不同国家松材线虫体表携带优势细菌种类及其毒性

收集了来源于美国、日本和中国的松材线虫虫株,分离了各虫株体表携带的细菌,确定了优势菌并进行鉴定,并用细菌培养的无细胞滤液对无菌黑松和马尾松切根苗进行了生物测定,以了解各细菌菌株对松苗的毒性。结果表明:所有虫株均携带明显的优势菌。经Biolog细菌自动鉴定系统和16S rDNA序列分析鉴定表明,美国线虫虫株上分离的优势细菌为成团泛菌(Pantoea agglom erans);中国浙江虫株优势细菌为Pantoea toletana;日本虫株优势菌为荧光假单胞菌(Pseudomonas fluorescens);中国溧水虫株分离的菌株与另一个日本菌株为同一种,都为阴沟肠杆菌(Enterobacter cloacae);中国拟松材线虫上分离的菌株为食酸丛毛单胞菌(Comamonas acidovorans)。生物毒性测定结果显示:阴沟肠杆菌和荧光假单胞菌菌株产毒能力最强,泛菌属(P.toletana)菌株产毒能力次之,成团泛菌和食酸丛毛单胞菌菌株产毒能力最弱。

无菌松材线虫的获得及培养方法研究

采用不同浓度的H2O2和抗菌素处理松材线虫虫卵和松材线虫虫体,筛选松材线虫无菌化处理有效途径。多种方法的比较表明,采用高浓度抗菌素和低浓度H2O2交替并反复处理松材线虫虫体,获得无菌线虫的比例高,线虫生命力强。将获得的无菌松材线虫与带菌线虫分别用PSA和玉米粒上培养的灰葡萄孢进行人工培养,发现线虫生长繁殖情况无明显差异。

中国与美国松材线虫体表细菌在线虫体表对峙及对松苗致病性

松材线虫体表的细菌存在演替现象,美国松萎蔫病危害不严重的原因可能是松材线虫体表细菌演替的结果。利用美国线虫体表的细菌来替代中国线虫体表的细菌,从而降低中国松萎蔫病的流行,为松萎蔫病的生物防治提供了可能。为此,本研究从3株美国松材线虫体表分离得到15株细菌菌株,并确定MG3、MG4、MG5、MG8、MG9、MG11、MG12为优势菌株。用中国松材线虫体表的4个致病细菌菌株YG1、YG2、YG3、YG4分别和15株美国菌株在实验室条件下进行对峙,发现美国MG4、MG5、MG8、MG9等菌株在松材线虫体表具有很强的竞争能力。用竞争能力最强的3个美国菌株MG5、MG8、MG9,混同无菌松材线虫分别对黑松、马尾松、湿地松和油松进行接种,发现相对于中国YG2菌株,美国菌株MG8和MG9对4种松树的致病性均明显较低。提出美国菌株MG8和MG9可以作为生物防治的候选菌株。

松材线虫与拟松材线虫杂交及后代的致病性

收集松材线虫5虫株与拟松材线虫1虫株进行生物学杂交,结果显示:松材线虫各虫株均能与拟松材线虫杂交且杂交率均较高,但杂交后代中普遍存在线虫死亡率较高的现象。用杂交后代线虫与未杂交亲本线虫分别接种2年生马尾松苗,结果表明杂交后代线虫对接种松苗的致病性小于其未杂交亲本线虫,从接种后萎蔫的松苗中再分离线虫,杂交后代线虫再分离数远少于亲本线虫数。

不同松材线虫虫株接种雪松等寄主后的组织病理学变化

用来自日本和中国的几个松材线虫虫株,分别对黑松、马尾松和雪松进行接种,接种后分离树体内的线虫,并观察树体的组织细胞变化。研究结果表明,2个日本虫株均能使黑松、马尾松和雪松发病并枯死,而中国线虫虫株仅能够使黑松和马尾松发病枯死,不能使雪松致病。接种后不同时间分离线虫,比较线虫在寄主体内的数量消长情况。发现凡接种发病死亡的,其体内线虫数量最多;发病但没有死亡的,其体内线虫数量也较多;中国虫株接种的雪松,一直没有表现任何症状,其体内也分离到了一定数量的线虫。接种后组织病理学变化表明,细胞和组织变化与线虫的移动和扩散有关。黑松和马尾松,接种日本和中国浙江松材线虫虫株后,72 h时皮层和韧皮部的薄壁细胞变形、死亡普遍存在,树脂道泌脂细胞和木射线细胞均遭到线虫破坏。144 h后,皮层、韧皮部、木质部和髓心大量细胞死亡,形成空洞,管胞中可见线虫活动。而对于雪松,接种日本松材线虫虫株后,皮层、韧皮部和形成层细胞死亡,树脂道泌脂细胞和木射线细胞死亡,有少量代谢物聚集。中国松材线虫虫株接种后,初期皮层、韧皮部细胞变形并破坏;但是,细胞的破坏只局限在小范围内。后期皮层、韧皮部细胞被破坏,但形成层完整,木射线和管胞基本完好。

松材线虫体表物质与其携带细菌的关系

松萎蔫病是由松材线虫与其所携带的细菌复合侵染所引起。为进一步明确松材线虫与其携带细菌的关系,笔者用无菌线虫体表浸泡物处理细菌,再将无菌线虫各虫株与细菌共培养,结果表明细菌的存在可促进线虫的繁殖,线虫体表浸泡物质可促进细菌繁殖,无菌线虫与细菌共培养后线虫繁殖数量较无菌线虫单独培养有明显增加,说明松材线虫与其体表细菌的关系为一种互惠关系。此外还设计了无菌线虫对细菌的趋向性试验,考察线虫与自身体表所携带细菌之间的趋向性是否具有特异性,结果表明所有无菌线虫对成团泛菌具有明显的趋向性,各无菌松材线虫对于分离自各自体表的细菌菌株没有特异的趋向性。

中国日本松材线虫虫株对不同松苗的致病性及在树体内移动特点比较

为了解不同松材线虫虫株在致病性方面的差异,选用分离自日本和中国浙江的松材线虫虫株,分别接种雪松、黑松和马尾松,比较其感病情况,并在不同时期分离树体内的线虫,比较不同虫株在不同寄主体内的移动和分布情况。结果表明,2个日本虫株和1个中国虫株都能使黑松和马尾松感病和枯死,3虫株对黑松和马尾松的致病力没有明显差异;日本松材线虫虫株能使雪松枯死,枯死率在50%左右;中国松材线虫虫株不能使雪松致病,但在其体内可以分离到松材线虫。不同时期分离各寄主体内线虫发现,接种72h前线虫数量处于调整期,接种144h后线虫数量开始上升或下降。日本虫株接种雪松后,线虫数量呈递增趋势;中国虫株接种雪松,线虫数量在接种144h后开始下降。我国雪松不感染松材线虫病是由于线虫虫株发生了变异。

中药王不留行的组织培养技术初探

选取王不留行饱满种子培养无菌苗,用无菌苗的茎和叶作为外植体,分别接种MS基本培养基外加激素NAA和6-BA诱导愈伤组织和不定芽,使用1/2MS培养基,附加IBA或NAA进行不定芽的生根实验,最后炼苗和移栽.实验结果表明王不留行的最优组织培养方案:种子用0.1%升汞消毒8m in,无菌湿脱脂棉催芽,茎和叶作为外植体,使用MS+0.1mg/L NAA+0.1mg/L 6-BA诱导愈伤组织和不定芽,1/2MS+0.15mg/L NAA诱导植株生根.

细胞生物学教学中的反思型教师教育

在分析了反思型教师教育兴起的背景后,作者在师范生《细胞生物学及实验》课程教学中,进行了两方面的反思性教学尝试:一方面实施对教学环节全过程的反思,另一方面是让学生参与教学实践。结果表明对师范生实施反思性教学,可以提高学生的反思能力,有利于师范生形成反思意识,养成初步的反思习惯,学生的反思能力显著提高。

在教师教育中应用元认知理论进行反思性教学

Swanson研究认为学生元认知能力的高低与学习成绩直接相关。反思性教学正成为我国教师教育研究的一个热点问题。本文在教师教育实践中探讨元认知理论与反思性教学的关系 ,认为教师对教学的自觉的反思过程就是一种内隐的元认知过程。教师自身的反思可采用自我反问、记录工作日志、集体会诊。

麂亚科动物中一段未知序列的克隆及其亲缘关系分析

用PCR方法,在扩增钾通道蛋白基因的同时获得了一条未知序列,经序列分析,进行4种麂亚科动物(黑麂、赤麂、小麂和毛冠鹿)的同源性比较,发现麂属动物种间的DNA差异在1.64％-2.54％之间;毛冠鹿与麂属3种动物的差异在2.76％-3.33％之间。另外毛冠鹿的序列中有一段连续的序列(约17个碱基)在麂属动物中是没有的,表明毛冠鹿与麂属动物有着明显的差异。

美国松材线虫体表携带优势细菌的鉴定及致病性

为证实松材线虫Bursaphelenchus xylophilus虫株携带弱毒细菌替代强毒株系防治松树萎蔫病这一思路的可行性,从2个美国松材线虫虫株体表分离并确定了优势细菌,测定了各优势细菌的毒性和致病性,并对这些菌株进行了初步鉴定。细菌分离结果显示:MG4,MG5,MG8和MG9等4菌株为美国线虫体表的优势菌株。毒力测试表明,与中国松材线虫携带的强致病菌相比,美国松材线虫携带的4个菌株的产毒能力和致病性均较低,可以作为生防细菌的候选菌株使用。经细菌的常规染色、形态学观察及16S rDNA序列分析,MG4,MG5,MG8和MG9菌株分别被鉴定为代夫特菌Delftia tsuruhatensis,恶臭假单胞菌Pseudomonas putida,嗜麦芽窄食单胞菌Stenotrophomonas maltophilia和泛菌属1种Pantoea sp.。

新型与市售平菇香气成分的GC-MS分析与比较

采用同时蒸馏萃取（simultaneous distillated extraction,SDE）法并结合气质联用仪（gas chromatograph-mass spectrometer,GC-MS）,对黄芪药渣栽培的新型平菇和市售平菇中的香气成分进行定性鉴别和分析比较。结果表明,分别从新型平菇和三种市售平菇中鉴定出38、19、22、22种香气成分;四种平菇主要香气成分基本不同,仅有5种共有香气成分,且含量差异较大,即1,1-二乙氧基乙烷（0.71%~37.6%）、1-辛烯-3-醇（1.23%~17.78%）、3-辛酮（0.67%~20.27%）、3-辛醇（2.63%~30.68%）和（1E,3E,12Z）-十九碳三烯-5,14-二醇（0.75%~1.19%）;新型平菇主要香气成分为四甲基硫脲（Tetra-methylthiourea,TMTU,26.36%）和2,6-二叔丁基-4-甲基苯酚（Butylated hydroxytoluene,BHT,21.55%）,含硫/氮化合物（27.74%）,呋喃类成分（1.86%）,与市售平菇明显不同。结论：该新型平菇香味独特,香气成分中抗氧化成分含量较高;GC-MS法可作为平菇香气成分质量控制的检测方法。

葡萄基因组密码子使用偏好模式研究

根据完整基因组序列,运用多元统计分析和对应分析的方法,探讨了葡萄全基因组序列密码子的使用模式和影响密码子使用的各种可能因素。结果显示:葡萄密码子偏好性主要受到碱基差异(r=0.925)和自然选择(r=0.193)共同作用的影响,突变压力占了主导因素,自然选择的作用较小。同时基因长度和蛋白质疏水性也对密码子的偏好性有所影响。确定了葡萄的20个最优密码子。

盐芥ThHKT1基因的克隆

以盐芥为材料,依据拟南芥AtHKT1基因的序列设计引物,扩增出盐芥中ThHKT1基因的部分序列。然后使用快速扩增(RACE)方法,从盐芥中克隆到ThHKT1基因cDNA序列。该序列全长1817bp,推测编码区长度为1503bp,编码500个氨基酸,等电点为8.82。其编码序列和氨基酸序列与拟南芥AtHKT1基因的相应序列同源性分别为82.8%和77.3%。

Cr^(3+)胁迫对萝卜幼苗生长的影响

采用砂培研究了萝卜幼苗受到Cr3+胁迫时,根冠比、根系活力、叶绿素含量和植株体内脯氨酸含量的变化。结果表明,在低浓度Cr3+(≤20 mg/L)胁迫下,植株的根冠比大于对照组,根系活力有所提高,叶中叶绿素含量增加,萝卜幼苗表现出对低浓度Cr3+有较强的抗性作用;而高浓度(25、30 mg/L)的Cr3+使根系活力降低,叶绿素的含量减少,根冠比呈下降趋势。在试验过程中,受Cr3+胁迫的萝卜幼苗体内脯氨酸含量变化明显,呈现出规律性升高趋势,从而降低Cr3+对细胞的伤害,提高植物对重金属盐的抗性。

拟南芥AtNHX1基因克隆和cre(lox)植物表达载体构建

从拟南芥叶片提取总RNA,经反转录得到cDNA。根据Genbank数据库中已登记的拟南芥Na+/H+逆向转运蛋白基因AtNHX1的核苷酸序列设计并合成了1对克隆引物,通过PCR方法从cDNA中扩增出AtNHX1基因片段,将该目的片段克隆至pGEM-TEazy载体。通过酶切,从pGEM-TEazy载体上切下目的基因片段,替换pX6-GFP载体中的GFP基因,构建了AtNHX1基因cre/lox植物表达载体。

种子活力和作物产量

种子对作物生产、人类营养和食品安全至关重要。种子最重要的一个性能指标就是种子活力,它是指决定一批种子在不同环境条件下能够萌发的活性和性能,它是提高作物产量的关键,也是农业化生产和种子产业的一个基本目标。本文介绍了种子活力在农业生产中的重要性和种子活力的测定指标,并从生理生态学、分子生物学和生物物理学等方面概述了种子活力及其影响因素,讨论了在提高作物产量和改善播种性能方面的策略。

32种植物提取物对常见植物病原真菌的抑制作用

[目的]筛选对植物病原物具有抑制作用的植物资源,寻找新型的植物源杀菌剂。[方法]以32种植物的丙酮和乙醇提取物为材料,以香石竹尖孢镰刀菌、棉花枯萎病菌、交链孢、链格孢和多隔镰刀菌5种植物病原菌为供试菌种,测定了植物提取物对5种病原菌的生物活性。[结果]在供试质量浓度为0.035 g/ml时,广玉兰、小叶黄杨、侧柏、火炬松、黄连木提取物对所有供试菌菌丝生长的抑制率均在50%以上,其中火炬松提取物抑菌活性最好,对至少4种供试菌的抑制率均为60%,对其中2种供试菌的抑菌活性均大于70%,在供试质量浓度为0.1 g/ml时,广玉兰、小叶黄杨、火炬松提取物抑制孢子萌发显著,抑制率均在80%以上。[结论]火炬松、广玉兰、小叶黄杨植物提取物对病原真菌菌丝生长和孢子萌发效果较好。