手术创伤小,病变全切率高,术后并发症少等优点,在微创神经外科领域中具有广泛的应用前景。

胎鼠多巴胺能神经元前体细胞体外扩增和诱导分化的初步研究

目的 尝试体外扩增胎鼠多巴胺能神经元前体细胞并用L 抗坏血酸 2 磷酸酯倍半镁盐 (AA 2P)促其分化成多巴胺能神经元。方法 体外培养来自胎鼠中脑腹侧组织的前体细胞 ,用bFGF促其增殖 7天 ,而后用AA 2P促其分化 ,并进行免疫荧光染色分析。结果 细胞总数平均增长了 6 8倍 ,其中星形胶质细胞只占 ( 4 15± 1 37) % ,而神经元占 ( 2 0 38± 11 6 0 ) % ,多巴胺能神经元占所有神经元的 ( 2 9 4 7± 13 79) %。

小胎龄鼠的腹侧中脑神经前体细胞体外培养研究

目的体外培养小胎龄的胎鼠腹侧中脑神经前体细胞,根据多巴胺能神经元产量,确定较好的研究对象,为细胞移植治疗帕金森病奠定基础。方法取不同胎龄胎鼠(E10、E11、E12)的腹侧中脑神经前体细胞,体外加碱性成纤维细胞生长因子扩增7d后用含AA-2P的分化增养液培养7 d,行免疫荧光染色比较多巴胺能神经元形成情况。结果E10、E11、E12细胞经培养后细胞总数分别增加76.39倍、59.67倍、51.85倍。多巴胺能神经元占所有细胞的比例在E11、E10、E12依次显著降低。对于多巴胺能神经元占所有神经元的比例,E11显著高于E10和E12。结论来自胎龄11 d的胎鼠腹侧中脑神经前体细胞是较好的体外培养对象,可为细胞移植研究提供较为充足的细胞资源。

基于功能磁共振影像研究针灸治疗风痰瘀阻证中风偏瘫的疗效

目的利用功能磁共振弥散张量成像技术分层研究针灸治疗风痰瘀阻证中风偏瘫患者的疗效。方法选择南京中医药大学附属苏州市中医医院中医经典病房2019年2月—2022年1月收治的59例风痰瘀阻证中风偏瘫患者,病情稳定1周后进行功能磁共振扫描,三维重建其脑内皮质脊髓束(CST)图像,按照CST受损程度对患者进行分级,然后给予针刺祛痰化湿相关穴位治疗3周。比较所有患者及CST不同分级患者针灸治疗前后Brunnstrom上肢、手、下肢评分以及NIHSS评分,评估针灸治疗疗效。结果磁共振检查发现CST 1级24例,2级28例,3级7例。CST 1级和2级的患者针灸治疗后Brunnstrom上肢评分、手评分、下肢评分以及NIHSS评分均较治疗前显著改善(P均<0.05),而CST 3级患者则只有NIHSS评分较治疗前明显改善(P<0.05)。CST 1级患者的治疗总有效率显著高于CST 3级患者[91.7%(22/24)vs 42.9%(3/7)],差异有统计学意义(P<0.05)。CST 1级的出血性中风患者治疗后Brunnstrom上肢评分、手评分以及NIHSS评分均较治疗前显著改善(P均<0.05),但是Brunnstrom下肢评分无明显改善(P>0.05)。结论针刺祛痰化湿相关穴位治疗风痰瘀阻证中风偏瘫患者的疗效与患者脑内CST受损程度密切相关,CST未完全断裂的患者肢体运动功能显著改善。对于CST无断裂的出血性中风患者,针刺有祛痰化湿功能的穴位可有效提高偏瘫侧上肢和手的运动功能,对偏瘫侧下肢运动功能影响不明显。

中脑多巴胺能前体细胞分化过程中胶质细胞相关基因的表达

目的分析原代培养的近交系胎鼠腹侧中脑前体细胞(ventral mesencephalic precursors,VMP)在诱导分化过程中胶质细胞相关基因的表达情况。方法原代培养近交系胎鼠VMP,体外增殖培养7d后诱导分化7d。在第7天、11天和14天抽提RNA,用Affymetrix Rat Expression Array2302.0芯片检测基因表达谱,分析差异基因。结果与胶质细胞密切相关的GFAP、S100b、Gja1和Clu基因均明显上调,而GDNF家族基因无明显改变。结论在体外VMP的诱导分化过程中,随着星形胶质细胞的增多,GFAP、S100b、Gja1和Clu基因表达均明显上调,值得进一步深入研究。

医学图像处理技术在神经导航手术中的初步应用(附35例临床报道)

目的探讨神经导航相关的图像重建和融合技术在神经外科微创手术中的应用价值。方法利用史赛克导航仪,对不同颅内病变的影像学资料进行重建、融合,指导神经外科显微手术。结果图像重建、图像融合均成功。在导航指导下,33例病变全切率为78.79%,2例动脉瘤夹闭满意。结论利用先进图像处理技术进行神经导航辅助显微神经外科手术,具有术前计划周密详尽、术中定位准确可靠、手术创伤小、病变全切率高等突出优点,在微创神经外科领域具有广泛的临床应用前景。

体外诱导分化多巴胺能神经元的分子特征

背景:一系列研究表明,腹侧中脑多巴胺能前体细胞可在体外经人工诱导分化为大量多巴胺能神经元,有望用于移植治疗帕金森病,但是其分子特征尚不明了。目的:观察体外培养得到的多巴胺能神经元标记基因的表达情况。设计、时间及地点:观察性实验,于2005-12/2008-12在苏州大学附属第二医院神经外科脑肿瘤研究室以及上海生物芯片有限公司完成。材料:健康成年近交系Wistar孕鼠(>36代),体质量约300g,用于中脑细胞体外培养。方法:取材培养胎鼠腹侧中脑细胞,先用碱性成纤维细胞生长因子进行扩增,而后用L-抗坏血酸-2-磷酸酯倍半镁盐诱导其分化。分别于诱导前和诱导后第4天,第7天抽提RNA后利用Affymetrix基因芯片检测多巴胺能神经元标记基因的表达变化。主要观察指标:①多巴胺能前体细胞诱导分化后形态变化。②常见多巴胺能神经元标记基因在诱导分化前后过程中的表达。结果:大鼠腹侧中脑多巴胺能前体细胞可在体外被大量诱导分化成酪氨酸羟化酶阳性细胞,并且不同程度地表达多种多巴胺能神经元标记基因乙醛脱氢酶1A1亚家族、钙结合蛋白1、多巴脱羧酶、多巴胺转运体、G蛋白门控内向整流钾通道、囊泡单胺转运体2。随着细胞诱导分化的进行,这些标记基因表达的变化趋势也不尽相同,其中显著上调的标记基因为钙结合蛋白1,而显著下调的标记基因为G蛋白门控内向整流钾通道。结论:大鼠腹侧中脑多巴胺能前体细胞可在体外大量诱导分化成酪氨酸羟化酶阳性的主要源自中脑腹侧被盖区(A10)的多巴胺能神经元。

神经外科患者气管切开术中及术后呼吸骤停分析

对１２０例神经外科患者施行气管切开术，有２例在术中、３例在术后短时间内出现意外的呼吸骤停。可能与低氧、高二氧化碳血症、迷走神经反射、严重心肺疾病和中枢衰竭等原因有关，并提出了相应的防范措施。

正常涎腺及涎腺肿瘤雌激素受体初步研究

口腔颌面部肿瘤中涎腺肿瘤极为常见，目前的治疗方法尚不够满意，迫切需要发展其他治疗手段。乳腺癌、前列腺癌等一些肿瘤的内分泌治疗成功为此提供了一条新的思路。目前国内尚未见有定量研究涎腺雌激素受体（ＥＲ）的报道。国外也只有笼统地描述性定量研究涎腺胞浆ＥＲ的...

人胚胎神经干细胞体外培养及其增殖与分化的研究

目的 建立神经干细胞分离、培养及分化的鉴定技术 ,观察神经干细胞增殖、分化的特点。方法 从人胚胎海马区分离神经干细胞 ,采用无血清培养基 ,进行体外扩增培养、传代。采用免疫细胞化学法鉴定神经干细胞和分化的神经细胞 ;利用流式细胞仪和细胞生长曲线检测神经干细胞的增殖能力。结果 从人胚胎脑海马区分离的细胞具有增殖和多向分化潜能 ,可进行传代培养 ,获得的细胞团中大部分为nestin表达阳性细胞。贴壁分化后可以出现NSE、GFAP表达阳性的细胞。结论 用上述方法分离培养的细胞能表达nestin蛋白 ,具有自我更新和增殖能力 ,并具有向神经元、星形胶质细胞分化的潜能 ,具备神经干细胞的特征 。

诱发电位监测技术在脑干及其附近肿瘤手术中的应用

目的探讨诱发电位技术在脑干及其附近肿瘤手术中的应用价值。方法选择静脉麻醉下脑干及其附近病变手术病人18例,术中监测脑干听觉诱发电位(BAEP)7例,体感诱发电位(SEP)18例,运动诱发电位(MEP)5例。当术中波形发生明显异常时,即通知术者调整或停止操作。结果本组术中诱发电位监测均顺利完成。BAEPⅤ波变化6例,其中波形逐渐恢复5例,术后均未出现新的神经功能障碍;未恢复1例,术后轻度意识障碍,3d后清醒。SEP波形变化4例,其中手术结束时恢复至基线水平3例,术后未发现异常;未恢复1例,术后病人昏迷。MEP出现变化1例,调整刺激后恢复。结论在脑干及其附近病变手术中应用多种诱发电位技术,可及时、有效地监测并保护脑干功能。

人小龄胚胎神经干细胞的分离培养、扩增及鉴定

目的探索人胚胎神经干细胞的体外分离培养条件,从而在体外大量扩增神经干细胞;并观察神经干细胞增殖、分化的特点。方法从人胚胎脑分离神经干细胞,部分细胞冻存,另一部分细胞进行体外培养。采用无血清培养液,加入表皮生长因子(EGF)和碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)刺激细胞增殖,进行体外扩增、传代培养。采用免疫荧光法鉴定神经干细胞和分化的神经元及胶质细胞。结果从人胚胎脑分离的细胞在含有EGF和bFGF的无血清培养液中能形成大量的神经干细胞球,这些神经干细胞球可在体外扩增及传代培养。免疫荧光法鉴定神经干细胞球中大部分为神经上皮干细胞蛋白(nestin)表达阳性细胞。贴壁后可以分化出神经元特异性烯醇化酶(NSE)、胶质纤维酸性蛋白(GFAP)表达阳性的细胞。经冻存后的胎脑细胞也能培养出具有同样特征的神经干细胞。结论在含有EGF和bFGF的无血清培养液中,从人胚胎脑能分离培养出神经干细胞,并能在体外大量扩增。这为人类神经干细胞的进一步研究和应用提供了材料。

弥散张量成像技术初步评价视放射

目的探索临床可接受的视放射成像扫描计划和相应图像后处理方法。方法对10例正常自愿者(男6例,女4例),年龄20～45岁,平均28岁,以1.5T磁共振扫描仪行DTI扫描,弥散梯度磁场(MPG)选择6、14、323个方向,扫描时间5分钟左右。利用DTI Studio软件,采用多感兴趣区(ROI)法进行图像后处理,重建视放射纤维束,比较三组图像信噪比(SNR)、视放射迈耶袢显示情况以及图像视放射纤维束平均长度与密度。结果三组图像比较,SNR组间差异无统计学意义;6MPG与32MPG组间在迈耶袢显示方面差异有统计学意义。研究三组资料间两两比较,平均纤维束长度与密度的差异均具有统计学意义。结论在1.5T场强、32MPG下、约5分钟扫描时间内,采用多ROI后处理方法,可以得到临床较为满意的视放射纤维束图像。

两种语言任务脑功能区激活的功能磁共振成像比较

目的对照两种不同模式语言任务的血氧水平依赖性功能磁共振成像(BOLD fMRI)脑功能区激活图,探讨这些功能区在语言加工过程中的意义。方法对8名右利手健康志愿者,分别在执行图片命名及词语联想任务时进行BOLD fMRI扫描。所得原始图像数据经神经功能影像分析软件处理,生成两种任务的脑激活图后进行对照研究。结果词语联想激活的脑区主要有双侧额叶内侧面辅助运动区(SMA)、双侧中央前回运动区(BA6)(左侧较右侧显著)、左侧枕叶皮层(BA18、19)、左侧额叶下回(BA45、47)、左侧岛叶(BA13)、双侧小脑上部。图片命名激活的脑区主要有双侧额叶内侧面SMA区、左侧额叶下回(BA44)、双侧枕叶上中部皮层(BA18、19)、双侧中央前回(BA6)、双侧小脑上部。图片命名激活枕叶的范围比词语联想明显;而词语联想对语义语音加工相关脑区的激活比图片命名明显,且具有明显的优势半球偏侧化特征。结论上述两种语言任务能激活参与语言加工的由多个脑区组成的神经网络。两种语言任务的脑区激活特点反映了各自具有相对独特的认知成分及加工过程。

大鼠骨髓基质干细胞体外分离、培养及分化的相关实验研究

目的探索大鼠骨髓基质干细胞(BMSC)体外分离、培养及纯化的合适实验条件,并探讨其在体外定向诱导分化为神经元样细胞的可行性。方法通过密度梯度离心法从成年大鼠骨髓中分离出BMSC,而后通过贴壁培养法培养及纯化,观察其生长特性;对纯化后的BMSC使用碱性成纤维生长因子(bFGF)和表皮生长因子(EGF)进行定向诱导分化,并进行免疫细胞化学鉴定。结果体外培养的BMSC传4代后,纯度最高,可达(95.23±3.06)%;其诱导分化7 d后,(75.43±7.63)%的细胞表现为-βTubulinⅢ阳性的神经元样细胞,(33.01±6.73)%的细胞则为GFAP阳性的胶质细胞。结论BMSC在体外培养条件下生长良好,经bFGF和EGF诱导后可大量分化为神经元样细胞和神经胶质细胞。

帕金森病的外科治疗

原发性帕金森病(ParkinSon’s Disease，PD)缺乏根治性的治疗方法，目前主要是药物治疗和手术治疗相结合。立体定向技术一直是手术治疗PD的有效手段之一，目前具体治疗方法主要为毁损手术、脑深部电刺激和神经移植三种。神经生理研究发现PD患者的症状可能同一些核团的过度活跃密切相关。

功能磁共振导航辅助锁孔手术治疗脑皮质运动区占位性病变(附10例分析)

目的探讨功能磁共振导航(fMRI)辅助锁孔手术治疗脑皮质运动区占位性病变的临床价值。方法回顾性分析10例涉及脑皮质运动区占位性病变的手术情况。术前均行fMRI扫描,将图像输入史赛克导航系统后指导锁孔手术入路的设计;术中根据运动激活区与病变的关系,实时利用导航引导手术切除病变。结果病变全切除8例(80%),次全切除1例,部分切除1例。术后出现一过性肌力障碍加重4例,其他病人肌力水平同术前。术后3个月随访,肌力水平较术前均无恶化,且其中2例较术前改善。结论fMRI导航辅助锁孔手术治疗皮质运动区占位性病变,在最大程度切除病变的同时能有效保护神经功能,从而提高手术安全性,减少手术并发症,改善病人术后的生活质量。

翼点锁孔入路中面神经额支保护的实验研究

目的通过研究面神经额支与发际的相对位置关系,设计既能满足手术暴露需要,又不损伤面神经,同时符合美容要求的翼点锁孔入路切口。方法在14例(28侧)10%甲醛溶液固定的成人尸头上解剖面神经额支,测量面神经额支、发际在耳上基点-外眦线(AE)、额颧点-翼点线(FP)上的位置,测量鬓角、面神经额支入额肌最高点到FP的垂直距离。结果在AE线上,面神经额支最后支从发际内的前部(耳上基点前39.3 mm)穿过,面神经在其后的向上走行过程中与发际无交叉。结论以蝶骨嵴根部的体表投影为中心,作起于鬓角,沿发际前缘弧形向下,止于耳上基点前39 mm,位于发际内的长约5 cm的翼点锁孔入路切口,是不损伤面神经的理想切口。