免疫荧光法检测抗伤寒、副伤寒沙门菌IgM类抗体方法学研究

目的 尝试采用免疫荧光法检测抗伤寒、副伤寒沙门菌IgM类抗体,以期提高伤寒、副伤寒的血清学诊断水平。方法 用免疫荧光法检测85例经血培养确诊为伤寒或副伤寒的病人、20例正常人和51例其他发热病人血清中的抗伤寒、副伤寒沙门菌IgM类抗体。结果 本组实验敏感性为92.9％,特异性为90.1％,诊断指数为183。病程6天以内阳性率为90％。结论 免疫荧光法具有敏感性高、特异性强和早期检出等优点,对于伤寒、副伤寒的诊断有较高的临床价值。

血清胱蛋白抑制剂C在原发性高血压患者早期肾损害检测中的应用

肾脏病变是原发性高血压的并发症之一[1],寻找及时有效检测轻度肾功能损害的检测方法对控制原发性高血压患者肾脏损害的发展和治疗有重要意义.本文采用ELISA双抗体夹心法检测原发性高血压患者血中胱蛋白酶抑制剂C(CystatinC,CysC)的浓度并与临床常规肾功能指标尿素氮(Bun)、肌酐(Cr)作比较,旨在寻找简便、灵敏并能早期发现肾脏损害的指标.

1682例血培养及药敏分析

１６８２例血培养及药敏分析费樱，韦树丰，万珊（贵阳医学院临床检验系）血培养是诊断菌血症的重要手段，其阳性率的高低及药敏试验的准确性对临床治疗有很大影响。本文报道了１６８２例血培养的结果。采用硫酸镁肉汤作为增菌液，共检出细菌２３７株，检出率为１４％。其...

反复呼吸道感染患儿血清免疫球蛋白、IgG亚类及细胞免疫水平

目的探讨反复呼吸道感染(RRTI)与免疫球蛋白、IgG亚类及细胞免疫的关系,为临床治疗反复呼吸道感染提供一定的理论依据。方法RRTI患儿28例,男18例,女10例,平均年龄(3.70±1.44)岁;对照组30例,男15例,女15例,平均年龄(3.98±1.18)岁。采用免疫散射比浊法检测血清IgG﹑IgA、IgM及IgG亚类水平;采用流式细胞术检测CD3、CD4、CD8、CD19及CD16+56的表达。结果RRTI患儿血清IgG﹑IgA水平与对照组相比差异均无统计学意义(P均>0.05);IgM水平低于对照组(Z=3.149,P<0.01);RRTI患儿血清IgG2和IgG4水平较对照组明显降低(t=2.107,Z=2.916;P均<0.05);RRTI患儿淋巴细胞CD3﹑CD4较对照组明显降低(t=2.319,2.44,P均<0.05),余CD分子与对照组相比差异无统计学意义(P均>0.05)。结论RRTI患儿存在一定程度的体液免疫和(或)细胞免疫功能紊乱;对RRTI患儿同时检测总IgG、IgG亚类及细胞免疫功能具有重要的临床意义。

燃煤型慢性砷中毒患者免疫功能改变的观察

目的探讨燃煤型慢性砷中毒患者T淋巴细胞免疫功能的改变。方法选择贵州省兴仁县交乐乡病区有燃煤砷接触史,有慢性砷中毒症状,年龄在18～58岁的36例患者(男性19例、女性17例)和病区几公里以外的非燃用高砷煤的正常人(对照组)。抽取其外周血,采用单克隆抗体APAAP桥联酶标法进行T淋巴细胞亚群CD3+、CD4+、CD8+细胞检测。结果CD3+、CD4+细胞和CD4+/CD8+明显低于正常人(P<0.01),CD8+与正常人相比轻度增高。结论燃煤砷对T淋巴细胞免疫功能有明显的抑制作用,能使T淋巴细胞的细胞粘附分子减少,T淋巴细胞免疫活性及信号传递作用减弱,辅助性T淋巴细胞与细胞毒性T淋巴细胞间的平衡失调。

2008―2012年临床分离阴沟肠杆菌的分布及耐药性分析

目的了解我院2008年1月―2012年12月阴沟肠杆菌分离株的临床分布及耐药性特点,为临床合理选用抗菌药物提供参考依据。方法采用WHONET5.6软件回顾性分析5年内阴沟肠杆菌株的标本来源、感染科室分布及耐药状况。结果 5年内共分离出阴沟肠杆菌1068株,菌株来源以呼吸道标本、分泌物、尿液标本为主;临床感染主要分布于急诊外科、外科、内科、重症监护病房(ICU);药敏结果显示,5年内,阴沟肠杆菌对氨苄西林/舒巴坦的耐药率最高(>60.0%);对亚胺培南耐药率最低(<8.0%)。2009-2012年,除亚胺培南、氨苄西林/舒巴坦、复方磺胺甲噁唑、替卡西林/克拉维酸外,阴沟肠杆菌对其余11种抗生素的耐药率逐渐下降(P<0.05)。结论阴沟肠杆菌对临床常用抗菌药物的耐药率呈下降趋势;对于碳青霉烯类抗生素不敏感菌株的出现应引起重视。

戴氏虫草和粉被虫草多糖对巨噬细胞等活性的影响

目的研究虫草属新种 -戴氏虫草菌丝体胞外水溶性多糖 (CDP1)和粉被虫草菌丝体多糖 (CPP1)在体外对小鼠腹腔巨噬细胞 (MΦ)吞噬功能和脾细胞免疫功能的影响。方法 MTT比色法测定淋巴细胞增殖 ,孔雀绿比色法测定小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能 ,中性红比色法测定细胞毒淋巴细胞 (CTL)活性。结果 CDP1在正常情况下不能促进小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬功能 ,而 CPP1却有促进作用 ;在免疫抑制的情况下 ,一定浓度的戴氏虫草菌丝体胞外水溶性多糖和粉被虫草多糖能恢复提高吞噬功能。它们不仅能促进正常脾活化 T淋巴细胞的增殖 ,而且能恢复环磷酰胺和氢化可的松抑制免疫小鼠脾活化 T淋巴细胞的增殖。在合适的浓度下能增高小鼠脾 CTL 活性 ,同时在一定浓度下能恢复免疫抑制小鼠脾 CTL 活性。结论两者具有增强免疫功能的作用。

2012年3家教学医院无菌体液病原菌分布和耐药性

目的了解2012年中国西南地区三家教学医院临床分离自无菌体液病原菌的分布及耐药状况,为感染的预防与控制提供依据。方法运用WHONET5.5和SPSS16软件对3所西南地区三级甲等教学医院2012年无菌体液病原菌进行回顾性分析。结果脑脊液中共分离病原菌266株,包括革兰阳性菌161株、革兰阴性菌90株和真菌15株。分离最多的为凝固酶阴性葡萄球菌(CNS),其次为金黄色葡萄球菌和鲍曼不动杆菌。其他无菌体液标本(除脑脊液)中共分离病原菌720株,包括革兰阳性菌297株、革兰阴性菌411株和真菌12株。分离最多的为CNS、大肠埃希菌和克雷伯菌属。脑脊液标本中耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)和耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌(MRCNS)的检出率分别为39.1%和75.9%。其他无菌体液标本中MRSA和MRCNS的检出率分别为45.8%和78.9%。分离自无菌体液的肠球菌出现了对万古霉素和利奈唑胺耐药的现象,其中屎肠球菌对万古霉素的耐药率高达11.5%。在肠杆菌科细菌中大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌属细菌对亚胺培南的耐药率较低,而肠杆菌属细菌对亚胺培南的耐药率则较高(为23.5%)。非发酵菌对碳青霉烯类抗生素耐药率较高,其中鲍曼不动杆菌对亚胺培南的耐药率已大于60%。结论我国西南地区无菌体液病原菌构成与全国监测数据基本一致。无菌体液中MRSA检出率均低于全国监测水平,MRCNS检出率则较高。对万古霉素耐药的屎肠球菌分离率较高。非发酵菌特别是不动杆菌的耐药形势严峻。合理应用抗菌药物,加强医院感染控制应成为减少细菌耐药发生的重要策略。

耳廓假性囊肿免疫学病因的初步探讨

目的 探讨耳廓假性囊肿发病与全身免疫功能及局部免疫状态的关系。方法 采集４４ 例耳廓假性囊肿患者的囊液和外周静脉血标本，用免疫单扩散法分别检测囊液和血清中的抗体ＩｇＧ、ＩｇＡ、ＩｇＭ 和补体Ｃ３ 水平；用聚乙二醇比浊法分别检测囊液和患者血清中的免疫复合物含量；用聚合酶链反应检测囊液中巨细胞病毒ＤＮＡ；用免疫荧光技术检测囊液和血清中的抗核抗体，用间接荧光抗体检测法（ｉｎｄｉｒｅｃｔｉｍｍｎｏｆｌｕｏｒｅｓｃｅ ａｓｓａｙ，ＩＦＡ） 检查囊液和患者血清与健康小鼠耳廓冰冻组织切片的反应情况。结果 耳廓假性囊肿患者囊液中抗体ＩｇＧ、ＩｇＡ、ＩｇＭ 和补体Ｃ３ 水平均明显低于血清中者（ Ｐ＜ ０．０１），囊液和患者血清中均未检出免疫复合物，囊液中也未检测出巨细胞病毒ＤＮＡ；但在部分（３／１０） 患者囊液中发现了抗核抗体，在小鼠冰冻切片中发现了位于软骨组织上的抗原抗体复合物。结论 耳廓假性囊肿中部分患者可能是局限于耳廓的自身免疫性疾病，可能是由于自身抗体与耳廓组织发生自身免疫反应导致反应性渗出液在局部聚集形成囊肿。

类风湿性关节炎患者血清超氧化物歧化酶和血管性血友病因子水平变化及意义

目的探讨类风湿性关节炎(RA)患者血清超氧化物歧化酶(SOD)、血管性血友病因子(vWF)的水平变化及临床意义。方法选取2012年10月—2013年2月贵阳医学院附属医院门诊和住院病房确诊为RA的患者55例作为RA组,另选取同期在本院体检健康者30例作为对照组,采集两组受试者静脉血,采用生物素双抗体夹心酶联免疫吸附法(ELISA)检测血清SOD、vWF水平,并测定血清类风湿因子(RF)、C反应蛋白(CRP)水平。结果对照组血清SOD高于RA组,vWF低于RA组(P<0.05)。RA组患者中RF阳性42例(76.4%),阴性13例(23.6%);CRP阳性32例(58.2%),阴性23例(41.8%)。RF阳性与阴性者血清SOD和vWF比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。CRP阳性与阴性者血清SOD比较,差异无统计学意义(P>0.05);CRP阳性者血清vWF高于CRP阴性者(P<0.05)。RA患者血清SOD与vWF、RF、CRP均无相关关系(r=0.090、-0.072、-0.032,P>0.05);血清vWF与SOD、RF均无相关关系(r=-0.064、0.040,P>0.05),与CRP呈正相关(r=0.529,P<0.05)。结论 RA患者血清SOD水平下降,抗氧化能力减弱;血清vWF水平升高,可能存在血管内皮损伤。

PBL教学法结合传统讲授法在临床微生物学及检验教学中的应用

传统教学是采用LBL（lecture based learning,LBL）的教学模式,即以授课为基础的学习[1]。这种教学方式主要是以教师为主体,以讲课为中心,采取全程灌输教学。但随着医学科学、医学信息的迅猛发展和社会医学模式的改变,社会对医学学生的素质提出了更高的要求,低效传统的医学教学模式正,

FcγRⅡB_1介导的信号传导异常与SLE患者B细胞的过度活化

目的:观察系统性红斑狼疮(SLE)患者B细胞表面功能分子表达的特征及其功能状态,评价以FcγRⅡB1(CD32)为代表的B细胞自身抑制调节机制在SLE发病中的作用。方法:采用Ficoll密度梯度离心法分离出人外周血单个核细胞(PBMC),并以免疫磁珠法(MACS)分离纯化B细胞。采用荧光分光光度法检测B细胞受不同激活物刺激后细胞内钙([Ca2+]i)的反应。用ELISA法检测B细胞与刺激物共同培养后所分泌IgG的量。采用流式细胞术及间接免疫荧光染色法,检测B细胞膜表面CD32、CD19及IgM的表达水平。结果:(1)以羊抗人μ链的F(ab′)2片段及完整IgG分别刺激SLE患者B细胞时,其[Ca2+]i反应的比值显著低于类风湿性关节炎(RA)患者(P<0.05)及正常人对照(P<0.01)。(2)分别用葡萄球菌A蛋白(SPA)单独刺激与SPA和羊抗人μ链的完整IgG抗体共同刺激SLE患者的B细胞所分泌的IgG的比值,明显低于RA患者及正常人对照组(P<0.05)。(3)SLE患者与RA患者及正常对照组B细胞上CD19、CD32及IgM的表达无统计学意义(P>0.05)。结论:SLE患者B细胞上CD32抑制性信号传导的异常,可能是导致B细胞过度活化的重要机制。

妊娠期糖代谢异常与CAPN-10基因多态性及相关危险因素研究

目的研究妊娠期糖代谢异常发生与CAPN-10基因多态性之间的相关性,并探讨与妊娠期糖代谢异常相关的危险因素。方法应用聚合酶链式反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)技术;采用病例-对照研究的方法,对贵阳地区无血缘关系的100例妊娠期糖尿病孕妇(GDM组)、100例糖耐量受损孕妇(GIGT组)和100例糖耐量正常的妊娠妇女(NGT组,即对照组)的CAPN-10基因19、43及63位点进行单核苷酸多态性分析;采用Logistic回归对与妊娠期糖代谢异常发生、发展有关的危险因素进行相关性分析。结果 (1)CAPN-10基因43位点GG基因型频率分布在GDM组均显著高于NGT组,差异有统计学意义(P<0.01);G等位基因频率分布在GDM组均显著高于NGT组,差异有统计学意义(P<0.05);19位点和63位点的基因型频率、等位基因频率分布在GDM组、GIGT组与NGT组比较差异均无统计学意义;19、43、63位点的基因型频率、等位基因频率在GIGT组与GDM组间比较差异无统计学意义。(2)GDM组和GIGT组的年龄、孕期BMI、△BMI、FPG和2h-PG均较NGT组升高,差异有统计学意义(P<0.05)。(3)糖尿病家族史在GDM组较NGT组升高(22%vs 11%),差异有统计学意义(P<0.05)。(4)Logistic回归分析显示,CAPN-10基因SNP 43位点多态性、糖尿病家族史、△BMI、年龄均增加了妊娠期糖代谢异常发生的危险度。结论妊娠期糖代谢异常的发生可能与CAPN-10基因SNP 43位点G等位基因相关,而与16和63位点无关。CAPN-10基因SNP 43位点多态性、糖尿病家族史、△BMI和年龄是GDM发生的重要危险因素,可能增加了妊娠期糖代谢异常发生的危险性。

反复呼吸道感染患儿免疫球蛋白及IgG亚类的水平

目的:探讨反复呼吸道感染(RRTI)与免疫球蛋白、IgG亚类的关系,为治疗RRTI提供理论依据。方法:采用免疫散射比浊法,检测28例RRTI患儿IgG、IgA、IgM及IgG亚类水平并与对照组比较。结果:RRTI患儿血清IgG、IgA水平与对照组相比差异无显著性,血清IgM水平与对照组相比明显降低(t=-2.524,P<0.05);RRTI组血清IgG2和IgG4水平比对照组明显降低(t=-2.107,-2.72;P<0.05或P<0.01)。结论:RRTI患儿存在一定程度的免疫功能紊乱,检测血清总免疫球蛋白和IgG亚类可提高RRTI的诊断率。

类风湿性关节炎与转化生长因子β1基因多态性

目的探讨转化生长因子-β1(TGF-β1)基因第一外显子+869T/C多态性与贵州省汉族人群类风湿性关节炎(RA)的相关性。方法采用聚合酶链反应-限制性片断长度多态性(PCR-RFLP)技术,分析105例类风湿性关节炎患者及110例正常对照组的TGF-β1基因第一外显子+869T/C多态性。结果病例组与正常对照组+869T/C基因型频率分布的差异有统计学意义(P<0.05),+869 TT基因型RA组高于对照组(34.3%,27%),而+869 CC基因型明显低于正常对照组(16.2%,31%);病例组+869T/C位点的等位基因频率与正常对照组比较差异也有统计学意义(P<0.05),病例组T等位基因频率显著高于对照组(59%,48.2%),C等位基因频率低于对照组(41%,51.8%)。结论TGF-β1基因第一外显子+869T/C多态性与贵州省汉族人群类风湿性关节炎(RA)显著相关,T等位基因可能是类风湿性关节炎的易感基因。

IL-6与P-选择素在非小细胞肺癌中的表达及临床意义

目的探讨IL-6与P-选择素在非小细胞肺癌中的表达及其临床意义。方法 ELISA和免疫组化检测50例术前、术后3周内非小细胞肺癌患者外周血中IL-6与P-选择素的水平以及术后癌组织中和癌旁组织中的表达。结果 (1)肺组织中的IL-6表达明显高于癌旁组织(P<0.05)与吸烟指数和病情严重程度有关(P<0.05),与肿瘤大小和组织分型无关(P>0.05),免疫组化阳性表达者血清IL-6水平明显高于阴性患者;术后外周血IL-6与P-选择素的浓度明显低于术前,差异具有统计学意义(P<0.05)。(2)肺组织中的P-选择素表达明显高于癌旁组织(P<0.05),只与病理分期和组织类型有关(P<0.05),免疫组化阳性表达者血清P-选择素水平高于阴性患者,但差异无统计学意义(P>0.05)。(3)非小细胞肺癌患者外周血中IL-6与P-选择素的水平没有明显的相关性(r=0.424,P>0.05)。结论非小细胞肺癌患者体内存在的IL-6,P-选择素的高表达与肿瘤的发生发展有关;血清中升高的IL-6可能来源于肺癌肿瘤组织中IL-6的高表达。

2008-2014年某医院鲍曼不动杆菌的临床分布与耐药性变迁

目的:了解贵阳市某三甲医院鲍曼不动杆菌的临床科室分布及耐药性的变迁。方法:对2008-2014年贵阳市某三甲医院临床送检标本进行细菌鉴定和药敏试验,分析鲍曼不动杆菌检出率、主要标本来源、科室分布及对临床常用抗菌药物的耐药情况。结果:7年内共检出3 463株鲍曼不动杆菌,以分泌物中鲍曼不动杆菌的检出率最高,占12.15%;鲍曼不动杆菌的科室分布以重症监护室(ICU)和外科为主,分别占44.42%和33.15%;药敏结果显示,鲍曼不动杆菌对各类抗生素的耐药率表现为逐年升高,对亚胺培南、左氧氟沙星和替卡西林-克拉维酸耐药性升高最为明显。结论:鲍曼不动杆菌的临床检出率较高,该细菌耐药率呈逐年增加趋势,特别是对碳青霉烯类药物有较高耐药率。

新生儿脐血IL-10、IL-4、IgE水平在婴幼儿过敏性疾病中的变化及其关系研究

目的探讨患过敏性疾病的婴幼儿在出生时脐血IL-10、IL-4、IgE的变化及三者之间的关系。方法随机采集329份新生儿脐血标本,应用ELISA方法测定IL-10、IL-4、IgE水平。对329名新生儿进行随访,前瞻性地追踪观察各种过敏性疾病的发生情况。采用SPSS统计软件的单因素分析和多因素Logistic回归分析确定各种因素对过敏性疾病发生的影响。结果患过敏性疾病组脐血IL-4、IgE水平较未患过敏性疾病组明显增高(P均<0.01)。而IL-10水平较后者明显降低(P<0.01);患过敏性疾病患儿脐血的三种介质的相关分析显示:两两之间呈显著相关,即IL-4与IgE之间呈显著正相关(r=0.734,P<0.001);IL-10与IL-4呈显著负相关(r=-0.593,P<0.001);IL-10与IgE亦呈显著负相关(r=-0.694,P<0.001);Logistic回归分析结果表明阳性家族哮喘史、阳性家族过敏史、脐血中IL-4和IL-10四个因素与过敏性疾病的发生关系密切,其中阳性家族哮喘史的相对危险度最高。结论阳性家族过敏史、阳性家族哮喘史、脐血IL-4增高或IL-10降低是婴幼儿期过敏性疾病发生的重要危险因素。通过观察出生时新生儿脐血IL-4、IL-10、IgE水平的变化可预测婴幼儿过敏性疾病的发生。