黄芪益肾颗粒联合司维拉姆对维持性血液透析患者疗效和TLR4、NF⁃κB的影响

目的探讨黄芪益肾颗粒联合司维拉姆对维持性血液透析(MHD)患者疗效和Toll样受体4(TLR4)、核转录因子⁃κB(NF⁃κB)的影响。方法分析2019年1月至2022年11月在六安市六安世立医院本收治的118例MHD患者临床资料,按不同治疗手段将其分为对照组(n=52)和联合组(n=66)。对照组接受常规治疗+司维拉姆(0.8 g/次,3次/d);联合组接受常规治疗+司维拉姆+黄芪益肾颗粒(15 g/次,2次/d);两组均持续治疗2个月。统计分析两组临床疗效、治疗前与治疗2个月后肾功能[24 h尿蛋白排泄率(UPE)、血肌酐(SCr)、血尿素氮(BUN)]、微炎症状态[白细胞介素(IL)⁃6、中性粒细胞/淋巴细胞比值(NLR)、肿瘤坏死因子⁃α(TNF⁃α)]、TLR4、NF⁃κB mRNA水平及不良反应发生率。结果治疗2个月后,联合组总有效率显著高于对照组,差异有统计学意义(χ^(2)=5.449,P<0.05)。两组治疗前UPE、SCr、BUN水平均比较差异无统计学意义(P>0.05);治疗后两组UPE、SCr、BUN均降低,且联合组更低,差异有统计学意义(P<0.05)。两组治疗前IL⁃6、NLR、TNF⁃α水平均比较差异无统计学意义(P>0.05);治疗后两组IL⁃6、NLR、TNF⁃α均降低,且联合组更低,差异有统计学意义(P<0.05)。两组治疗前TLR4、NF⁃κB mRNA水平比较差异无统计学意义(P>0.05);治疗后两组TLR4、NF⁃κB mRNA均降低,且联合组更低,差异有统计学意义(P<0.05)。两组不良反应发生率比较差异无统计学意义(P=0.903)。结论黄芪益肾颗粒联合司维拉姆能够提高MHD患者治疗效果,改善其肾功能与微炎症状态,这可能与抑制TLR4、NF⁃κB水平表达有关。

SIRT1/PGC-1α在高糖状态下线粒体氧化应激损伤致足细胞凋亡中的作用

目的:探讨SIRT1/PGC-1α通路在高糖状态下线粒体氧化应激损伤至足细胞凋亡中的作用。方法:采用高糖高脂饮食联合小剂量链脲佐菌素腹腔注射建立2型糖尿病大鼠模型,将造模成功的大鼠分为糖尿病模型组和白藜芦醇治疗组。在给药10周末,测定各组大鼠肾质量指数、肾功能和24 h尿蛋白(UTP)变化,电镜及光镜下观察肾脏病理改变,硫代巴比妥酸法检测肾脏MDA含量,WST-1法检测SOD活性,大鼠肾组织SIRT1、PGC-1α、Caspase3及Synaptopodin蛋白表达水平用Western blot法和IHC法检测,大鼠肾组织ROS、Bcl-2、Caspase9、Desmin蛋白水平用IHC法检测。结果:与正常组比较,模型组大鼠UTP明显上升(P<0.05),SOD表达减少,MDA,ROS明显增多(P<0.05),SIRT1,PGC-1α的蛋白表达水平明显下降(P<0.05),Bcl-2蛋白表达水平下降,Caspase9、Caspase3表达升高(P<0.05),Desmin蛋白表达增多,Synaptopodin蛋白表达减少(P<0.05);与模型组比较,白藜芦醇组UTP水平下降,SOD活性升高,MDA、ROS含量显著下降(P<0.05);SIRT1、PGC-1α蛋白表达增多(P<0.05),Bcl-2蛋白表达上升,Caspase9、Caspase3表达下降(P<0.05),Desmin蛋白表达减少,Synaptopodin蛋白表达升高(P<0.05)。结论:糖尿病肾病大鼠存在明显的线粒体氧化应激损伤,白藜芦醇可以减少高糖状态下足细胞凋亡,此作用可能与上调SIRT1/PGC-1α表达改善线粒体功能,减少ROS生成有关。

高糖诱导线粒体损伤对足细胞影响的研究进展

糖尿病肾病(diabetic nephropathy, DN)是糖尿病患者最常见、最有害的微血管并发症,其发病率逐年上升。足细胞是一种终末分化的肾小球脏层上皮细胞,其数量的减少,足突融合消失或裂隙膜蛋白表达减少都是大量蛋白尿发生的细胞分子学基础。线粒体作为一种具有半自主性的细胞器,在多种多样的细胞生物过程中扮演重要角色,包括生成三磷酸腺苷(ATP)、调节细胞代谢与增殖、细胞内钙稳态、细胞信号传导等。

小檗碱通过抑制内质网应激反应发挥对糖尿病肾病大鼠的保护作用

目的:探讨小檗碱(Berberine,BBR)对糖尿病肾病(diabetic nephropathy,DN)肾脏组织中内质网应激(endoplasmic reticulum stress,ERS)的影响。方法:高糖高脂饮食联合腹腔注射链脲佐菌素(STZ)复制DN大鼠模型。实验共分为3组,正常组(NC组)、模型组(DN组)和小檗碱干预组(DN+BBR组)(n=6)。DN+BBR组在DN模型基础上予BBR 200 mg·kg^(-1)·d^(-1)灌胃治疗,NC组及DN组则予等计量羧甲基纤维素钠灌胃处理。给药6周后,检测并记录大鼠体重、肾指数(KI=肾重/体重)、空腹血糖(FBG)、血肌酐(Scr)、尿素氮(BUN)及24 h尿蛋白(24 h UPro)水平。采用HE、PAS、MASSON染色观察肾脏组织病理改变。透射电镜观察肾小球及肾间质变化。免疫组织化学染色观察肾组织ERS标志物PERK、IRE1、ATF6、CHOP及凋亡蛋白Caspase3的表达。结果:(1)DN组较NC组Scr、BUN、FBG及24 h Upro均显著上升,肾功能损伤严重;经小檗碱干预后,DN+BBR组较DN组肾功能损伤情况改善,各组大鼠Scr、BUN、FBG及24 h Upro差异均具有统计学意义(P<0.05)。(2)HE、PAS及Masson染色结果显示DN组较NC组肾小球形态不规则,体积增大,肾小球囊腔缩窄,弥漫性系膜基质增多,肾小管水肿,肾间质紫红色糖原沉积物增多,蓝染胶原纤维堆积,炎性细胞浸润;经小檗碱干预后,DN+BBR组肾小球状况明显改善,肾小管水肿减轻,糖原沉积减少,胶原纤维堆积相对较少。(3)透射电镜结果显示DN组较NC组大鼠足细胞不规则排列,大量足突融合、断裂,基底膜不均匀增厚;经小檗碱干预后,DN+BBR组足细胞排列较不规则,可见部分足突融合、断裂,基底膜略增厚。(4)免疫组化显示DN组CHOP、PERK、IRE1、ATF6及Caspase3蛋白表达均显著升高;经小檗碱干预后,DN+BBR组大鼠各蛋白表达情况均显著下降,蛋白表达差异均具有统计学意义(P<0.05)。结论:BBR能显著改善DN大鼠肾脏的结构和功能,其机制可能是通过抑制DN大鼠肾脏组织内质网应激反应,减轻肾脏细胞的凋亡,从而延缓DN的发生、发展,保护肾脏组织。