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沙冬青高活性抗冻蛋白的发现 被引量:57
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作者 费云标 孙龙华 +3 位作者 黄涛 舒念红 高素琴 简令成 《Acta Botanica Sinica》 CSCD 1994年第8期649-650,共2页
The authors have isolated and partial purified antifreeze protein antifreeze protein (AFP) produced endogenously in Ammopiptanthus mongolicus.The results show that the partial purified AFP ranged in size including 45 ... The authors have isolated and partial purified antifreeze protein antifreeze protein (AFP) produced endogenously in Ammopiptanthus mongolicus.The results show that the partial purified AFP ranged in size including 45 7 kD, 81 2 kD, and so on.At 50 mg/ml protein concentration, the temperature of melting point is -15℃, and its freezing point is even lower.Therefore, the AFP activity exhibited by the Ammopiptanthus mongolicus is higher than that observed for AFP found in polar fishes or in winter rye.In addition, by a phase contrast light photomicroscope, the author have observed the morphology of individual ice crystals formed in the solution, including squares, rectangles, cones, hexagons.The morphology of these ice crystals are similar to those of ice crystals observed in polar fishes and in cold acclimation winter rye. 展开更多
关键词 沙东青 抗冻蛋白 豆科
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转抗冻蛋白基因鱼的研究 被引量:6
2
作者 费云标 黄涛 +9 位作者 于建康 夏仕玲 李光三 阎维 高素琴 毛钟荣 李书鸿 王壬学 张培军 严绍颐 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 1993年第4期387-388,共2页
鱼类抗冻蛋白(AFP)或抗冻糖蛋白(AFGP),可使鱼类体液的冰点降低至-1.9℃左右,并减少冰晶的生长速度,它们的生物活性比小分子NaCl等无机盐、尿素。
关键词 转基因鱼 抗冻蛋白 遗传工程 鱼纲
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淡水瓦氏雅罗鱼基因文库的构建和抗冻蛋白基因同源序列的筛选 被引量:4
3
作者 费云标 于建康 +3 位作者 陈良标 王亚平 严绍颐 靳光琴 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 1992年第2期192-196,共5页
南、北极海域中的一些鱼类,在秋冬季节,它们的血液中含有一些能降低其冰点的蛋白质,分别为抗冻糖蛋白(AFGP)和不含糖的抗冻蛋白或抗冻多肽(AFP)。现在,人们已经分离纯化了多种这样的抗冻糖蛋白、抗冻蛋白及多肽,并克隆了编码它们的基因... 南、北极海域中的一些鱼类,在秋冬季节,它们的血液中含有一些能降低其冰点的蛋白质,分别为抗冻糖蛋白(AFGP)和不含糖的抗冻蛋白或抗冻多肽(AFP)。现在,人们已经分离纯化了多种这样的抗冻糖蛋白、抗冻蛋白及多肽,并克隆了编码它们的基因。Fletcher等将北美黄盖鲽抗冻蛋白(AFP)注入虹鳟鱼(Sairdnerii)后改善了后者的抗冻性能,并将黄盖鲽AFP基因转入了大西洋鲑鱼Atlantic salmon中。 展开更多
关键词 瓦氏雅罗鱼 基因库 抗冻蛋白基因
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植物抗寒冻的分子遗传与基因工程 被引量:12
4
作者 费云标 黄涛 +1 位作者 舒念红 赵淑慧 《生物工程进展》 CSCD 1996年第1期15-16,共2页
植物抗寒冻的分子遗传与基因工程费云标,黄涛,舒念红,赵淑慧(中国科学院发育生物学研究所)植物抗寒冻的遗传学研究表明,小麦的21对染色体中至少有10对染色体关系到寒冻抗性,在染色体5A和D,携带着影响小麦抗性的许多基因... 植物抗寒冻的分子遗传与基因工程费云标,黄涛,舒念红,赵淑慧(中国科学院发育生物学研究所)植物抗寒冻的遗传学研究表明,小麦的21对染色体中至少有10对染色体关系到寒冻抗性,在染色体5A和D,携带着影响小麦抗性的许多基因(Guy1990)。寒冻抗性的70... 展开更多
关键词 作物 抗寒性 分子遗传 基因工程 农业生物工程
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植物寒冻损伤与抗性的细胞化学及生物化学 被引量:14
5
作者 费云标 舒念红 +1 位作者 黄涛 赵淑慧 《生物工程进展》 CSCD 1994年第3期40-44,共5页
植物寒冻损伤与抗性的细胞化学及生物化学费云标,舒念红,黄涛,赵淑慧(中国科学院发育生物学研究所)植物的抗寒冻性随季节和发育有明显不同,某些硬木和灌木在冬季-196℃深冻仍可存活,而春天-3℃就被冻死。有的苹果树组织也... 植物寒冻损伤与抗性的细胞化学及生物化学费云标,舒念红,黄涛,赵淑慧(中国科学院发育生物学研究所)植物的抗寒冻性随季节和发育有明显不同,某些硬木和灌木在冬季-196℃深冻仍可存活,而春天-3℃就被冻死。有的苹果树组织也可冷冻到-60℃还能存活,某些适盐... 展开更多
关键词 植物 抗冻性 细胞化学 生物化学
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热激蛋白的分子生物学研究进展 被引量:9
6
作者 费云标 黄涛 +1 位作者 舒念红 江勇 《植物学通报》 CSCD 1995年第1期1-5,13,共6页
热激蛋白的分子生物学研究进展费云标,黄涛,舒念红,江勇(中国科学院发育生物研究所,北京100080)ADVANCESOFMOLECULARBIOLOGYONHEATSHOCKPROTEINS¥FeiYun-biao;... 热激蛋白的分子生物学研究进展费云标,黄涛,舒念红,江勇(中国科学院发育生物研究所,北京100080)ADVANCESOFMOLECULARBIOLOGYONHEATSHOCKPROTEINS¥FeiYun-biao;HuangTao;ShuNian-... 展开更多
关键词 热激蛋白 分子生物学 基因表达
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抗冻蛋白的生物化学与抗冻作用机制 被引量:16
7
作者 费云标 严绍颐 《生物工程进展》 CSCD 1992年第6期17-20,46,共5页
生物的抗冻作用已引起人们的广泛注意,海洋鱼类血液中含有Nacl和少量的Ca^+、K^+、尿素、糖和游离氨基酸而略微降低体液的冰点,但南北极严寒地区的海洋鱼类则主要依靠血液内所含的抗冻蛋白降低体液的冰点,减少冰晶的生长速度,以防止因... 生物的抗冻作用已引起人们的广泛注意,海洋鱼类血液中含有Nacl和少量的Ca^+、K^+、尿素、糖和游离氨基酸而略微降低体液的冰点,但南北极严寒地区的海洋鱼类则主要依靠血液内所含的抗冻蛋白降低体液的冰点,减少冰晶的生长速度,以防止因体液冻结而致死。以等克分子浓度计算,鱼类的抗冻蛋白比那些低分子物质。 展开更多
关键词 抗冻蛋白 蛋白 生物化学 抗冻作用
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添加植物抗冻蛋白提高猪胚胎冷冻保存成活率的初步试验 被引量:5
8
作者 费云标 魏令波 +3 位作者 高素琴 朱化彬 罗应荣 张之宣 《黑龙江动物繁殖》 1995年第2期21-23,共3页
本试验采集7天猪扩张囊胚和孵化后囊胚,在1.5M甘油冷冻液中添加二种浓度(0.5mg/ml,5mg/ml)植物抗冻蛋白(AFGPs),用慢速降温方法冷冻。猪胚胎冷冻-解冻后,体外培养12小时,发育率分别为25%(1/4)和80%(4/5);24小时发育率分别为0%(0/4)... 本试验采集7天猪扩张囊胚和孵化后囊胚,在1.5M甘油冷冻液中添加二种浓度(0.5mg/ml,5mg/ml)植物抗冻蛋白(AFGPs),用慢速降温方法冷冻。猪胚胎冷冻-解冻后,体外培养12小时,发育率分别为25%(1/4)和80%(4/5);24小时发育率分别为0%(0/4)和40%(2/5),孵化囊胚率分别为0%(0/5)和20%(1/5),而对照组冷冻-解冻后培养发育率12小时和24小时均为0%(0/4)。试验表明,在冷冻液中添加一定浓度的植物抗冻蛋白,可提高猪胚胎冷冻-解冻后的成活率。 展开更多
关键词 植物抗冻蛋白 猪胚胎 冷冻保存 解冻成活率 发育率 扩张囊胚 孵化囊胚率 玻璃化冷冻 发育生物学 冷冻液
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抗冻蛋白基因结构与基因工程 被引量:19
9
作者 费云标 《生物工程进展》 CSCD 1992年第3期33-36,共4页
鱼类抗冻蛋白有四种类型。Ⅰ型抗冻蛋白(AFP),富丙氨酸,如北美黄盖鲽AFP(Davies等1985,Scott等1985),Ⅱ型,富半胱氨酸,如海渡鸦AFP(Hayes等1989);Ⅲ型,不富丙氨酸也不富半胱氨酸,如大洋条鳕AFP(Hew等1988)。
关键词 抗冻蛋白 基因结构 基因工程
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淡水瓦氏雅罗鱼基因文库的构建和抗冻蛋白基因同源序列的筛选 被引量:3
10
作者 费云标 于建康 +5 位作者 陈良标 王亚平 王为先 毛钟荣 严绍颐 靳光琴 《Developmental and Reproductive Biology》 1996年第1期17-23,共7页
极地海域中的鱼类非常耐寒。它们的血液里常含有两种能降低其体内冰点的蛋白质:抗冻糖蛋白(AFGP)和不含糖的抗冻蛋白或抗冻多肽(AFP)。这些蛋白的编码基因已经被克隆,并将黄盖鲽AFP导入虹鳟鱼和大西洋鲑鱼,而改变了它... 极地海域中的鱼类非常耐寒。它们的血液里常含有两种能降低其体内冰点的蛋白质:抗冻糖蛋白(AFGP)和不含糖的抗冻蛋白或抗冻多肽(AFP)。这些蛋白的编码基因已经被克隆,并将黄盖鲽AFP导入虹鳟鱼和大西洋鲑鱼,而改变了它们的抗冻性能。为开展中国的抗冻转基因鱼研究,本项目对中国北方的耐寒淡水鱼的抗冻基因进行了分离研究。所用实验材料鱼为中国内蒙古北部生活的瓦氏雅罗鱼(Leuciscuswaleckii),属鲤形目(Lypciniformes),鲤科(Lyprinidae),雅罗鱼亚科(Leucisinae)。基本按标准方法构建瓦氏雅罗鱼的基因文库,只在包装反应至30分钟时,再加一份BHB2690制备物,并延长30分钟反应时间。所得文库的成斑率大于1×105pfu。已知AFP基因常常多至40个拷贝,故已够用。采用通用的原位分子杂交和Southern分析进行瓦氏雅罗鱼AFP基因同源序列的分离及其亚克隆分析。以北美黄盖鲽AFP基因片段为探针,从瓦氏雅罗鱼DNA文库中筛选了三个阳性克隆。图一所示为其中一个的双份膜及其复筛结果。图二为这个阳性克隆DNA经过三种限制酶切后,同时与北美黄盖鲽AFP基因片段和该基因0.4KbcDN? 展开更多
关键词 淡水鱼 瓦氏雅罗鱼 基因文库 抗冻蛋白基因 同源序列 筛选
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昆虫抗冻蛋白的研究进展 被引量:21
11
作者 费云标 江勇 赵淑慧 《昆虫学报》 CAS CSCD 北大核心 2000年第1期98-102,共5页
热滞效应(ThermHysteresisAction)最早在昆虫研究中发现,后来研究表明,它是抗冻蛋白(AntifreezeProteins,AFPs)的一种基本性质。和鱼类,植物AFPs相比,昆虫AFPs具有更高的热滞活性和独特的化学结构特征。昆虫AFPs在昆虫抗冻生理过程中起... 热滞效应(ThermHysteresisAction)最早在昆虫研究中发现,后来研究表明,它是抗冻蛋白(AntifreezeProteins,AFPs)的一种基本性质。和鱼类,植物AFPs相比,昆虫AFPs具有更高的热滞活性和独特的化学结构特征。昆虫AFPs在昆虫抗冻生理过程中起着相当重要的作用,表现在以下三个方面:①抑制一些冰晶形成;②提高冰冻耐受性;③可能参与水分平衡过程。光周期,气温和湿度是调控AFPs生物合成与降解的三种外部因子,而体内激素的变化可能是直接调节脂肪体合成AFPs的内部因子。 展开更多
关键词 昆虫 抗冻蛋白 热滞效应 化学结构 抗冻生理
全文增补中
二甲基苯并蒽对肺肿瘤细胞P1-450基因表达的调节
12
作者 费云标 K.L.Brown D.K.Biswas 《实验生物学报》 CSCD 1992年第3期207-215,共9页
人肺肿瘤细胞(ChaGo)经二甲基苯并蒽(DMBA)处理,刺激了p 1-450基因的高水平表达,用亚致死剂量内的DMBA 处理细胞,检出了p 1-450基因的mRNA 水平随DMBA浓度和处理时间而增加;p 1-450基因的主要编码区和3’末端区“—CCGG—”序列的甲基... 人肺肿瘤细胞(ChaGo)经二甲基苯并蒽(DMBA)处理,刺激了p 1-450基因的高水平表达,用亚致死剂量内的DMBA 处理细胞,检出了p 1-450基因的mRNA 水平随DMBA浓度和处理时间而增加;p 1-450基因的主要编码区和3’末端区“—CCGG—”序列的甲基化型式不受DMBA 处理的影响,但DMBA 处理细胞影响到基因5’末端和侧翼区的“—CC-GG—”中“—C—”残基的位点特异的低甲基化效应,这种低甲基化效应,可能关系到p 1-450基因的异常高水平表达,也可能同时存在着别的分子调节机制。 展开更多
关键词 二甲基苯并蒽 肺肿瘤细胞 基因表达
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沙冬青抗冻蛋白热滞活性的DSC研究 被引量:12
13
作者 周晓蕾 陈滔滔 +4 位作者 王保怀 李芝芬 高素琴 费云标 魏令波 《物理化学学报》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2001年第1期66-69,共4页
Differential scanning calorimetry( DSC) was used to measure the thermal hysteresis activity(THA) of plant antifreeze proteins(AFPs). The results reveal that DSC is a good method to screen and study AFPs. In the sixt... Differential scanning calorimetry( DSC) was used to measure the thermal hysteresis activity(THA) of plant antifreeze proteins(AFPs). The results reveal that DSC is a good method to screen and study AFPs. In the sixteen components extracted from Ammopipanthus mongolicus leaves, one(P3S1) was found to have apparent thermal hysteresis activity by DSC. As the amount of ice nuclei in the sample decreased, the THA of P3S1 increased from 0.01℃ to 0.65℃ . It is notable that the two- peak thermal hysteresis effect was observed. Two endothermic peaks appeared in the melting process of P3S1, while the freezing peak also consisted of two peaks. The peaks appeared antecedently showed larger thermal effect. This phenomenon shows P3S1 has two different kinds of interaction with water and ice crystal. It is probably an important property of a class of AFPs. 展开更多
关键词 抗冻蛋白 热滞活性 沙冬青 热滞机理 抗冻性 差示扫描量热法
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抗冻蛋白及其在植物抗冻生理中的作用 被引量:50
14
作者 江勇 贾士荣 +1 位作者 费云标 谭克辉 《Acta Botanica Sinica》 CSCD 1999年第7期677-685,共9页
抗冻蛋白(antifrezeproteins,AFPs)是一类抑制冰晶生长的蛋白质,能以非依数性形式降低水溶液的冰点,但对熔点影响甚微,从而导致水溶液的熔点和冰点之间出现差值。这种差值称为热滞活性(thermalhy... 抗冻蛋白(antifrezeproteins,AFPs)是一类抑制冰晶生长的蛋白质,能以非依数性形式降低水溶液的冰点,但对熔点影响甚微,从而导致水溶液的熔点和冰点之间出现差值。这种差值称为热滞活性(thermalhysteresisactivity,... 展开更多
关键词 抗冻蛋白 热滞活性 抗冻作用 过冷态 冷诱导
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沙冬青叶片热稳定抗冻蛋白特性分析 被引量:38
15
作者 魏令波 江勇 +2 位作者 舒念红 高素琴 费云标 《Acta Botanica Sinica》 CSCD 1999年第8期837-841,共5页
用双向电泳电泳回收法从沙冬青( Ammopiptanthus mongolicus(Maxim .) Chengf.) 叶片热稳定蛋白质中分离到一种抗冻蛋白afp,其分子量为40 kD,pI为9.0 ,热滞活性为0 .9 ... 用双向电泳电泳回收法从沙冬青( Ammopiptanthus mongolicus(Maxim .) Chengf.) 叶片热稳定蛋白质中分离到一种抗冻蛋白afp,其分子量为40 kD,pI为9.0 ,热滞活性为0 .9 ℃(20 mg/mL) ,和其他抗冻蛋白进行比较,没有发现相同的类型。afp N 端序列为SDDLSFTFNKFVPCQTDILF。afp 在沙冬青体内广泛分布且叶片含量较高,可能是沙冬青抗冻生理过程中的主要物质,对于沙冬青抵御冬季冷冻温度具有重要的作用。 展开更多
关键词 沙冬青 热稳定蛋白 热滞活性 抗冻蛋白
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分离和鉴定沙冬青抗冻蛋白质(英文) 被引量:13
16
作者 江勇 魏令波 +2 位作者 费云标 舒念红 高素琴 《Acta Botanica Sinica》 CSCD 1999年第9期967-971,共5页
采用经典的蛋白质色谱技术,纯化沙冬青( Ammopiptanthus mongolicus (Maxim .) Chengf.) 叶片中的抗冻蛋白质,然后经非变性PAGE胶分离、回收,得到具有热滞活性的两条带:B1 和B3... 采用经典的蛋白质色谱技术,纯化沙冬青( Ammopiptanthus mongolicus (Maxim .) Chengf.) 叶片中的抗冻蛋白质,然后经非变性PAGE胶分离、回收,得到具有热滞活性的两条带:B1 和B3。前者在8 g/L时热滞活性为0.46 ℃,并在SDS_PAGE胶上分离出两条带( 分子量为67 kD和21 kD) ;后者在10 g/L时热滞活性为0.45 ℃,在SDS_PAGE胶上只有1 条带( 分子量为39.8 kD)。B1 和B3 均不能被Shiff 试剂染色,也不具有典型糖蛋白的紫外吸收特征。 展开更多
关键词 沙冬青 抗冻蛋白 色谱 电泳洗脱
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蛋白内含子与蛋白剪接 被引量:1
17
作者 魏令波 费云标 Paul X Liu 《中国生物工程杂志》 CAS CSCD 2002年第4期12-16,共5页
蛋白内含子和蛋白剪接是蛋白质研究的前沿领域。重点介绍了蛋白内含子的结构和蛋白剪接机理的最新研究成果 ;蛋白内含子如同RNA剪接中的内含子 ,也是一类可移动的遗传元件 ;
关键词 蛋白内含子 蛋白剪接 蛋白外显子 蛋白质工作
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浅谈合作学习在初中数学课堂教学中的运用策略与作用 被引量:7
18
作者 费云标 《教育教学论坛》 2011年第30期215-216,共2页
从当前的教学环境,民主、开放的社会中,我们应以引导和激励和学生共同学习。合作学习是一种相互协作的学习方法,教师将学习的责任还给学生,为学生提供一个创新空间,以增进学生的学习兴趣,让学生自觉主动的变被动学习为主动学习,享受数... 从当前的教学环境,民主、开放的社会中,我们应以引导和激励和学生共同学习。合作学习是一种相互协作的学习方法,教师将学习的责任还给学生,为学生提供一个创新空间,以增进学生的学习兴趣,让学生自觉主动的变被动学习为主动学习,享受数学学习的乐趣。初中数学课堂中运用合作学习这种方式,能促进学生的发展,改变学生的学习方式,从而提高数学教学效果。 展开更多
关键词 合作学习 课堂教学 小组合作
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设计“一题一课” 促进中考复习——以2020年南京中考第26题为例
19
作者 费云标 《数学教学通讯》 2023年第23期16-18,30,共4页
文章以2020年南京中考数学第26题为基础,设计“一题一课”的中考复习课,帮助学生形成解析几何的思考路径,积累解题经验,提升解题能力.
关键词 一题一课 中考 复习课
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aroAIn融合基因载体的构建、表达及对烟草的转化 被引量:4
20
作者 赵瑾 高素琴 +1 位作者 费云标 魏令波 《Acta Genetica Sinica》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2004年第11期1294-1301,共8页
PCR扩增突变的 5′ 烯醇丙酮酸莽草酸 3 磷酸合成酶 (5′ enolpyruvylshikimate 3 phosphatesynthetase ,EPSPS)cDNA全长序列 ,插入 pLitmus2 8得到 pLEPSPS ,进而通过反向PCR在EPSPS 2 35 /2 36aa之间将其打断为无功能的片段。选用人... PCR扩增突变的 5′ 烯醇丙酮酸莽草酸 3 磷酸合成酶 (5′ enolpyruvylshikimate 3 phosphatesynthetase ,EPSPS)cDNA全长序列 ,插入 pLitmus2 8得到 pLEPSPS ,进而通过反向PCR在EPSPS 2 35 /2 36aa之间将其打断为无功能的片段。选用人工构建的具有顺式和反式剪接功能的mini型蛋白内含子SspDnaB和RmaDnaB ,插入被打断的aroA(抗除草剂基因 ) ,构建了质粒 pLEBC、pLEBT、pLERC和 pLERT。将 4种重组质粒中的aroA In(蛋白内含子Intein插入aroA)融合基因插入 pET 32得到表达载体 pETLEBC、pETLEBT、pETLERC和 pETLERT ,IPTG诱导后 ,SDS PAGE分析显示其能在DE3 中有效表达并发生相应的蛋白剪接。将aroA cisSspDnaB和aroA cisRmaDnaB融合基因分别插入 pLYM中进一步构建成植物表达载体 ,农杆菌叶盘法转化烟草。基因组PCR分析表明融合基因整合入植物核基因组 ;RT PCR分析显示其可在高等植物细胞中成功表达。结果说明蛋白内含子基因可以转化高等真核细胞 ,蛋白剪接技术可应用于高等植物细胞 。 展开更多
关键词 蛋白剪接 EPSPS 转基因 烟草
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