氧化苦参碱对高脂诱导胰岛素抵抗ApoE^(-/-)小鼠肝脏脂代谢相关基因的影响

目的探讨氧化苦参碱对高脂诱导胰岛素抵抗Apo E^(-/-)小鼠肝脂代谢相关基因的影响。方法 17只♂C57BL/6J小鼠作为对照组,给予正常饮食;68只♂Apo E^(-/-)小鼠,给予高脂饮食,饲养16周后,将小鼠分为模型组、氧化苦参碱低、中、高剂量组。给药8周,测定小鼠体重和一般生化指标。荧光定量PCR和Western blot方法检测肝组织LPL、FAT/CD36、CPT1、UCP2、SREBP-1c、FAS、ACC m RNA和蛋白表达水平。结果氧化苦参碱能不同程度的降低体重、FBG、TC、TG、FFA、FINS、HOMA-IR,升高GIR,改善胰岛素的抵抗。同时降低了LPL、FAT/CD36、UCP2、SREBP-1c、FAS、ACC m RNA和蛋白的表达水平,升高了CPT1表达水平。结论氧化苦参碱能够通过脂转运、氧化、合成3个环节较全面的调节肝脂质代谢,改善高脂诱导的Apo E^(-/-)小鼠的胰岛素抵抗。

氧化苦参碱对高脂饮食诱导胰岛素抵抗载脂蛋白E基因敲除小鼠肝脏胆固醇代谢调控基因的影响

目的探讨氧化苦参碱对高脂饮食诱导载脂蛋白E(ApoE)基因敲除(ApoE^(-/-))小鼠模型肝脏胆固醇代谢调控基因的影响。方法 2014年4月—2015年1月,将17只SPF级C57BL/6J小鼠作为正常组(NC组),给予基础饲料饲养;68只SPF级ApoE^(-/-)小鼠给予高脂饲料饲养;均喂养16周后,再将高脂饲料喂养的ApoE^(-/-)小鼠按照随机数字表法分为胰岛素抵抗模型组(IR组)、氧化苦参碱低剂量组(OXYL组)、氧化苦参碱中剂量组(OXYM组)、氧化苦参碱高剂量组(OXYH组),每组17只,OXYL、OXYM、OXYH组分别给予氧化苦参碱25 mg·kg^(-1)·d^(-1)、50mg·kg^(-1)·d^(-1)、100 mg·kg^(-1)·d^(-1)连续灌胃8周,各组实验过程中均给予等体积的纯水。分别检测各组小鼠葡萄糖输注率(GIR),空腹血糖(FBG)水平,血清总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)水平,空腹胰岛素(FINS)水平,并计算胰岛素抵抗指数(HOMA-IR),并检测肝脏组织TC水平。采用RT-q PCR和Western blotting法检测肝脏组织固醇调节元件结合蛋白-2(SREBP-2)、固醇调节元件结合蛋白裂解激活蛋白(SCAP)、胰岛素诱导基因-2(INSIG2)、羟甲基戊二酸单酚辅酶A还原酶(HMGCR)、低密度脂蛋白受体(LDLr)mRNA及其蛋白水平。结果 IR组FBG水平,血清TC、TG、LDL-C、HDL-C水平均高于NC组(P<0.05);OXYL组血清TC、TG、LDL-C、HDL-C水平均低于IR组,OXYM、OXYH组FBG水平,血清TC、TG、LDL-C、HDL-C水平均低于IR组(P<0.05)。IR组GIR低于NC组,OXYL组、OXYM组、OXYH组GIR均高于IR组(P<0.05)。IR组FINS水平、HOMA-IR均高于NC组(P<0.05);OXYL组HOMA-IR低于IR组(P<0.05);OXYM、OXYH组FINS水平、HOMA-IR均低于IR组(P<0.05)。IR组肝脏组织SREBP-2、HMGCR、LDLr mRNA及其蛋白水平低于NC组,SCAP、INSIG2 mRNA及其蛋白水平高于NC组(P<0.05);OXYL组肝脏组织LDLr mRNA及其蛋白水平高于IR组(P<0.05);OXYM、OXYH组SREBP-2、HMGCR、LDLr mRNA及其蛋白水平高于IR组,SCAP、INSIG2 mRNA及其蛋白水平低于IR组(P<0.05)。结论氧化苦参碱能通过调控肝脏胆固醇相关基因的表达改善高脂饮食诱导ApoE^(-/-)的血糖、血脂和胰岛素抵抗情况。

二甲双胍对2型糖尿病患者糖脂代谢、Socs3及炎性因子的影响

目的探讨二甲双胍对糖尿病患者糖脂代谢、Socs3及炎性因子的影响。方法筛选初发2型糖尿病(T2DM)110例,随机分为2型糖尿病单纯饮食控制+运动组55例(T2DM组),和在注意饮食运动基础上口服盐酸二甲双胍治疗组55例(T2DM+MET组)。另选同期体检正常者57例作为对照组,观察2型糖尿病组FBG、HbA1c、BMI、TG、TC、HDL-C、LDL-C、TNF-α、IL-6、CRP、MCP-1及SOCS3水平,明确Socs3及炎性因子与胰岛素抵抗相关性及Logistic回归分析明确胰岛素抵抗独立危险因素,并观察二甲双胍干预后上述糖脂代谢、Socs3及炎性因子指标变化。结果对照组和T2DM组之间年龄、性别差异无统计学意义(P>0.05),T2DM组比NC组BMI、TC、TG、LDL-C、HbA1c、FBG、HOMA-IR、Socs3、CRP、IL-6、TNF-α、MCP-1明显升高,且差异有统计学意义(P<0.05),但2组间HDL-C差异无统计学意义(P>0.05)。Socs3及炎性因子CRP、IL-6、TNF-α、MCP-1与胰岛素抵抗指数均呈正相关(P<0.01)。二元Logistic回归分析结果表明,矫正性别、年龄等混杂因素后,Socs3、TNF-α、TG、LDL-C是胰岛素抵抗的独立危险因素(P<0.05)。二甲双胍治疗前2组年龄、HbA1c、BMI、病程、TC、TG、Socs3差异均无统计学意义(P>0.05),二甲双胍治疗3个月后,与T2DM饮食运动组比较,T2DM饮食运动+MET组BMI、HbA1c、TC、TG、Socs3水平明显下降,差异均有统计学意义(P<0.05)。二甲双胍治疗前2组2型糖尿病受试者CRP、IL-6、TNF-α、MCP-1水平比较,差异无统计学意义(P>0.05)。二甲双胍治疗后,与T2DM饮食运动组比较,T2DM饮食运动+MET组IL-6、TNF-α、MCP-1水平显著下降,且差异有统计学意义(P<0.05),CRP水平无明显变化(P>0.05)。结论二甲双胍可降低血炎性因子水平,改善胰岛素抵抗。

氧化苦参碱改善棕榈酸诱导的HepG2细胞脂质沉积及氧化应激的研究

目的:观察氧化苦参碱对高脂诱导的HepG2细胞脂质沉积的干预作用及其机制。方法:高脂干预法培养HepG2细胞建立非酒精性脂肪性肝(nonalcoholic fatty liver disease,NAFLD)体外细胞模型。造模成功后随机分为高脂组(Pa组)、氧化苦参碱组(Omt组)和二甲双胍组(Met组),同时设立正常培养基对照组(N组)。药物干预48 h后收集细胞,利用相应试剂盒及2,7-二氯氢化荧光素二乙酸酯(2,7-dichlorofuorescin diacetate,DCFH-DA)荧光探针评估各组细胞内的脂质沉积水平和氧化应激状态;通过PCR和Western blot分别检测参与脂代谢关键分子的基因和蛋白表达。结果:与Pa组相比,氧化苦参碱及二甲双胍干预后可显著降低细胞内甘油三酯(triglyceride,TG)含量(POmt=0.023,PMet=0.043),上调肉碱脂酰转移酶-1(carnitine palmitoyl transferase-1,CPT-1)的m RNA表达(POmt=0.000,PMet=0.000),下调脂肪酸转位酶(fatty acid translocase,FAT/CD36)的m RNA(POmt=0.000,PMet=0.000)及蛋白表达水平(POmt=0.000,PMet=0.000);DCFH-DA荧光染色、总超氧化物歧化酶(total superoxide dismutase,T-SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(glutathion peroxidase,GSH-Px)及丙二醛(malondialdehyde,MDA)的测定结果显示药物干预可显著增强T-SOD(POmt=0.007,PMet=0.007)及GSH-Px(POmt=0.183,PMet=0.020)的活性,减少活性氧(reactive oxygen species,ROS)和MDA(POmt=0.016,PMet=0.001)的生成。结论:氧化苦参碱可改善高脂诱导的HepG2细胞细胞内脂质沉积,可能是通过改善脂代谢及细胞内氧化应激状态实现的。

利拉鲁肽治疗2型糖尿病合并肥胖疗效观察

目的:观察利拉鲁肽治疗2型糖尿病(T2DM)合并肥胖患者的降糖及减重作用,探讨合并肥胖的T2DM新的治疗思路。方法:超重和肥胖的T2DM患者38例,入组前口服降糖药物或应用胰岛素治疗血糖控制不达标,按体质指数(BMI)分为两组,A组为超重组(BMI 24~28 kg·m^(-2))18例、B组为肥胖组(BMI≥28 kg·m^(-2))20例,两组均加用利拉鲁肽治疗12周,观察治疗前后两组患者身高、体质量和BMI;2 h空腹和餐后2 h血糖(FPG,2h PG)、糖化血红蛋白(Hb A1c),空腹(FINS)和餐后2 h胰岛素(2h INS)、空腹(FCP)和餐后2 h C肽(2h CP);以及胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)和胰岛β细胞分泌功能指数(HOMA-β)。结果:治疗后两组患者的Hb A1c、FBG、2h PG、FCP、2h CP及HOMA-β、HOMA-IR等指标均较治疗前明显改善(P<0.01);两组上述指标组间比较无明显差异(P>0.05)。治疗后B组患者体质量和BMI较治疗前下降明显(P<0.01),而A组体质量和BMI无明显改变(P>0.05)。结论:超重和肥胖T2DM患者,加用利拉鲁肽治疗后,可有效地控制血糖,改善胰岛素抵抗,而肥胖患者体质量较治疗前有明显下降。

代谢性炎症反应与胰岛素抵抗关系研究进展

随着糖尿病患病人数骤增、严重并发症及较高的致残率和致死率,2型糖尿病已成为重要的慢性病之一。肥胖、遗传和环境因素被认为是2型糖尿病的主要发病因素,其与外周组织胰岛素抵抗和脂肪组织炎症状态的发展紧密相关。肥胖者体内的炎症反应与传统炎症反应不同,其在2型糖尿病的发展中具有双重作用。该文对代谢性炎症反应及其特征、炎症反应相关的胰岛素抵抗机制及抗炎治疗新进展进行简要综述,以期为糖尿病的早期诊治提供参考。

肝脏因子在2型糖尿病中的作用

大量实验研究表明,肝脏脂肪堆积与2型糖尿病(T2DM)的发展有关。在非酒精性脂肪肝(NAFLD)患者体内存在葡萄糖及脂代谢的紊乱,而目前已知一些仅由肝脏或主要由肝脏分泌的蛋白质直接影响葡萄糖及脂代谢,与脂肪因子和肌肉因子类似,这些蛋白质被称为肝脏因子。包括第一个被发现的肝脏因子胎球蛋白A在内,这些肝脏因子在能量代谢以及胰岛素敏感性的调节中发挥着重要作用,研究它们在T2DM中的作用将为治疗T2DM提供新的思路。

MicroRNA-802对胰岛素抵抗的骨骼肌细胞PI3K/Akt通路的影响

目的探讨胰岛素抵抗的骨骼肌细胞模型中miR-802的表达及其与糖代谢及胰岛素敏感性的关系。方法复苏L6成肌细胞,培养并诱导分化为L6肌细胞,采用高脂(含0.25 mmol/L棕榈酸的培养基)孵育,随机分为正常对照组与棕榈酸组,24 h后分别测定培养基中葡萄糖浓度,判断造模是否成功。成功建立大鼠L6成肌细胞的胰岛素抵抗模型后,通过转染miR-802的模拟物或抑制剂来调节miR-802的表达,分为以下5组:正常对照组、棕榈酸组、棕榈酸+miR-802模拟物组、棕榈酸+miR-802抑制剂组、棕榈酸+转染对照组。采用RT-PCR及Western blotting检测胰岛素信号通路磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)、蛋白激酶B(又称Akt)及葡萄糖转运蛋白(GluT4)的mRNA及蛋白表达情况。结果与正常对照组(1.458±0.264)相比,棕榈酸组miR-802 mRNA表达(3.108±0.513)明显升高。与棕榈酸组和棕榈酸+转染对照组相比,棕榈酸+miR-802模拟物组的miR-802 mRNA表达明显升高(3.108±0.513,3.442±0.104 vs.11.743±0.933),PI3K(0.724±0.032,0.682±0.059 vs.0.494±0.025)、Akt(0.819±0.044,0.718±0.033 vs.0.754±0.028)及GluT4(0.719±0.038,0.666±0.056 vs.0.427±0.031)mRNA表达明显下降,p-PI3K/PI3K(0.349±0.056,0.351±0.019 vs.0.195±0.026)、p-Akt/Akt(0.639±0.002,0.557±0.04 vs.0.261±0.075)及GluT4(0.648±0.028,0.590±0.026 vs.0.413±0.096)蛋白表达水平明显下降(P<0.01)。与棕榈酸组及棕榈酸+转染对照组相比,棕榈酸+miR-802抑制剂组的miR-802 mRNA表达明显下降(3.108±0.513,3.442±0.104 vs.1.069±0.056),PI3K(0.724±0.032,0.682±0.059 vs.0.887±0.016)、Akt(0.819±0.044,0.718±0.033 vs.0.814±0.026)及GluT4(0.719±0.038,0.666±0.056 vs.0.908±0.054)mRNA表达升高,且p-PI3K/PI3K(0.349±0.056,0.351±0.019 vs.0.494±0.012)、p-Akt/Akt(0.639±0.002,0.557±0.04 vs.0.951±0.031)及GluT4(0.648±0.028,0.590±0.026 vs.0.756±0.007)蛋白表达水平也明显升高(P<0.01)。结论MiR-802调节了骨骼肌细胞胰岛素的敏感性及葡萄糖的转运,可能是2型糖尿病的潜在治疗靶点。

2型糖尿病患者中性粒细胞与淋巴细胞比值、血小板与淋巴细胞比值、单核细胞与淋巴细胞比值、C反应蛋白与泌汗功能的相关性研究

目的探讨T2DM患者中性粒细胞与淋巴细胞比值(NLR)、血小板与淋巴细胞比值(PLR)、单核细胞与淋巴细胞比值(MLR)、C-RP与泌汗功能的相关性。方法选取2020年1~12月于河北省人民医院内分泌科住院的T2DM患者404例。根据双手皮肤电导率(HESC)和双足皮肤电导率(FESC)分为泌汗功能正常组(Con,n=250)、中度异常组(M,n=115)和重度异常组(S,n=39)。分析NLR、PLR、C-RP与泌汗功能的相关性。结果Con、M、S组年龄、血肌酐(Scr)、C-RP、NLR、PLR、MLR依次升高(P<0.05),eGFR、HESC、FESC依次降低(P<0.05)。Spearman相关分析显示,HESC、FESC与eGFR呈正相关(P<0.01),与年龄、DM病程、BUN、Scr、血尿酸、NLR、PLR、MLR、C-RP呈负相关(P<0.05)。Logistic回归分析显示,NLR、PLR、C-RP是T2DM患者泌汗功能的影响因素。受试者工作特征(ROC)曲线显示,NLR、PLR、C-RP判定HESC和FESC>60μs的ROC曲线下面积分别为0.732、0.658、0.816,NLR、PLR、C-RP对DM合并泌汗功能异常有重要诊断价值。当NLR、PLR、C-RP水平切点分别为2.085、128.125、3.585时,其诊断效率最高,灵敏度分别为74.7%、61.0%、61.7%,特异度分别为61.6%、61.2%、85.2%。结论T2DM患者NLR、PLR、C-RP水平升高与泌汗功能障碍密切相关,是重要影响因素。

二甲双胍通过AMPK/SIRT3通路促进脂肪酸培养的肌细胞自噬

目的探讨二甲双胍对高脂培养肌细胞自噬的作用及可能机制。方法用不同浓度棕榈酸(0.1、0.2、0.4、0.6 mmol/L)及二甲双胍(0.5、1、2、5、10 mmol/L)分别干预L6肌细胞24 h,CCK 8法检测肌细胞的存活率。棕榈酸和二甲双胍干预肌细胞24 h后,Western印迹检测微管相关轻链蛋白3(LC3Ⅱ)、自噬相关蛋白Beclin 1、泛素结合蛋白p62、沉默信息调节因子2相关酶3(SIRT3)蛋白表达及腺苷酸活化的蛋白激酶(AMPK)磷酸化水平,RT-PCR技术检测上述基因的mRNA表达水平。结果棕榈酸剂量依赖性地降低肌细胞活力,2 mmol/L二甲双胍显示最佳的对抗作用。0.4 mmol/L棕榈酸和2 mmol/L二甲双胍干预肌细胞24 h后,棕榈酸显著减少LC3Ⅱ/LC3I、Beclin 1、SIRT3的蛋白及mRNA表达水平,降低AMPK磷酸化水平,显著增加p62的蛋白及mRNA表达水平(均P<0.05),棕榈酸的这些作用可被二甲双胍所对抗(均P<0.05)。结论二甲双胍可能通过刺激AMPK的磷酸化增加SIRT3的表达而增强脂肪酸培养的肌细胞自噬。

网膜素与代谢综合征

网膜素是由内脏脂肪组织产生的一种脂肪因子，具有抗炎、增加胰岛素敏感性、抗糖尿病、抗动脉粥样硬化和抗心血管疾病的作用。在肥胖、胰岛素抵抗、炎性反应状态下它的表达明显降低。网膜素与肥胖、糖尿病、心血管疾病的发生密切相关。网膜素的这些作用使其成为治疗这些疾病的一个新靶点。

视网膜血管直径与糖尿病肾脏病的相关性研究

目的探讨视网膜血管直径与糖尿病肾脏病(DKD)的相关性。方法选择2021年1至12月在河北省人民医院内分泌科住院治疗的309例2型糖尿病(T2DM)患者作为研究对象。收集患者的身高、体重、体重指数(BMI)、收缩压、舒张压、糖化血红蛋白(HbA1c)、血脂、尿微量白蛋白/肌酐比值(UACR)、估算的肾小球滤过率(eGFR)等指标。根据UACR和eGFR将T2DM患者分为非DKD组(212例)和DKD组(97例)。所有患者进行免散瞳彩色眼底照相, 采用全自动计算机图像分析软件测量视网膜血管参数(视网膜颞侧上静脉直径、鼻侧上动脉直径), 计算视网膜中央静脉等效值(CRVE)等指标。进一步按照视网膜颞侧上静脉直径水平的五分位数分为Q1组(<136.13 μm, 68例), Q2组(136.13~148.42 μm, 56例), Q3组(148.43~160.72 μm, 62例), Q4组(160.73~177.12 μm, 64例)和Q5组(>177.12 μm, 59例)。组间差异的比较采用独立样本t检验、Mann-WhitneyU检验。采用多因素logistic回归分析法探究视网血管直径与DKD的关系。结果 DKD组视网膜颞侧上静脉直径[分别为(161.87±22.47)和(152.93±21.98)μm]、CRVE[分别为(191.75±20.18)和(187.09±17.52)μm]均显著高于非DKD组, 鼻侧上动脉直径[分别为(84.62±15.09)和(88.15±13.94)μm]显著低于非DKD组(均P<0.05)。多因素logisitc回归分析结果显示, 视网膜颞侧上静脉扩张、CRVE升高是DKD的独立影响因素(OR=1.187, 95%CI 1.068~1.320, P=0.001;OR=1.018, 95%CI 1.002~1.034, P=0.027)。多因素logistic回归分析结果显示, 以Q1组为参照, Q2、Q4、Q5组视网膜颞侧上静脉扩张是DKD发生的影响因素(OR=5.194, 95%CI 2.025~13.326;OR=3.477, 95%CI 1.360~8.891;OR=4.895, 95%CI 1.912~12.530;趋势P值=0.007)。结论视网膜颞侧上静脉扩张、CRVE升高是T2DM合并DKD患者的独立影响因素。