抗肿瘤肽QX3-1融合蛋白在大肠埃希菌中表达条件的优化

优化抗肿瘤肽QX3-1融合蛋白在大肠埃希菌中的表达条件,提高表达量。从培养基、诱导温度、诱导剂浓度和诱导时间4个单因素实验入手,优化QX3-1融合蛋白的表达条件,通过聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDSPAGE)和Band Scan凝胶分析软件分析QX3-1融合蛋白的表达量。p ED-QX 3-1/BL21重组菌在LB、大豆肉汤、TB和酪蛋白胨(自制) 4种培养基中,于酪蛋白胨培养基中的表达量最高;在20、25和37℃三种诱导温度下,于37℃环境中表达量最高;在1、5、10、15和20 mmol/L乳糖浓度的诱导下,于10 mmol/L乳糖诱导最佳;在30 h的诱导时间内,于第24小时,融合蛋白的表达量最高。从培养基、诱导温度、诱导剂浓度和诱导时间4个变量中筛选出适合QX3-1融合蛋白表达的最佳组合,使融合蛋白的表达量达到了31. 2%,相比未优化前提高了近一倍。

沙蚕EN制剂改善肝癌前病变小鼠代谢的研究

目的:研究双齿围沙蚕肠内营养制剂对肝癌前病变小鼠营养代谢和炎症反应的影响。方法:用二乙基亚硝胺诱发和制备早期肝癌前病变小鼠模型,设置沙蚕处理组1(A)、沙蚕处理组2(B)、沙蚕处理组3(C)、阳性对照组(D)、空白组(E)和对照组(F)。分别在处理D7、D14、D21和D28采血取样,检测血浆营养指标、炎症指标、肝功能指标,最后观察肝脏病理变化。结果:双齿围沙蚕肠内营养制剂处理期间,小鼠体重逐渐增加,D28,A组比E组体重增加61.49%;A组的TP、Alb含量都显著高于E组但低于F组,D28,A组分别增加30.32%和13.68%。D7、D14、D21和D28,A组的TNF-α水平显著低于E,D28,A组比E组减少30.15%;D28,A组比E组的IL-2显著升高27.77%。D7、D14、D21和D28,A组的ALT和AST水平与E组相比显著降低,D28,A组分别降低83.75%和128.20%;A组与E组相比具有良好的肝组织形态学特征。结论:以双齿围沙蚕为蛋白源的肠内营养制剂作为特殊医学用途配方食品,能促进肝癌前病变实验动物体内合成TP和Alb等蛋白质,改善早期肝癌前病变小鼠的营养代谢状况,缓解肝癌前病变实验动物TNF-α、IL-2等炎症反应,减轻ALT和AST反映出的肝癌前病变实验动物肝组织形态学受损。当沙蚕蛋白含量为肠内营养制剂蛋白总量的60%时,双齿围沙蚕肠内营养制剂营养功效显著。

强效抗氧化活性虾青素的发现及其生物合成菌海洋红酵母培养条件优化的研究

目的确认一株极地海洋红酵母(Rhodotorula sp.)产生典型次生代谢产物虾青素和优化其产生虾青素的培养条件.方法海洋红酵母保存菌株经过活化培养和发酵培养,单因素和响应面试验设计优化发酵条件,采用高效液相色谱法(HPLC)分析海洋红酵母次生代谢产物,用标准样品鉴定海洋红酵母次生代谢产物;测定海洋红酵母源虾青素的抗氧化能力.结果从极地分离源分离的一株海洋红酵母产出多种代谢产物,其主要代谢产物是虾青素.单因素实验表明硫酸锌添加量为100.00 mg/L,虾青素产出量最高为24.10 mg/ml;乙酰水杨酸添加量为100.00 mg/L,虾青素产量最高为25.00 mg/ml,发酵时间为5 d,虾青素产量最高为25.30 mg/ml.响应面实验结果显示,发酵时间为6.64 d、硫酸锌添加量为113.50 mg/L、乙酰水杨酸添加量为111.00 mg/L,液体培养海洋红酵母产出虾青素27.00 mg/ml.海洋红酵母源虾青素与Vc等多种抗氧化剂比较具有显著抗氧化活性.结论从极地分离源发现的主要次生代谢产物是虾青素的极地海洋红酵母,用硫酸锌和乙酰水杨酸调控虾青素的生源合成能促进虾青素产生,为大规模生产虾青素提供了可行性.