干扰PAG1介导肿瘤相关巨噬细胞自噬状态提高放射抗拒喉鳞癌的放射敏感性研究

目的:探究鞘糖脂微结构域1相关磷酸化蛋白(PAG1)在喉鳞癌(LSCC)组织中的表达,以及干扰肿瘤相关巨噬细胞PAG1表达对放射抗拒喉鳞癌细胞敏感性的影响。方法:收集武汉市第一医院收治的40例LSCC肿瘤组织及邻近癌旁组织,免疫组织化学染色和RT-qPCR检测PAG1表达;将人单核白血病细胞株THP-1诱导为M2型肿瘤相关巨噬细胞,通过脂质体介导法将PAG1-siRNA转染至M2型肿瘤相关巨噬细胞,RT-qPCR和蛋白质印迹法检测转染效果,ELISA法检测巨噬细胞分泌相关细胞因子IL-6、IL-12、IL-4及IL-10含量;建立肿瘤相关巨噬细胞与放射抗拒人喉鳞癌细胞Hep-2max的共培养体系,培养4 d后收集Hep-2max细胞,经8 Gy X射线照射24 h后,MTT法检测细胞活性,流式细胞术和TUNEL染色检测细胞凋亡,免疫荧光染色和蛋白质印迹法检测细胞自噬水平。结果:喉鳞癌肿瘤组织中PAG1蛋白和mRNA表达水平显著高于癌旁组织(P<0.01);THP-1细胞诱导后呈不规则多边形,且胞体有尾足伸出,CD86表达减少,CD206表达明显增加(P<0.01),提示成功诱导肿瘤相关巨噬细胞;在PAG1-siRNA转染肿瘤相关巨噬细胞后,细胞中PAG1 mRNA和蛋白相对表达量较对照组均显著下降(P<0.01),培养液上清中IL-6和IL-12水平升高,IL-4和IL-10水平降低(P<0.01);诱导后的肿瘤相关巨噬细胞转染PAG1-siRNA与Hep-2max共培养,再经过8 Gy X射线照射,细胞活性降低(P<0.05),细胞凋亡率升高(P<0.01),TUNEL阳性率升高(P<0.01),同时,LC3蛋白绿色荧光强度明显减弱,细胞中Beclin-1蛋白表达水平下降(P<0.01),P62蛋白表达水平升高(P<0.01),LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ下调(P<0.01)。结论:干扰肿瘤相关巨噬细胞中PAG1表达可改变放射抗拒人喉鳞癌细胞自噬状态,增强放射抗拒人喉鳞癌细胞的放射敏感性,诱导放疗后细胞凋亡发生。

Testin基因对鼻咽癌5-8F细胞裸鼠移植瘤放疗敏感性的影响

目的探讨Testin基因(TES)对鼻咽癌5-8F细胞裸鼠移植瘤放疗敏感性的影响。方法将鼻咽癌5-8F细胞分为两组:未转染组(正常的5-8F细胞)和TES组(高表达TES的5-8F细胞),经过0、2、4、6、8 Gy放射剂量点照射后,进行细胞克隆形成实验,绘制生存曲线。为建立鼻咽癌5-8F细胞裸鼠移植瘤模型,将24只BALB/c Nude裸鼠随机均分为四组:未转染组(注射5-8F细胞液)、TES组(注射高表达TES的5-8F细胞液)、照射组(注射5-8F细胞液+局部照射)、TES照射组(注射高表达TES的5-8F细胞液+局部照射),每隔3天测量移植瘤长短直径,计算肿瘤体积并绘制移植瘤生长曲线,1月后处死小鼠,取肿瘤块称质量,流式细胞仪检测各组移植瘤中细胞凋亡情况。结果与未转染组比较,TES组细胞的存活率明显降低(P<0.01)。未转染组、TES组、照射组、TES照射组瘤体生长速度依次减慢、瘤体质量依次降低、细胞凋亡率依次增加。以TES照射组瘤体生长速度最慢、质量下降最大、细胞凋亡率最高,组间多重比较差异均有统计学意义(P<0.05)。结论Testin基因能有效提高体外培养的鼻咽癌5-8F细胞的放疗敏感性。

老年非变应性鼻炎患者焦虑抑郁状态分析与生活质量评估

目的研究老年非变应性鼻炎(non-allergic rhinitis,NAR)患者的焦虑抑郁状况及生活质量。方法病例组为老年NAR患者82例,选择同期健康老年人75名为对照组。病例组在治疗前后以及对照组均采用焦虑自评量表(self-rating anxiety scale,SAS)、抑郁自评量表(self-rating depression scale,SDS)以及鼻结膜炎生活质量调查量表(rhinoconjunctivitis quality of life questionnaire,RQLQ)进行问卷调查。结果病例组患者治疗前SAS评分(58.75±7.67)与SDS(54.86±6.81)评分指数均高于治疗后(49.07±6.89,48.91±6.08)和对照组(41.93±7.27,40.16±5.97)且治疗后SAS评分与SDS评分指数仍高于对照组(P均<0.01);病例组患者治疗前RQLQ各维度评分均高于治疗后和对照组且治疗后评分仍高于对照组(P均<0.01);与老年NAR患者焦虑情绪相关的生活质量维度包括鼻部症状、眼部症状、实际问题、非鼻眼症状、睡眠、日常生活、情感;与老年NAR患者抑郁情绪相关的生活质量维度包括睡眠、日常生活、情感。结论 NAR对老年患者的生活质量和情绪状态均造成了明显负面影响,药物治疗后患者的生活质量和情绪状态均有所改善但不能完全缓解。

耳内镜下应用纳吸棉联合布地奈德混悬液在Ⅰ型鼓室成形术中的临床疗效分析

目的分析耳内镜下应用纳吸棉联合布地奈德混悬液在干湿耳状态下行Ⅰ型鼓室成形术的疗效差异。方法前瞻性纳入2018年1月至2020年12月武汉市新洲区人民医院和黄石市中心医院收治的66例慢性化脓性中耳炎静止期患者。采用随机数字表法分为4组,干耳观察组17例[男11例,女6例,年龄(36.23±7.39)岁],干耳对照组19例[男12例,女7例,年龄(37.28±7.29)岁],湿耳观察组16例[男10例,女6例,年龄(37.12±7.26)岁],湿耳对照组14例[男9例,女5例,年龄(37.75±7.17)岁]。所有患者均行耳内镜下Ⅰ型鼓室成形术,干耳、湿耳观察组均在手术结束时给予纳吸棉联合布地奈德混悬液固定鼓室及外耳道。统计并比较4组患者术前咽鼓管功能,术前及术后1个月、3个月的炎症因子[血清白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、高敏C反应蛋白(hs-CRP)]水平以及气骨导差值,统计术后6个月的干耳率及干耳时间,术后6个月的鼓膜愈合率和听力改善率。计量资料采用t检验或方差分析,计数资料采用卡方检验或Fisher确切概率法。结果4组患者术前咽鼓管功能差异无统计学意义(P>0.05)。4组患者术后1个月和术后3个月的血清IL-6、TNF-α、hs-CRP水平高于术前、气骨导差低于术前,术后3个月血清IL-6、TNF-α、hs-CRP水平和气骨导差低于术后1个月;术后1个月和术后3个月时,干耳观察组和湿耳观察组患者血清IL-6、TNF-α、hs-CRP水平和气骨导差低于另外两组,差异均有统计学意义(均P<0.05)。术后6个月干耳观察组干耳率为16/17(94.12%),干耳对照组17/19(89.47%),湿耳观察组15/16(93.75%),湿耳对照组13/14(92.86%),4组差异无统计学意义(P=1.000)。术后干耳观察组干耳时间为(9.24±3.26)周,干耳对照组(13.37±3.75)周,湿耳观察组(9.11±3.17)周,湿耳对照组(14.21±3.65)周,干耳观察组和湿耳观察组短于另外两组,差异均有统计学意义(均P<0.05)。术后6个月干耳观察组鼓膜愈合率为17/17(100.00%),干耳对照组18/19(94.73%),湿耳观察组15/16(93.75%),湿耳对照组14/14(100.00%),4组差异无统计学意义(P=0.849)。术后6个月4组听力改善率分别为干耳观察组12/17(70.59%),干耳对照组7/19(36.84%),湿耳观察组13/16(81.25%),湿耳对照组6/14(42.86%),其中干耳观察组和湿耳观察组优于另外两组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论对于不伴有听骨链病变的静止期慢性化脓性中耳炎,术前湿耳状态时进行耳内镜下Ⅰ型鼓室成形术鼓膜愈合率及干耳率同干耳状态无明显差异,术中应用纳吸棉联合布地奈德混悬液,能加快患者体内炎性因子下降,缩短干耳时间和提高听力改善程度。

耳内镜下活力碘与达克宁霜联合治疗真菌性外耳道炎69例分析

目的 探讨提高真菌性外耳道炎疗效的诊治方法。方法 收集我院2010年6月至2012年9月应用活力碘、达克宁霜在耳内镜下诊治真菌性外耳道炎69例患者资料进行回顾性分析。结果 本组随访6-12个月,治愈45例,显效16例,好转5例,无效3例,有效率95.65%。结论 耳内镜下活力碘与达克宁霜联合治疗真菌性外耳道炎疗效确切。

鼻内镜下上颌窦开窗术治疗慢性牙源性上颌窦炎32例临床分析

目的 探讨慢性牙源性上颌窦炎的诊治方法和疗效。方法 收集2012年5月至2013年5月就诊于我科并应用鼻内镜经中鼻道上颌窦开窗术治疗慢性牙源性上颌窦炎32例患者资料进行回顾性分析。结果 随访6-12个月,治愈28例,好转4例,无效0例。结论 鼻内镜下上颌窦开窗术治疗慢性牙源性上颌窦炎同期或随访处理上颌牙病变,疗效确切。

外路泪囊鼻腔吻合术联合鼻内镜治疗慢性泪囊炎59例报告

慢性泪囊炎是眼科常见病，多继发鼻泪管狭窄或者阻塞后，因泪液滞留于泪囊内，伴发细菌感染而引起，多见于农村女性。外路泪囊鼻腔吻合术是治疗慢性内囊炎的传统方法，也是经典术式，成功率高，我们在术前、术中、术后结合鼻内镜的应用治疗慢性泪囊炎，取得了满意的疗效。现收集我院自2009年8月至2012年10月开展的59例报告如下。

鼻内镜下改良下鼻甲成形术治疗慢性肥厚性鼻炎的临床分析

目的探讨鼻内镜下改良下鼻甲成形术、鼻内镜下下鼻甲部分切除术在慢性肥厚性鼻炎中的疗效。方法收集我院耳鼻喉科的80例下鼻甲肥大且鼻部CT显示下鼻甲骨肥厚或下鼻甲骨高拱的慢性肥厚性鼻炎患者。所有患者随机分为A组和B组,每组各40例。A组进行鼻内镜下改良下鼻甲成形术,B组进行鼻内镜下下鼻甲部分切除术。比较两组临床疗效。结果A组术后鼻腔通气时间、黏膜恢复时间、住院时间、术后药物治疗时间和病情恢复时间低于B组,差异具有统计学意义(P均<0.05)。术后并发症发生率A组少于B组,差异具有统计学意义(P<0.05)。随访观察3个月,A组有效率97.5%,B组有效率87.5%;随访6个月时,A组有效率100%,B组有效率85%。随访3个月、6个月时,A组有效率显著高于B组(P<0.05)。结论鼻内镜下改良下鼻甲成形术治疗慢性肥厚性鼻炎的效果显著优于鼻内镜下下鼻甲部分切除术,值得临床推广。

改良泪囊瓣后的鼻内镜下泪囊鼻腔造孔术治疗体会(附18例报告)

目的探讨改良泪囊瓣后的鼻内镜下泪囊鼻腔造孔术的临床疗效。方法对18例患者行改良泪囊瓣后的鼻内镜下泪囊鼻腔造孔术,术后随访6个月至1年,总结其临床疗效。结果患者随访半年以上,所有患者溢泪好转,造瘘口通畅,治愈率100%,无并发症发生。结论鼻内镜下泪囊鼻腔造孔术治疗慢性泪囊炎疗效好,改良泪囊瓣后的鼻内镜下泪囊鼻腔造孔术能有效预防造瘘口肉芽组织增生导致的造瘘口狭窄闭锁。

Testin基因对鼻咽癌5-8F细胞放疗敏感性的研究

目的探讨Testin(TES)基因对鼻咽癌5-8F细胞放疗敏感性的影响。方法鼻咽癌5-8F细胞系(未转染组)、稳定转染空载体的5-8F细胞系(空载体组)、稳定转染TES的5-8F细胞系(TES组),经过0、2、4、6、8、10 Gy放射剂量照射后,进行细胞克隆形成实验,使用Linearquadratic模型计算拟合剂量生存曲线,计算放射增敏比(SER)。MTT实验检测放疗后细胞增殖能力,流式检测细胞凋亡变化。结果分别行放射剂量2、4、6、8、10 Gy照射后,TES组与未转染组和空载体组间细胞增殖率比较,差异有统计学意义(F=24.157、47.429、78.641、45.215、16.751,P均<0.01)。TES组的生存曲线较空载体组和未转染组下移,克隆形成率明显下降,说明TES可提高鼻咽癌细胞的放疗敏感性。MTT实验结果显示,经过6 Gy剂量放疗照射后,与空载体组和未转染组比较,TES组细胞增殖下降,且于第3天下降明显,显著低于其他两组(F=15.743,P<0.01),说明过表达TES能够抑制放疗后鼻咽癌5-8F细胞株的增殖。流式实验结果:未转染组、空载体组和TES组细胞凋亡率分别为(9.43±0.679)%、(10.143±0.415)%、(23.143±1.172)%,组间比较差异有统计学意义(F=115.451,P<0.01),说明过表达TES能够有效增加放疗后5-8F细胞的凋亡。结论TES基因可有效提高体外培养的鼻咽癌5-8F细胞的放疗敏感性。