生鲜牛乳中抗生素残留检测技术研究进展

对生鲜牛乳中抗生素残留的来源、危害、最高残留限量、残留的检测方法以及样品前处理新方法进行了综述,为开发抗生素多残留筛查方法以及建立样品通用前处理技术提供参考。

超高效液相色谱-四极杆飞行时间质谱法快速筛查生鲜牛乳中的14种磺胺类药物

采用超高效液相色谱-四极杆飞行时间高分辨质谱（UHPLC-Q TOF MS）技术建立了生鲜牛乳中14种磺胺类药物（磺胺二甲嘧啶、磺胺嘧啶、磺胺二甲氧嘧啶、磺胺噻唑、磺胺吡啶、磺胺氯哒嗪、磺胺甲嘧啶、磺胺醋酰、磺胺曲沙唑、磺胺苯吡唑、磺胺苯酰、磺胺甲噻二唑、磺胺甲氧哒嗪、磺胺甲嚼唑）的快速筛查方法.建立了此14种化合物的精确分子质量数和二级质谱碎片离子数据库.牛乳样品经含0.1％甲酸的乙腈溶液提取,采用QuEChERS方法净化.目标药物经Agilent ZORBAX SB C18色谱柱（3.0 mm×100 mm,1.8 μm）分离,以乙腈-0.1％甲酸水溶液为流动相进行梯度洗脱,使用Dual AJS ESI源,在正离子模式下进行数据采集,可在8 min内实现对14种磺胺类药物的良好分离.结果表明,14种磺胺类药物的定量下限（LOQ,S/N=10）为10 μg/kg,在10,20,50 μg/kg 3个加标水平下的平均回收率为72.5％ ～ 117.1％,相对标准偏差为1.3％～10.9％.结合精确分子质量数、保留时间、同位素丰度和二级特征碎片离子对目标化合物进行快速筛查与确证.该方法快速简便、准确、灵敏度较高,适用于牛乳中磺胺类药物残留的高通量筛查与定性鉴定.

高分辨质谱快速筛查牛乳中10种禁用兽药残留

采用超高效液相色谱—四级杆飞行时间高分辨质谱(UHPLC-QTOF MS)技术建立了生鲜牛乳中10种雌激素类和氯霉素类药物的快速筛查方法,并建立了此10种化合物的精确分子质量数和二级质谱碎片离子数据库。牛乳样品经乙腈提取,采用QuECh?ERS(Quick,Easy,Cheap,Effective,Rugged and Safe)方法净化。目标药物经Agilent ZORBAX SB C18色谱柱分离,以乙腈和水为流动相进行梯度洗脱,使用Dual AJS ESI源,在负离子模式下进行数据采集,基质匹配标准曲线法定量。结果表明,10种雌激素类和氯霉素类药物的定量下限为10～50μg/kg,在3个加标水平的平均回收率为61.2%～116.3%,相对标准偏差为2.3%～10.8%。结合精确分子质量数、保留时间、同位素丰度和二级特征碎片离子对目标化合物进行快速筛查与确证。该方法快速简便、准确、灵敏度较高,适用于牛乳中雌激素类和氯霉素类药物残留的高通量筛查与定性鉴定。

高分辨质谱法快速筛查生鲜乳中的雌激素类药物

建立了高分辨质谱快速筛查生鲜乳中的7种雌激素药物的方法。生鲜乳样品经乙腈提取,采用改良的QuEChERS(Quick,Easy,Cheap,Effective,Rugged and Safe)方法净化。目标药物经Agilent ZORBAX SB C18色谱柱(3.0 mm×100 mm,1.8μm)分离,以乙腈和水为流动相进行梯度洗脱,使用Dual AJS ESI源,在负离子模式下进行数据采集,基质匹配标准曲线法定量。结果表明,7种雌激素类的定量下限(LOQ,S/N=10)为10~50μg/kg,在3个加标水平的平均回收率为63.5%~115.6%,相对标准偏差为3.4%~11.4%。通过保留时间、精确分子量、同位素丰度比对和二级碎片离子筛查与确证可疑化合物。该方法快速简便、准确、灵敏度较高,适用于牛乳中雌激素类药物残留的高通量筛查与定性鉴定。

超高效液相色谱-四极杆飞行时间质谱快速筛查与确证生鲜牛乳中80种抗生素和激素

采用超高效液相色谱-四极杆飞行时间高分辨质谱(UHPLC-QTOF MS)技术建立了生鲜牛乳中80种抗生素和激素的快速筛查方法。牛乳样品经含1%乙酸的乙腈溶液提取,采用QuEChERS(Quick,Easy,Cheap,Effective,Rugged and Safe)方法净化。目标药物经Agilent ZORBAX SB C_(18)色谱柱(3. 0 mm×100 mm,1. 8μm)分离,以乙腈-0. 1%甲酸水溶液为流动相进行梯度洗脱,使用Dual AJS ESI源,在正离子模式下进行数据采集,基质匹配标准曲线法定量。结果表明,80种抗生素和激素类药物在各自的浓度范围内线性关系良好(r^2≥0. 990 0),其定量下限(LOQ,S/N=10)为5～100μg/kg。LOQ加标水平下,80种兽药中23种兽药的回收率为50. 2%～59. 7%,相对标准偏差为1. 1%～13. 0%;其余57种兽药的回收率为61. 7%～119%,相对标准偏差为0. 3%～19. 0%。结合精确分子质量数、保留时间、同位素丰度和二级特征碎片离子对目标化合物进行快速筛查与确证。该方法快速简便、准确、灵敏,适用于牛乳中抗生素和激素类药物残留的高通量筛查与定性鉴定。

高效液相色谱-串联质谱法检测配合饲料中11种蛋白同化激素含量

建立了快速分析配合饲料中睾酮、甲基睾酮、勃地龙、美雄酮、雄烯二酮、脱氢异雄酮、诺龙、丙酸诺龙、司坦唑醇、美伦孕酮、黄体酮11种蛋白同化激素的高效液相色谱-串联质谱(HPLC-MS/MS)法。样品采用乙腈提取,经PSA粉净化后上机测定。采用Phenomenex C_(18)(100 mm×2.1 mm,2.6μm)色谱柱,以0.01%甲酸溶液-乙腈作为流动相进行梯度洗脱,电喷雾离子源正离子模式检测,同位素内标法定量。结果表明,11种蛋白同化激素的线性范围为1~100 ng/mL,相关系数均为0.999,检出限为20μg/kg,定量下限为50μg/kg。50、250、500μg/kg加标水平下,鸡配合饲料中各蛋白同化激素的回收率为94.5%~111%,日内相对标准偏差(RSD)和日间RSD均不大于13%;猪配合饲料中各蛋白同化激素的回收率为90.1%~109%,日内RSD不大于9.0%,日间RSD不大于8.8%。实际样品中检出睾酮和勃地龙,含量分别为9.09~14.68 mg/kg和1.22~1.84 mg/kg。该方法可为饲料中蛋白同化激素的滥用监管提供技术支撑。

高分辨质谱联合超高效液相色谱筛查饲料中非法添加物米诺地尔

利用高分辨质谱技术筛查鉴定饲料中不在常规检测范围内的、完全未知的非法添加物。待测样品经酸性甲醇提取后,经超高效液相色谱-四级杆飞行时间高分辨质谱采集全扫描数据进行非目标物分析。经分子特征搜索,生成分子式再结合标准品确证为米诺地尔(C_(9)H_(15)N_(5)O)药物。再通过超高效液相色谱-静电场轨道阱高分辨质谱对比相互印证,最后经超高效液相色谱定量,米诺地尔质量分数为0.003%。表明液相色谱-串联三重四级杆飞行时间高分辨质谱、液相色谱-静电场轨道肼高分辨质谱以及超高效液相色谱等多方法联合应用,可对饲料中的完全未知的非法添加物(米诺地尔)进行筛查、确证。

超高效液相色谱-四极杆-静电场轨道阱高分辨质谱快速筛查与确证猪尿中74种抗生素及其他化合物

采用超高效液相色谱-四极杆-静电场轨道阱高分辨质谱(UPLC-Q-ExactiveOrbitrap)建立了猪尿中74种抗生素及其他化合物的快速筛查与确证方法。猪尿样品经高速离心并稀释后,以AgilentSBC18色谱柱(3.0mm×100mm,1.8μm)分离,0.1%甲酸水溶液和0.1%甲酸乙腈溶液为流动相进行梯度洗脱。结合精确分子质量数、保留时间和二级特征碎片离子对目标化合物进行筛查与确证。74种目标药物在各自的浓度范围内呈良好线性(r2>0.99),检出限(LOD)为10ng/mL,在检出限加标浓度下,回收率集中在55.8%~120%,相对标准偏差(RSD)为1.3%~21%。该方法简便、快速、灵敏、准确,适用于猪尿中多种抗生素及其他化合物的定性确证,有利于掌握养殖业用药情况。

液相色谱-串联四极杆质谱法测定鸡蛋中8种三唑类农药残留量

目的建立液相色谱-串联四极杆质谱法测定鸡蛋中丙环唑、三唑酮、烯唑醇、抑霉唑、三唑醇、戊唑醇、氟硅唑和三环唑残留量的分析方法。方法取均质后的鸡蛋样品经乙腈溶液提取,加入无水硫酸镁和氯化钠进行脱水和盐析,高速离心后,取适量上层提取液经0.1%(V:V)甲酸稀释后,用中性氧化铝粉末净化并以10000 r/min离心取上清液,过0.22μm滤膜后上机测定。使用反相色谱柱进行分离,流动相为0.1%甲酸与乙腈,采用梯度程序进行洗脱,串联四极杆质谱法进行定性定量分析。结果 8种农药在2.5~250μg/kg范围内线性关系良好(r≥0.995),方法的检出限为1μg/kg,定量限为2.5μg/kg,添加回收率在78.31%~88.53%内,相对标准偏差低于10%。结论该方法具有较好的准确度与精密度,适用于鸡蛋中丙环唑、三唑酮、烯唑醇、抑霉唑、三唑醇、戊唑醇、氟硅唑和三环唑的残留量测定。

液相色谱-串联质谱同时检测饲料中7种α_2受体激动剂类药物

研究首次建立饲料中替扎尼定、赛拉嗪、美托咪啶、胍那苄、利美尼定、胍法新和可乐定这7种常见的α_2受体激动剂的液相色谱-串联质谱检测方法。饲料样品经0.2%甲酸甲醇提取液(10∶90)提取,MCX固相萃取柱净化后,采用液相色谱-串联质谱法检测,外标法定量。该方法在0.5~100 ng/mL范围内线性关系良好,方法最低检出限为0.01 mg/kg,定量限为0.05 mg/kg,7种α_2受体激动剂在不同饲料中呈现良好的回收率。该方法灵敏度高、选择性好,可作为饲料中α_2受体激动剂的确证方法。

分散固相萃取结合液相色谱串联质谱法检测牛可食性组织中吡喹酮残留量

目的建立分散固相萃取结合液相色谱串联质谱法检测牛肉、牛脂肪、牛肝和牛肾等可食性组织中的吡喹酮残留量的分析方法。方法取牛组织样品经50%(V:V)乙腈溶液提取,加入无水硫酸镁和氯化钠进行脱水和盐析,正己烷脱脂,高速离心分层后,取适量乙腈层溶液经0.1%(V:V)甲酸稀释后,用酸性氧化铝粉末进行样品净化并以10000 r/min离心取上清液,过0.22μm滤膜后上机测定。使用反相色谱柱进行分离,流动相为0.1%甲酸和乙腈溶液,采用梯度程序进行洗脱,三重四极杆质谱进行定性定量分析。结果吡喹酮在2.5~500μg/kg范围内线性关系良好(r>0.995),方法的最低检出限为1μg/kg,最低定量限为2.5μg/kg,添加回收率在60%~110%,相对标准偏差(relative standard deviation,RSD)<10%。结论该方法具有较好的准确度与精密度,适用于牛可食性组织中吡喹酮残留量的测定。

液相色谱法测定饲料中巴氯芬残留量的不确定度评估

本文采用液相色谱法对饲料中巴氯芬残留量的不确定度进行评估,根据《测量不确定度评定与表示》等有关规定,建立数学模型,对试样的称量、标准溶液的配制、样品浓缩、标准品和样品的峰面积以及样品回收率等影响因素进行了评定,并对测量结果的不确定度来源进行量化,计算合成不确定度,得出本次含量测定的扩展不确定度为0.099mg/kg。

超高效液相色谱-串联质谱法测定猪肉中巴氯芬的残留

目的建立超高效液相色谱-串联质谱法测定猪肉中巴氯芬残留量的方法。方法样品采用0.1 moL/L盐酸-甲醇溶液(20:80,V:V)提取,混合型强阳离子交换柱(MCX)净化,经C18反相色谱柱分离后,正离子扫描,多反应监测模式检测巴氯芬,基质标曲定量。结果该方法在1~500 ng/mL浓度范围内线性良好,r2=1,检出限为1μg/kg,定量限为5μg/kg,回收率为75.28%~77.86%,精密度RSD<10%。结论该方法灵敏度高、特异性强,适用于猪肉中巴氯芬残留量的分析。

分散固相萃取结合液相色谱串联质谱法检测牛可食性组织中泰地罗新残留量

建立了分散固相萃取结合液相色谱串联质谱法检测牛肉、牛脂肪、牛肝和牛肾等可食性组织中的泰地罗新残留量的方法。取牛组织样品经50%(V/V)乙腈溶液提取,加入无水硫酸镁和氯化钠进行脱水和盐析,正己烷脱脂,高速离心分层后,取适量乙腈层溶液经0.1%(V/V)甲酸稀释后,用酸性氧化铝粉末进行样品净化并以10000 r/min离心取上清液,过0.22μm滤膜后上机测定。使用反相色谱柱进行分离,流动相为0.1%甲酸和乙腈溶液,采用梯度程序进行洗脱,三重四级杆质谱进行定性定量分析。结果表明,方法的最低检测限为5μg/kg,最低定量限为10μg/kg,添加含量在10～1000μg/kg范围内线性关系良好(r>0.995),对应添加回收率为60%～110%,RSD<10%,表明该方法具有较好的准确度与精密度。

分散固相萃取结合UPLC-Orbitrap MS联用测定禽蛋中五氯苯酚残留量

建立了超高效液相色谱-静电轨道阱质谱联用测定禽蛋中五氯苯酚残留量的分析方法。取均质后的禽蛋样品经乙腈溶液提取,加入无水硫酸镁和氯化钠进行脱水和盐析,高速离心分层后,取适量乙腈层溶液经0.1%(V∶V)甲酸稀释后,用酸性氧化铝粉末进行样品净化并以10000 r/min离心取上清液,过0.22μm滤膜后上机测定。使用反相色谱柱进行分离,流动相为乙腈:0.1%甲酸=75∶25,采用等度程序进行洗脱,静电轨道阱质谱进行定性定量分析。结果表明,五氯苯酚在0.5~100μg/kg范围内线性关系良好(r>0.995),方法的最低检出限为0.2μg/kg,最低定量限为0.5μg/kg,添加回收率在74.43%~96.85%之间,批内批间变异系数CV%<10%。该方法具有较好的准确度与精密度,适用于禽蛋中五氯苯酚残留量的测定。

超高效液相色谱-静电轨道阱质谱同时筛查测定猪肉中21种磺胺类药物残留

建立了超高效液相色谱-静电轨道阱质谱法检测猪肉中21种磺胺类药物残留的检测方法。猪肉样品经90%乙腈水溶液提取,Oasis PRiME HLB固相萃取小柱净化,采用ZORBAX SB-C18 (3.0×100 mm,1.8 μm)色谱柱,0.1%的甲酸水溶液和0.1%甲酸-乙腈溶液作为流动相进行梯度洗脱。质谱采用正离子扫描,利用含有保留时间、母离子和子离子精确分子量等信息的数据库进行定性,以一级质谱全扫描母离子的峰面积进行定量分析。21种磺胺类药物在最优化条件下分离良好,2~200 ng/mL质量浓度范围内线性回归关系良好(线性相关系数r≥0.99)。21种磺胺类药物的平均回收率为63.5%~94.2%,相对标准偏差为3.8%~10.8%。本方法具有简便、快速、灵敏、准确等特点,适用于猪肉中的21种磺胺类药物残留的筛查测定。

上海地区猪肉中磺胺类药物的残留检测及风险评估

通过超高效液相色谱串联质谱法检测猪肉产品中磺胺类药物的残留水平,评估上海市猪肉产品中磺胺类药物的残留风险。结果显示,上海地区共260份猪肉产品中检出残留,检出率为5.38%,猪肉产品中最高磺胺类药物残留量为135μg/kg,超过国家规定的最大残留限量(100μg/kg)。食品安全指数IFS值为2.52×10^-3,远远低于1,表明上海市猪肉产品中磺胺类药物的残留对人们的健康不会造成危害效应。

超高效液相色谱-四级杆-静电场轨道肼高分辨质谱同时快速筛查与确证猪粪中33种磺胺类及四环素类药物

建立了超高效液相色谱-四级杆-静电场轨道肼高分辨质谱(UPLC-Q-Exactive Orbi-trap)同时快速筛查与确证猪粪中共33种磺胺类及四环素类药物的分析方法和目标化合物的质谱数据库.猪粪样品经Na2 EDTA-Mcllvaine缓冲液及乙腈提取,利用通过式固相萃取柱PRiME H LB净化后上机检测.结果表明,33种目标药物添加浓度在50μg/kg检出限浓度时可全部检出,回收率集中在61.7%~118.4%.该方法高效、灵敏、准确,将粪便作为活体检材,减少了对活体动物的破坏性,同时适用于猪粪中多种抗生素的快速定性确证,有利于掌握养殖业用药情况.

响应面法优化豆腐柴叶豆腐渗出液的研究

为了减少豆腐柴叶豆腐贮藏过程中的渗出液量,在凝固过程中添加碳酸钙、黄原胶和卡拉胶,研究3者对豆腐柴叶豆腐渗出液的影响。通过Box-Behnken响应曲面法优化出减少豆腐柴叶豆腐渗出液的最佳工艺条件,并与传统工艺(仅添加碳酸钙)进行了比较。结果表明,最佳工艺条件为碳酸钙含量0.04 g/100 mL、黄原胶含量0.13g/100 mL、卡拉胶含量0.11 g/100 mL。响应面验证试验豆腐柴叶豆腐在20℃下24 h的渗出液为32 mL,实测值与模型预测值的相对误差在2.2%,验证了模型的可靠性。优化后的渗出液较传统工艺生产的豆腐柴叶豆腐渗出液减少了47%。研究结果为豆腐柴叶豆腐工业化生产提供参考。