进口动物中首次分离出蓝舌病病毒

蓝舌病是反刍动物的一种急性传染病,在世界上被列为A类疾病,对绵羊危害极大。该病首先在非洲发现,现已扩散到许多、国家和地区,各国在动物的进出口检疫中,都十分重视对该病的检疫。我们在对甘肃兰州野生动物繁育中心从美国进口的羚羊和新疆从苏联进口的绵羊中,采用鸡胚接种和细胞培养病毒分离方法,先后分离到蓝舌病病毒。

应用聚合酶链反应检测蓝舌病病毒的研究

聚合酶链反应是体外扩增特异性DNA系列的一种有效方法。本研究以第10型蓝舌病病毒群特异性病毒抗原VP_7的编码基因S_7为模板,用禽类成髓细胞瘤病毒反转录酶将模板RNA反转录成cDNA,再应用聚合酶链反应对其进行扩增,经聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)检测,证明扩增物的大小与设计相符,将扩增物制备成探针后与第10型蓝舌病病毒核酸进行杂交,证明扩增物为病毒特异性核酸,同时设立的细胞核酸和鹿流行性出血病病毒核酸的扩增结果为阴性。本研究中所使用的引物还可用来扩增第1、11、13、15、17等型的蓝舌病病毒和一株分离的蓝舌病病毒以及直接扩增出动物血液内的蓝舌病病毒。

应用PCR技术合成生物素化蓝舌病病毒核酸探针的研究

用禽类成髓细胞病毒（AMV）反转录酶将蓝舌病病毒RNA反转录成cDNA,以dATP、dGTP、dCTP、dTTP和bio-11-dUTP作为TaqDNA聚合酶的底物,应用PCR技术合成了生物素化蓝舌病病毒核酸探针,经斑点杂交试验证明,合成的探针为蓝舌病病毒特异性核酸探针。