古籍的当代价值及发展策略——以辽宁省为例

通过指出辽宁古籍资源丰富、历史悠久,深深镌刻着区域的历史文化发展脉络,是辽宁文化资源重要存量,进而说明为了更好地挖掘文化发展潜力,使之服务于区域各项事业的发展,应充分研究辽宁古籍资源的历史积淀、文化内涵、价值延伸,制定辽宁古籍传承与发展策略,使之融入区域社会发展的整体框架体系。

天然高分子及其衍生物对纸质文物耐久性影响的研究

以生宣纸和7种国画颜料制备的字迹材料为研究对象,对其耐酸碱性、耐氧化性、耐干热老化、耐紫外老化等性能进行系统实验,以探讨壳聚糖(CTS)、海藻酸钠(SA)及羟乙基纤维素(HEC)制得的3种加固剂涂布对纸质文物的保护作用。结果表明,涂布3种加固剂对纸张和颜料的老化均起到一定的延缓作用,以质量分数0.9%的HEC与质量分数0.5%的明胶制得的复配液,具有最显著的固色效果,经过干热老化与紫外老化后,相比未涂布加固剂的字迹材料,此复配液涂布后的字迹材料的色差显著降低,同时可使酸化纸张pH值达7.55,更利于纸质文物的长期保存。

蛹虫草富硒条件优化及硒对其中主要活性成分的影响

选择对蛹虫草富硒影响较大的四个因素:培养基、装液量、培养时间和硒浓度进行四因素三水平的正交试验,以优化蛹虫草菌丝体的培养条件和富硒条件,并采用ICP-MS方法测定蛹虫草菌丝体中的硒含量。结果表明:对菌丝体生物量影响较大的因素分别为培养时间>硒浓度>培养基种类>装液量,对富硒率影响较大的因素依次为:硒浓度>培养基种类>培养时间>装液量。最佳富硒条件为:硒浓度10μg/ml、合成培养基、培养6d和3/5装液量;在最优化富硒培养条件下,菌丝体中两种主要药用活性成分:虫草多糖和虫草素,其含量分别为226.3mg/g和2.22mg/g,是非富硒菌丝体中的3.4倍和5.8倍,能大幅提高蛹虫草的药用价值,为富硒可促进虫草多糖和虫草素等活性成分增加的机理研究提供一定的理论依据。

虫草多糖苹果果醋的保健功能评价

目的:虫草多糖与果醋均具有对人体有益的功效,该实验将两者结合,并通过小鼠连续灌胃体内实验,考察虫草多糖果醋抗疲劳、增加免疫力、降血脂和降血糖等方面的功效。方法:首先从蛹虫草子实体中提取虫草多糖。然后以苹果为原料经过酒精发酵和醋酸发酵制备苹果果醋原液,经调配制备苹果果醋。按实验设计添加不同剂量的虫草多糖制备虫草多糖果醋。对成年小鼠进行不同剂量的虫草多糖果醋灌胃后,通过小鼠的负重游泳时间、肝糖原含量和游泳后血乳酸含量测定等判定虫草多糖果醋提高小鼠抗疲劳能力的效果。通过抑制迟发型变态反应和增强碳廓清能力测定判定虫草多糖果醋提高小鼠免疫能力的效果。对成年小鼠在饲喂高脂饲料的同时进行不同剂量的虫草多糖果醋灌胃后,通过血清总胆固醇和甘油三酯水平测定判定虫草多糖果醋对高血脂的预防效果。对成年小鼠高血糖模型进行不同剂量的虫草多糖果醋灌胃后,通过测定血糖值判定虫草多糖果醋的降血糖效果。结果:通过抗疲劳实验研究发现,虫草多糖果醋组与空白对照组相比小鼠的负重游泳时间显著提高,肝糖原含量显著升高,游泳后血乳酸含量显著降低。通过增强免疫力实验研究发现,虫草多糖果醋组与空白对照组相比,耳肿胀度明显下降,廓清指数和吞噬指数显著提高。通过辅助降血脂实验发现,虫草多糖果醋组与饲喂高脂饲料的空白对照组相比,血清总胆固醇和甘油三酯水平显著降低,小鼠体质量显著低于空白对照。通过辅助降血糖实验发现,虫草多糖果醋组与空白对照组相比,血糖水平显著降低。并且各种生物活性实验结果均与虫草多糖果醋中虫草多糖的剂量成正比。虫草多糖果醋的功效要好于虫草多糖和果醋单独使用的功效。结论:虫草多糖果醋具有缓解体力疲劳、增强免疫力、辅助降血脂和辅助降血糖的保健功能。

蛹虫草菌丝体发酵培养过程中氨基酸添加技术研究

组氨酸、精氨酸、赖氨酸是对蛹虫草生长影响较大的3种碱性氨基酸,本实验研究在蛹虫草液体发酵过程中添加上述氨基酸的不同条件对蛹虫草菌丝体生物量和其中主要抗癌功能成分虫草素的影响。首先进行添加氨基酸种类、氨基酸的添加量、初始pH值、培养温度对蛹虫草菌丝体生物量和虫草素含量的单因素试验,在此基础上进行四因素三水平的正交试验。结果表明:对蛹虫草菌丝体生物量影响从大到小的顺序依次是:氨基酸种类>培养温度>初始pH值>氨基酸添加量。增加蛹虫草菌丝体生物量的最佳培养条件为:添加氨基酸种类为精氨酸,培养温度为26℃,培养初始pH值为6,100mLPDA发酵培养液添加精氨酸0.3g。对蛹虫草菌丝体中虫草素含量影响从大到小的顺序依次是:氨基酸种类>初始pH值>培养温度>氨基酸添加量。增加菌丝体中虫草素含量的最佳培养条件是添加氨基酸种类为精氨酸,培养温度为24℃,100mLPDA发酵培养液添加0.3g,培养的初始pH值为6。

肿瘤特异性凋亡基因诱导人淋巴瘤细胞凋亡的机制

目的:研究肿瘤特异性凋亡基因(apoptingene)在诱导人淋巴瘤细胞U937凋亡时,cJun氨基末端激酶(JNK)信号通路的作用。方法:用含有apoptin基因的真核表达载体,瞬时转染体外培养的人淋巴瘤细胞U937。采用流式细胞仪、Westernblot、台盼蓝染色及RTPCR等研究其在不同时间条件下诱导U937细胞凋亡的作用。结果:Apopin基因瞬时转染U937细胞48h,可出现明显的凋亡;而且凋亡细胞的数量与apoptin基因的转染时间有关。诱导后24h,U937细胞中出现磷酸化的JNK蛋白的表达,诱导后48h达高峰;而非磷酸化的JNK蛋白表达无明显变化。结论:Apoptin基因具有诱导U937细胞凋亡的作用。JNK信号通路的激活,可能在apoptin基因诱导肿瘤细胞凋亡过程中发挥着重要作用。

肿瘤特异性凋亡基因对人淋巴瘤细胞诱导作用

目的观察肿瘤特异性凋亡基因(Apoptingene)对人淋巴瘤细胞U937的凋亡诱导作用。方法用含有肿瘤特异性凋亡(Apoptin)基因的真核表达载体瞬间转染体外培养的人淋巴瘤细胞U937;采用台盼蓝染色法、RTPCR及DNA凝胶电泳等方法研究其在不同时间条件下对人淋巴瘤细胞U937诱导凋亡的作用。结果Apopin基因瞬间转染的人淋巴瘤细胞U937可出现明显的细胞凋亡;而且凋亡细胞的数量与Apoptin的转染时间有关。结论Apoptin基因具有诱导人淋巴瘤细胞U937凋亡的作用。

重组人IL-18对辐射损伤后小鼠免疫功能的调节作用

目的:探讨重组人IL-18(IL-18)对辐射损伤后小鼠免疫功能的影响。方法:对32只小鼠分4组进行辐射损伤,然后分别用淋巴细胞转化实验、NK细胞细胞毒实验、T淋巴细胞亚群测定和血清中IgG测定方法观察IL-18对其免疫功能的调节作用。结果:重组人IL-18能够提高辐射损伤后小鼠的T、B淋巴细胞转化能力,增强NK细胞对肿瘤细胞的杀伤能力,上调CD4+T细胞的数量,但对IgG产生能力没有调节作用。结论:重组人IL-18对辐射后小鼠免疫功能损伤有促进恢复的作用。

bFGF对NIH3T3细胞TPK,PKC,ERK活性的影响

目的 :观察碱性成纤维细胞生长因子 (bFGF)对NIH3T3细胞酪氨酸蛋白激酶 (TPK)、蛋白激酶C(PKC)及胞外调节蛋白激酶 (ERK)活性的影响 ,探讨其信号转导机制。方法 :分别加入bFGF及PKC抑制剂H 7、MEK1抑制剂PD980 5 9孵育细胞 ,利用 [γ 3 2 P]ATP掺入外源性底物的方法测定活性。结果 :bFGF可使细胞膜TPK、细胞质PKC及ERK活性明显升高。H 7+bFGF、PD980 5 9+bFGF组与只加bFGF组比较TPK活性保持不变 ,而PKC及ERK活性均下降。结论 :TPK、PKC、ERK介导bFGF的信号转导。ERK与PKC是TPK受体下游的两个分支 。

微波法与超声破碎法提取蛹虫草菌丝体中虫草素的比较研究

分别就微波法和超声破碎法用于蛹虫草菌丝体中虫草素提取时应采取的工艺条件进行研究。采用单因素分析和正交设计试验分别研究提取溶剂、提取液pH值、微波和超声波的功率、提取时间对虫草素提取得率的影响。正交试验结果表明,微波提取法要好于超声波提取法。当以提取溶剂为水-乙醇(1:3,V/V)、pH7.0、微波功率500W,并提取3min的条件进行微波提取时,虫草素的提取得率最高。

ICP-MS等三种测定蛹虫草硒含量方法的比较

采用微波消解法对试验样本进行消解,分别通过ICP-MS法、HPLC/荧光法和3,3-二氨基联苯胺比色法三种方法测定了富硒蛹虫草菌丝体中硒的含量,对上述几种硒含量测定方法的工作条件、检出限和精确度进行了对比研究。实验结果表明:ICP-MS法、HPLC/荧光法和3,3-二氨基联苯胺比色法的检出限分别为0.260 7,0.182 1和10.485 9μg.L-1,ICP-MS法的检出限最低,3,3-二氨基联苯胺比色法的检出限最高。在精密度方面,对同一样品以ICP-MS法测硒的标准差为最低,以3,3-二氨基联苯胺比色法测硒为最高。建议当分析样品中硒含量很低时,可选用HPLC/荧光法和ICP-MS法,如分析样品含硒量相对较大,可采用3,3-二氨基联苯胺比色法。

不同种类氨基酸对蛹虫草菌丝体生长和虫草素含量的影响

在蛹虫草液体摇瓶培养过程中分别添加20种不同的氨基酸,添加量为0.2g/100mL,以研究其对蛹虫草菌丝体生长和虫草素含量的影响。结果表明:在20种氨基酸中,16种氨基酸能显著促进蛹虫草菌丝体的生长。其中列前5位的依次为3种碱性氨基酸:精氨酸、赖氨酸和组氨酸,两种酸性氨基酸:谷氨酸和天冬氨酸。这5种氨基酸分别使菌丝体生长量增加了1.10、0.82、0.63、0.48、0.40倍。且每一种氨基酸添加后都能使菌丝体中虫草素含量显著增加。其中两种碱性氨基酸中的精氨酸和组氨酸添加后菌丝体中的虫草素含量分别增加了1.91和1.90倍,极性氨基酸中的苏氨酸和天冬酰胺添加后虫草素含量分别增加了1.43和1.42倍,非极性氨基酸中的丙氨酸添加后虫草素含量增加了1.05倍。

香菇多糖口服液缓解小鼠体力疲劳的功能检测

目的:检测香菇多糖口服液是否有缓解小鼠体力疲劳的功能.方法:通过热水抽提、乙醇沉淀等方法制备香菇多糖,用18%橙汁、4%砂糖、0.2%柠檬酸、0.15%稳定剂CMC溶剂配制不同计量口服液,给小鼠灌胃,对照组为生理盐水.30 d后比较各组小鼠体质量、负重游泳时间、血清尿素氮、血乳酸浓度及肝糖原水平的变化.结果:与对照组相比,2.25 g/kgBW剂量组香菇多糖口服液能显著延长小鼠的负重游泳时间(P<0.01),增加肝糖原的储备量(P<0.01),降低血乳酸水平(P<0.01),降低运动后血清尿素氮的增量(P<0.05),1.13 g/kg BW剂量组香菇多糖口服液能延长小鼠的负重游泳时间(P<0.05),降低血乳酸水平(P<0.05),降低运动后血尿素氮的增量(P<0.05).结论:香菇多糖口服液具有抗疲劳生理活性.

TAT-Apoptin融合蛋白分泌表达载体的构建及其活性检测

目的构建具有自主跨膜能力的Apoptin融合蛋白表达载体,使其分泌表达,避开包涵体复性,简化制备工艺。方法人工合成反式激活蛋白(TAT)序列,与Apoptin序列融合,连接到pET22b+载体上,构建原核分泌表达载体pET22b+-TAT-Apoptin,IPTG诱导目的蛋白分泌表达到大肠杆菌周质空间,提取蛋白行SDS-PAGE分析,MTT法检测分泌表达的融合蛋白对胃癌823细胞的抑制作用。结果重组TAT-Apoptin蛋白可分泌至大肠杆菌周质空间中,以可溶状态存在,对胃癌823细胞的最大抑制率为83.95%。结论成功构建重组TAT-Apoptin蛋白表达载体,分泌表达的可溶性融合蛋白具有生物活性。

虫草素抑制脂多糖诱导的小胶质细胞活化及神经保护作用

目的:研究虫草素抑制脂多糖（Clipopolysaccharides,LPS）诱导小胶质细胞激活及其神经保护作用。方法:培养原代小鼠小胶质细胞,以LPS激活小胶质细胞使NO大量释放,同时给予不同浓度的虫草素（0.110μmol/L）处理,四甲基偶氮唑蓝（3-（4,5-dimethyl-2-thiazolyl）-2,5-Biphenyl-2-H-tetrazolium bromide,MTT）法检测细胞存活率,Griess法测定小胶质细胞NO释放,逆转录聚合酶链式反应法检测细胞内诱导型一氧化氮合酶（inducible nitric oxide synthase,i NOS）的mRNA表达。以硝普钠作为NO供体,以1,1-二苯基苦基苯肼（1,1-Biphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH）自由基作为自由基的供体,分别考察虫草素对NO和DPP日自由基的直接清除作用。分别以H2O2和以LPs激活的小胶质细胞条件培养液损伤小鼠PC12神经元细胞,MTT法考察虫草素对PC12细胞损伤的保护作用。此外,以羟胺法测定超氧化物歧化酶（superoxide dismutase,SOD）活性。结果:虫草素能够显著抑制LPS激活的原代小鼠小胶质细胞NO产生及iN05 mRNA表达,同时不影响细胞的存活率;虫草素具有显著的NO清除和DPPH自由基清除作用;虫草素本身对PC12小鼠神经元细胞的生长没有显著影响,但能够显著抑制H2O2或活化小胶质细胞的条件培养液引起的PC12细胞损伤。此外,虫草素可显著提高H2O2损伤的PC12细胞中SOD活性。结论:虫草素可通过抑制iNOS转录和直接清除NO而抑制LPS激活小胶质细胞的NO产生;虫草素还可通过抑制小胶质细胞激活而对PC12神经元细胞产生保护作用,也可通过提高SOD活性而保护H2O2损伤的PC12细胞。因此,虫草素可能对与小胶质细胞激活相关的神经退行性疾病具有潜在的防治作用。

高同型半胱氨酸血症与相关疾病关系及治疗进展

高同型半胱氨酸血症是一种常见的代谢障碍疾病,与心血管疾病、阿尔兹海默症和2型糖尿病并发症等疾病密切关系.近年来对Hcy与相关疾病关系和其预防和治疗的研究成为新的研究热点,就Hcy的致病机理、与相关疾病关系及其预防与治疗做一综述.

蛹虫草发酵罐培养生产虫草多糖和虫草素条件的研究

采用摇瓶培养法通过单因素试验和正交设计试验初步拟定蛹虫草的发酵罐培养条件.基本上罐条件为初始pH6.5,温度21℃,转速150rpm,培养时间5d.在此基础上分别以菌量、多糖和虫草素为指标,调整通气量和装液量.当以获得菌量和多糖为目的时,通气量为0.9m3/h、装液量70%.若以得到虫草素为目的,通气量调整为0.7m3/h、装液量70%.

晚清书画裱件一株霉菌的鉴定及培养条件优化

对晚清书画裱件菌斑菌株复苏分离鉴定及培养条件优化.以改良马铃薯葡萄糖琼脂培养基、萨氏培养基和查氏培养基作为复苏培养基.采用三点植入法和插片法对菌株形态学观察,通过PCR扩增、测序、构建系统发育树对菌株进行分子生物学鉴定.结果成功复苏一株霉菌,菌株鉴定为篮状菌属,最佳培养条件为改良后PDA培养基,培养温度30℃,pH 6.0,震荡频率130 r/min.

香菇提取物口服液的制备及对大鼠肝损伤保护作用的检测

目的:制备香菇提取物口服液,探讨其对四氯化碳(CC l4)所致大鼠急性化学性肝损伤的保护作用.方法:通过热水抽提、乙醇沉淀等方法制备香菇提取物,用18%橙汁、4%砂糖、0.2%柠檬酸、0.15%稳定剂CMC溶剂配制不同计量口服液.采用四氯化碳制备大鼠急性化学性肝损伤模型,测定香菇提取物口服液对血清谷丙转氨酶(ALT)和谷草转氨酶(AST)活性及病理组织学的影响.结果:香菇提取物口服液能明显降低四氯化碳急性肝损伤大鼠血清ALT、AST活性;2.25 g/kgBW、1.13 g/kgBW实验组能减少肝损伤模型大鼠胞浆的凝聚平均分,0.38 g/kgBW实验组能减少肝损伤模型大鼠肝细胞坏死平均分,各实验组均能减少各种肝细胞病变类型病理组织学改变加权平均分.结论:香菇提取物口服液对四氯化碳所致大鼠急性化学性肝损伤有保护作用.