在体微透析检测豚鼠胆红素脑病模型脑组织兴奋性氨基酸神经递质

目的 探讨胆红素脑病动物模型制作及其脑组织中兴奋性氨基酸 (EAA)神经递质变化。方法 豚鼠腹腔内给予胆红素 2 0 0 μg/g后 8h ,电镜观察脑组织形态结构 ,在体脑内微透析提取神经突触间细胞外液 ,HPLC检测分析天冬氨酸 (Asp) ,谷氨酸 (Glu)和甘氨酸 (Gly)。结果 胆红素毒性脑组织神经元及其线粒体肿胀 ,细胞外Gly含量为2 1 .35± 4.87μM ,明显高于对照组1 4 .0 2± 1 .5 6 μM (P <0 .0 1 ) ;胆红素毒性脑组织细胞外Asp ,Glu与对照组比较差异不显著 (P >0 .0 5 )。结论 胆红素毒性脑组织细胞外甘氨酸 (Gly)含量增加 ,可提高NMDA受体对EAA神经递质Asp及Glu敏感性 ,致NMDA受体过度活化。

胆红素脑病NMDA受体的过度活化机制

目的探讨N -甲基 -D -天冬氨酸 (NMDA)受体水平胆红素脑病发生机制与防治措施。 方法制作胆红素脑病动物模型基础上 ,在体脑内微透析提取兴奋性氨基酸 (EAA)神经递质 ,HPLC检测天冬氨酸 (Asp)、谷氨酸 (Glu)、甘氨酸 (Gly) ,并给予模型动物NMDA受体拮抗剂GAPA干预 ,电镜检测脑组织超微结构 ,荧光检测脑组织ATP与细胞内Ca2 + 含量。 结果胆红素毒性脑组织ATP含量显著降低 ,细胞外Gly与细胞内Ca2 + 显著升高 ;GAPA不影响胆红素毒性脑组织ATP含量 ,但可显著降低细胞内Ca2 + ,减轻胆红素毒性脑水肿。 结论NMDA受体过度活化致细胞内Ca2 + 超载参与介导胆红素神经毒性 ,NMDA受体拮抗剂可望成为胆红素神经毒性防治的重要途径。

配方奶添加长链多聚不饱和脂肪酸对足月儿生长发育的影响

【目的】 拟探讨配方乳添加等量AA与DHA对中国部分地区足月婴儿生长发育的影响。 【方法】 2 71名足月健康新生儿 ,随机分配进入添加AA +DHA配方喂养组 (frisolacadvanced ,FA组 )、未添加AA +DHA配方喂养组 (frisolacH ,FH组 ) ,并选择 2 6名纯母乳喂养儿 (fullybreastfeding ,BF组 )为对照组。所有参与的婴儿在满 3和6个月时邀请入院检测体重、身长、头围、智能发育指数 (MDI) ,运动发育指数 (PDI) ,并采集外周静脉血检测血浆长链多聚不饱和脂肪酸 (LCPUFA)与血红蛋白。 【结果】 尽管两种配方喂养婴儿血清LCPUFA含量差异有显著性 ,但两组配方喂养婴儿在满 3和 6个月时体重、身长、头围、MDI、PDI差异无显著性。然而 ,本研究显示纯母乳喂养婴儿在 6个月时体重和身长低于混合喂养婴儿 (BF组 +FA组 ) ,且BF组婴儿在 6个月时血浆AA、DHA及与血红蛋白低于BF +FA组婴儿。 【结论】 尽管添加AA∶DHA =1∶1的配方可以显著地增加婴儿血浆AA和DHA水平 ,但并不表明对现有的标准婴儿配方乳添加AA +DHA可促进婴儿生长发育。

新生儿脐血瘦素水平及其相关因素的探讨

【目的】 探讨脐血瘦素水平与胎儿宫内生长发育相关性。 【方法】 采用放免检测新生儿脐血瘦素水平 ,采用Ponderal指数〔PI=10 0×体重 (g) /身长 (cm) 3 〕估测新生儿营养状态 ,采用weststrate公式〔F % =0 .8848×SFT4+0 .0 2 2〕估测新生儿体脂含量。 【结果】 3 7例适于胎龄儿 (AGA)脐血瘦素水平为 ( 10 .5 7± 3 .0 3 ) μg/L ,不同性别AGA脐血瘦素水平无显著差异 (P >0 .0 5 )。 13例大于胎龄儿 (LGA)脐血瘦素水平为 ( 13 .15± 3 .5 1) μg/L ,显著高于AGA(P =0 .0 14 ) ;15例小于胎龄儿 (SGA)脐血瘦素水平为 ( 8.0 5± 2 .69) μg/L ,显著低于AGA(P =0 .0 0 72 )。脐血瘦素水平与新生儿出生体重 (BW )相关系数r=0 .65 (P <0 .0 1) ,与新生儿体脂含量 (F % )相关系数r =0 .2 8(P <0 .0 5 ) ,与新生儿Ponderal指数 (PI)相关系数r =0 .62 (P <0 .0 1)。 【结论】 脐血瘦素水平是胎儿宫内生长发育状态的敏感指标 ,脐血瘦素可能是胎儿宫内生长发育的调节因子。

胆红素诱导原代培养神经细胞内Ca^(2+)含量的变化及MgSO_4的拮抗作用

目的 探讨胆红素诱导原代培养神经细胞内Ca2 + 含量的变化 ,以及MgSO4 的拮抗作用。方法 采用胎鼠大脑皮层细胞作原代神经细胞培养 ,观察 10 0 μmol/L胆红素对不同成熟程度神经细胞内Ca2 + 含量的影响。原代培养神经细胞经Fura- 2 /AM负载 ,荧光图像分析测定细胞内Ca2 + 含量。结果 未成熟神经细胞 (培养2天 )暴露于 10 0 μmol/L胆红素 4h ,细胞内Ca2 + 从 75 .3nmol增加到 32 0 .8nmol;继续暴露 4h ,细胞内Ca2 + 增加到 40 0 .7nmol;去除胆红素暴露 ,细胞内Ca2 + 不能逆转。成熟神经细胞 (培养 8天 )暴露于 10 0 μmol/L胆红素 4h ,细胞内Ca2 + 从 70 .6nmol增加到 15 0 .8nmol;继续暴露 4h ,细胞内Ca2 + 不再增加 ;去除胆红素暴露 ,细胞内Ca2 + 浓度可显著降低。培养液中Mg2 + 加至 2mmol/L可减轻胆红素诱导的神经细胞内Ca2 + 含量变化。结论 胆红素可诱导原代培养的、未成熟的神经细胞Ca2 + 超载 ,MgSO4 可拮抗胆红素诱导的神经细胞Ca2 + 超载。

IGF轴与胎儿生长调节

胰岛素样生长因子 (IGFs)及其受体、结合蛋白、结合蛋白酶构成IGF轴 ,在胎儿生长调节中起关键作用 ;IGF转基因动物生长加速 ,IGF基因敲除动物宫内生长迟缓 ;宫内生长发育迟缓小样儿IGF轴异常 ,重组IGF Ⅰ对其有治疗作用。

胆红素脑病的危险参数

至今为止，对于新生儿高胆红素血症何时开始治疗仍无明确共识。由于胆红素脑病发生与新生儿状态，血浆胆红素水平；胆红素结合状态，自由胆红素水平；血脑屏障功能状态和脑内胆红素水平等多种因素相关，并可引起脑细胞功能状态与能量代谢水平变化。因而，通过监测上述各因素，可以估价高胆红素血症新生凡是否处于危险状态，为新生儿黄疸治疗提供依据。

胆红素脑病模型豚鼠EAA神经递质的检测

目的 探讨胆红素神经毒性脑组织兴奋性氨基酸（ＥＡＡ） 神经递质变化。方法 制作胆红素脑病动物模型基础上在体脑内微透析，提取神经突触间细胞外液，ＨＰＬＣ 检测分析天门冬氨酸（Ａｓｐ）、谷氨酸（Ｇｌｕ） 、甘氨酸（Ｇｌｙ） 。结果 胆红素毒性脑组织细胞外Ｇｌｙ 较对照组明显升高，而Ａｓｐ 、Ｇｌｕ 与对照组差异不显著。结论 胆红素神经毒性ＮＭＤＡ受体活性变化机制涉及Ｇｌｙ 细胞外堆积，提高ＮＭＤＡ受体对ＮＡＡ 神经递质Ａｓｐ、Ｇｌｕ敏感性。

胆红素脑病发生机制(综述)

胆红素脑病是新生儿黄疸最严重并发症,是感觉障碍、运动失调、智力低下的重要原因。正确认识胆红素脑病发生机制将有助于新生儿黄疸合理防治,防止胆红素脑病及其后遗症发生。近年来,随着分子细胞化学技术发展,对其发生机制有了进一步认识,本文拟对此加以综述。

NMDA受体拮抗剂治疗胆红素脑病的实验研究

新生儿高胆红素血症是新生儿临床常见病症,并发胆红素脑病可致新生儿死亡、幸存者常留下神经系统后遗症,合理科学防治胆红素脑病对于优生优育有重要价值。为探讨NMDA受体拮抗剂对其治疗作用,我们在成功制作胆红素脑病动物模型基础上进行了初步研究。 一、材料与方法 1.实验动物:生后5～7天豚鼠30只,重40～50克,雌雄不拘。

肥胖发生与防治热点:肥胖基因蛋白Leptin

leptin是肥胖基因蛋白，因其在机体饮食行为、能量代谢、脂肪组织的合成与分解代谢中起重要调节作用，而成为肥胖发生与防治研究的热点。本文就 leptin基因定位与结构、 leptin表达与调控、 leptin蛋白与受体、 leptin生物学效应与功能作一综述，并重点介绍 leptin在肥胖发生与防治中作用。

NMDA受体拮抗剂GAPA治疗实验性胆红素脑病的机制研究

目的 探讨NMDA受体拮抗剂GAPA对胆红素脑病治疗作用及其机制。方法 制作胆红素脑病动物模型基础上，在体脑内微透析提取兴奋性氨基酸(EAA)神经递质，HPLC检测天冬氨酸(Asp)、谷氨酸(Glu)、甘氨酸(Gly)，并给予模型动物NMDA受体拮抗剂GAPA干预，电镜检测脑组织超微结构，荧光检测脑组织ATP含量与细胞内Ca^2+。结果 胆红素毒性脑组织ATP含量显著降低，细胞外Gly与细胞内Ca^2+显著增高；GAPA不影响胆红素毒性脑组织ATP含量，但可显著降低细胞内Ca^2+，减轻胆红素毒性脑水肿。结论 NMDA受体过度活化致细胞内Ca^2+超载参与介导胆红素神经毒性，NMDA受体拮抗剂可望成为胆红素神经毒性防治的重要途径。

单唾液酸四己糖神经节苷脂早期治疗中重度缺氧缺血性脑病新生儿的疗效

目的观察单唾液酸四己糖神经节苷脂(GM1)治疗中重度缺氧缺血性脑病(HIE)新生儿的疗效。方法中重度HIE新生儿86例随机分为2组:常规治疗组(对照组)42例;GM1干预组44例。二组患儿均予常规治疗。干预组在常规治疗的基础上早期(生后6h内)应用GM1(20mg)静脉滴注治疗。1次/d,10～14d为1个疗程。治疗前治疗1个疗程和28d检查2组头颅CT、行为神经评分(NBNA),12个月时采用首都儿科研究所儿心量表(CDCC)评定智力/运动发育指数。采用StatisticView5.0软件进行t检验和χ2检验。结果GM1干预组头颅CT影像学脑结构的恢复及NBNA评分均明显优于对照组(Pa<0.05),MDI、PDI等各项指标与对照组比较均有明显改善(P<0.01)。结论早期应用GM1治疗中重度HIE有明显疗效。

非营养性吸吮联合音乐治疗对新生儿疼痛的缓解作用

目的观察非营养性吸吮(NNS)、音乐治疗(MT)及非营养性吸吮联合音乐治疗(NNS+MT)在缓解新生儿疼痛中的作用。方法收集2008年1～6月在南京医科大学附属南京儿童医院新生儿医学中心普通新生儿病房收治的新生儿作为研究对象,对符合纳入和排除标准的新生儿按照住院号从小到大顺序分为干预组(NNS亚组、MT亚组、NNS+MT亚组)和空白对照组,干预措施在新生儿足后跟采血前2min开始持续至研究结束,共15min,空白对照组不予干预措施。通过观察新生儿的心率、经皮氧饱和度(SpO2)及新生儿疼痛行为(NIPS)评分,采集采血针刺前1min、针刺时和针刺后13min过程中的每一分种数据,比较各种干预措施缓解新生儿疼痛的临床效果。采用SPSS11.0软件进行多变量方差分析,ANOVA方差检验,同时应用PostHoc进行组间比较。结果纳入住院新生儿80例,男54例,女26例;各亚组和空白对照组各20例。疼痛刺激后各组的心率均显著加快,于刺激后0～2min达峰值,之后逐渐减慢;NNS亚组与空白对照组心率差异无统计学意义,MT、NNS+MT亚组与空白对照组心率差异均有统计学意义,MT亚组和NNS+MT亚组心率差异无统计学意义。疼痛刺激后各亚组SpO2均显著降低,于刺激后2～4min降至最低值,之后逐渐升高;NNS亚组与对照组SpO2差异无统计学意义,MT、NNS+MT亚组与空白对照组SpO2差异均有统计学意义,MT亚组和NNS+MT亚组SpO2差异无统计学意义。疼痛刺激后各组NIPS评分均显著提高,于0～1min达峰值,之后逐渐降低,各亚组NIPS评分差异均无统计学意义。与空白对照组比较,MT、NNS+MT干预措施均可缓解疼痛刺激引起的心率、SpO2和NIPS评分变化。结论新生儿临床医护人员可通过使用MT和NNS+MT可缓解新生儿疼痛。

56例小婴儿自发性颅内出血临床治疗及疗效分析

为探寻小婴儿自发性颅内出血最佳治疗方法,我们对56例小婴儿自发性颅内出血先予补充维生素K_1,输新鲜血,配合使用甘露醇、激素、止痉药等综合治疗;在此基础上予外科手术治疗,清除硬脑膜下积血,置管冲洗蛛网膜下腔出血,并在术后常规预防性抗癫痫治疗。术后随访显示满意疗效。文中分析此年龄段自发性颅内出血的原因、内科综合治疗的作用与外科手术治疗必要性,对不同类型颅内血肿的特点、相应的手术方法、影响手术疗效的因素进行讨论。

乳铁蛋白治疗反复呼吸道感染患儿的疗效

目的探讨乳铁蛋白对反复呼吸道感染（RRI）患儿免疫功能的影响。方法RRI患儿98例随机分为2组。对照组48例予常规治疗;观察组50例在常规治疗基础上予乳铁蛋白治疗2～3个月。治疗前后分别测定患儿T细胞亚群、免疫球蛋白及补体等指标,观察其变化情况。结果2组总有效率分别为86%和22.9%,差异有非常显著性（P〈0.005）。治疗后观察组免疫学指标CD3、CD4、CD4/CD8、IgG、IgA及IgM均明显升高（Pa〈0.01,0.05）,CD8较治疗前明显降低（P〈0.05）。结论乳铁蛋白能增强RRI患儿的免疫功能。

高胆红素血症新生儿F-VEP变化及其与BAEP、DDST相关性

在测定30例正常新生儿闪光视觉诱发电位(F-VEP)基础上,测定37例高胆红素血症新生儿F-VEP,并对其中部分患儿进行同期BAEP测定与远期DDSP随访。结果显示:日龄1～7天早期新生儿因溶血、感染(尤其是细菌感染败血症)所致高胆红素血症F-VEP变化显著,F-VEP与BAEP、DDST异常一致率分别为65％、21％。本文结果提示:早期新生儿因溶血、感染所致高胆红素血症神经毒性敏感性在视觉神经类同于听觉神经,应及早干预、并注意远期随访。

非黏附骨髓间充质干细胞的体外培养与鉴定

目的探讨小鼠骨髓中是否存在非黏附间充质干细胞(BM-NA-MSC),体外能否形成成纤维细胞集落形成单位(CFU-F),能否在适当的条件下分化为脂肪细胞、软骨细胞和成骨细胞。方法分离小鼠总骨髓细胞,体外培养,每天转移未贴壁的非黏附骨髓细胞(NA-BMC)到新培养环境中继续培养,每组细胞长满12 d后,亚甲基蓝染色显示形成的克隆,计数克隆个数;在总骨髓细胞培养到第4天时收集未贴壁的NA-BMC到新的培养皿中,待细胞贴壁生长达融合后传代纯化,取第5代细胞接种于向脂肪细胞、软骨细胞和成骨细胞诱导分化的培养液中,2周后分别进行油红染色、抗Ⅱ型胶原的免疫组织化学染色及茜素红染色检测脂肪滴、Ⅱ型胶原和钙化结节的形成和表达。结果小鼠骨髓细胞体外培养条件下不仅总骨髓细胞可以形成CFU-F,而且反复转移的NA-BMC也能不断形成CFU-F;给予适当的诱导条件,非黏附来源的骨髓细胞体外能够分化为产生油滴的脂肪细胞、表达Ⅱ型胶原的软骨和具有钙化能力的成骨细胞。结论小鼠骨髓中存在一类NA-MSC,体外可以形成CFU-F,还可分化为脂肪、软骨和成骨细胞,表现出一定的多分化潜能,为下一步作为种子细胞用于移植实验的研究提供了前提。