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马铃薯A病毒重组CP多克隆抗体的制备及其在DAS-ELISA检测中的应用
被引量:
5
1
作者
宋志成
费新敏
+4 位作者
杨煜
乔利仙
王晶珊
李广存
郭宝太
《华北农学报》
CSCD
北大核心
2017年第1期41-46,共6页
利用重组CP作抗原制备出马铃薯A病毒的多克隆抗体,并将其用于DAS-ELISA检测。以p ET22b(+)为起始载体,构建了PVA-CP基因的原核表达载体p ET22b-ACP,重组菌BL21(p ET22b-ACP)经IPTG诱导表达出了分子量为30 k Da的特异性重组CP。利用高纯...
利用重组CP作抗原制备出马铃薯A病毒的多克隆抗体,并将其用于DAS-ELISA检测。以p ET22b(+)为起始载体,构建了PVA-CP基因的原核表达载体p ET22b-ACP,重组菌BL21(p ET22b-ACP)经IPTG诱导表达出了分子量为30 k Da的特异性重组CP。利用高纯度重组CP为抗原免疫家兔,制备出了效价为1∶512 k的抗血清。以PVA重组CP为抗原,用间接ELISA与直接ELISA分别测定重组CP纯化抗体(Ig G)及其碱性磷酸酶标记物(Ig G-AP)的活性,用DAS-ELISA测定2种抗体的活性,目测及OD值测定结果表明3种ELISA测定反应都呈阳性。以PVA病毒阳性标准物为抗原,在上述3种ELISA测定中也呈阳性反应,重组CP多克隆抗体及其酶标抗体与PVA有较强的反应信号。利用重组CP制备的多克隆抗体及其酶标抗体达到了马铃薯A病毒DAS-ELISA检测的要求。
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关键词
马铃薯A病毒
重组CP
多克隆抗体
酶标记抗体
DAS-ELISA检测
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职称材料
题名
马铃薯A病毒重组CP多克隆抗体的制备及其在DAS-ELISA检测中的应用
被引量:
5
1
作者
宋志成
费新敏
杨煜
乔利仙
王晶珊
李广存
郭宝太
机构
青岛农业大学生命科学学院
山东省农业科学院蔬菜花卉研究所
中国农业科学院蔬菜花卉研究所
出处
《华北农学报》
CSCD
北大核心
2017年第1期41-46,共6页
基金
山东省农业产业体系薯类创新团队遗传育种岗位基金项目(SDAIT-10-022-03)
济南市国际科技合作计划项目(2014003054)
文摘
利用重组CP作抗原制备出马铃薯A病毒的多克隆抗体,并将其用于DAS-ELISA检测。以p ET22b(+)为起始载体,构建了PVA-CP基因的原核表达载体p ET22b-ACP,重组菌BL21(p ET22b-ACP)经IPTG诱导表达出了分子量为30 k Da的特异性重组CP。利用高纯度重组CP为抗原免疫家兔,制备出了效价为1∶512 k的抗血清。以PVA重组CP为抗原,用间接ELISA与直接ELISA分别测定重组CP纯化抗体(Ig G)及其碱性磷酸酶标记物(Ig G-AP)的活性,用DAS-ELISA测定2种抗体的活性,目测及OD值测定结果表明3种ELISA测定反应都呈阳性。以PVA病毒阳性标准物为抗原,在上述3种ELISA测定中也呈阳性反应,重组CP多克隆抗体及其酶标抗体与PVA有较强的反应信号。利用重组CP制备的多克隆抗体及其酶标抗体达到了马铃薯A病毒DAS-ELISA检测的要求。
关键词
马铃薯A病毒
重组CP
多克隆抗体
酶标记抗体
DAS-ELISA检测
Keywords
Potato virus A
Recombinant CP
Polyclonal antibody
Enzyme-conjugated antibody
DAS- ELISA detection
分类号
S432.41 [农业科学—植物病理学]
Q782 [生物学—分子生物学]
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作者
出处
发文年
被引量
操作
1
马铃薯A病毒重组CP多克隆抗体的制备及其在DAS-ELISA检测中的应用
宋志成
费新敏
杨煜
乔利仙
王晶珊
李广存
郭宝太
《华北农学报》
CSCD
北大核心
2017
5
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