超高效液相色谱-四极杆/静电场轨道阱高分辨质谱法测定毒蘑菇中5种鹅膏肽类毒素

鹅膏肽类毒素是毒蘑菇中毒事件中最常见的致死毒素,因此研究建立了超高效液相色谱-四极杆/静电场轨道阱高分辨质谱检测毒蘑菇中5种鹅膏肽类毒素的方法。样品经纯水提取后,以乙腈-5 mmol/L乙酸铵水溶液(含0.1%甲酸)为流动相进行梯度洗脱,用HSS T3色谱柱(100 mm×2.0 mm, 2.1μm)对待测组分进行色谱分离;采用可加热电喷雾电离源(HESI),全扫描/数据依赖二级质谱扫描(Full mass-ddMS^(2))模式对待测物进行定性分析;在目标离子选择性扫描(Targeted-SIM)模式下,以外标法对待测物进行定量测定。结果显示,5种鹅膏肽类毒素在1.0~20.0μg/L范围内均呈现良好的线性关系,相关系数均大于0.99,检出限均为0.006 mg/kg,加标回收率为81.8%~102.4%,相对标准偏差为3.2%~8.3%。方法提供了丰富的化合物特征信息,可根据提取离子流色谱图结合同位素分布信息锁定可疑化合物,根据一级质谱和二级质谱碎片离子的精确质荷比,在没有相关标准品的情况下可对未知化合物进行结构推断和确证。方法样品前处理简单,定性分析特异性强,定量测定灵敏度高,可满足突发公共卫生事件快速定性定量的检测要求,同时也为开展此类毒素中毒快速筛查及未知毒素的结构锁定提供了可靠的技术支撑。

72种生物碱高分辨质谱数据库建立与应用

目的建立常见生物碱的高分辨质谱数据库并应用于中毒样品的自动筛查。方法将生物碱标准品溶液以流动注射方式直接导入四极杆/静电场轨道阱高分辨质谱仪,或经高效液相色谱分离后进行质谱分析,得到准分子离子峰的精确质量数和合适的碰撞能量,采用HSS T3色谱柱(2.1 mm×100 mm,1.8μm),以甲醇和5 mmol/L乙酸铵-0.1%甲酸水溶液为流动相,梯度洗脱,电喷雾电离源正离子模式(HESI^+)和tSIM-ddMS^2模式下分析,采集生物碱的二级质谱信息,并将此质谱数据用于实际样品的自动筛查。结果获得了72种生物碱的精确分子量、保留时间、碰撞能量、碎片离子等信息并建立了质谱库,通过Full mass模式进样,仪器自动检索可快速锁定实际样品中含有的多种生物碱。结论该方法操作简便、灵敏度高,可满足中毒样品中生物碱快速自动筛查的要求。

超高效液相色谱高分辨质谱法同时测定蜂蜜中的5种雷公藤类物质

目的建立超高效液相色谱高分辨质谱法(UPLC-Q-Exactive)同时测定蜂蜜中5种雷公藤类物质(雷公藤甲素、雷公藤红素、雷公藤吉碱、雷公藤次碱、去甲泽拉木醛)。方法蜂蜜加水稀释后经乙腈提取,以HSS T3色谱柱(2.1 mm×100 mm,1.8μm)分离,甲醇-5 mmol/L乙酸铵+0.1%甲酸水溶液为流动相梯度洗脱,高分辨质谱仪检测,外标法定量。结果雷公藤甲素、雷公藤红素、雷公藤吉碱和雷公藤次碱的线性范围为1μg/L~40μg/L、去甲泽拉木醛的线性范围为5μg/L~200μg/L;线性相关系数r为0.999 1~0.999 9;检出限分别为0.01 mg/kg、0.01 mg/kg、0.01 mg/kg、0.01 mg/kg、0.05 mg/kg;加标回收率为96.1%~104.2%,精密度为1.26%~6.52%。结论 Q-Exactive技术定性准确,四级杆与Orbitrap相结合提升了检测的灵敏度,溶剂效应及基质效应的影响很低。本方法线性范围宽,准确度好,精密度高,能满足对蜂蜜中5种雷公藤类物质的定性定量检测,且前处理步骤少,操作简单,适用于蜂蜜中毒样品的快速测定。

四极杆/静电场轨道阱高分辨质谱法测定桶装水中的9种塑化剂

目的建立桶装水中9种塑化剂的超高效液相色谱-四极杆/静电场轨道阱高分辨质谱(UPLC-Q Extractive)联用的测定方法。方法由于该方法的灵敏度较高,样品可以不经过任何前处理操作,直接上机分析测试。液相部分采用BEHC18色谱柱(50mm×2.0mm,2.1μm)分离,以甲醇-0.1%甲酸水溶液作为流动相,梯度洗脱。质谱分析则采用电喷雾电离源正离子模式(HESI+)在t-SIM扫描模式下检测,通过理论精确质量数与所测得的精确质量数之间的匹配度和保留时间作为定性判断标准,以外标法定量。结果9种塑化剂在1.0μg/L^16.0μg/L时均呈现良好的线性关系,相关系数为0.998~0.999,9种塑化剂的检出限为0.1μg/L,加标回收率为62.3%~112.8%,相对标准偏差为1.1%~8.5%。结论该方法具有操作简便,灵敏度高,重现性好等特点,可满足桶装水样品中PAEs检测的要求。

超高效液相色谱-四极杆静电场轨道阱高分辨质谱法测定食物及呕吐物中的米酵菌酸

目的建立食物及呕吐物中米酵菌酸的超高效液相色谱-四级杆静电场轨道阱高分辨质谱法(UPLC-Q-Exactive)。方法样品用乙腈超声提取,5000 r/min离心5 min,取上清液过0.22μm PTFE滤膜后,经Waters HSS T3色谱柱(2.1 mm×100 mm,1.8μm)分离,乙腈-5 mmol/L乙酸铵(含0.1%甲酸)为流动相梯度洗脱,进样量5.0μl,在高分辨质谱仪Targeted-SIM模式下检测,运用以保留时间及相应分子离子峰的精确质量数进行定性,外标法定量。结果米酵菌酸在1μg/L~200μg/L内线性良好,相关系数>0.999,不同基质(呕吐物、汤圆、河粉、木耳)3个水平(1μg/kg、20μg/kg、100μg/kg)的加标回收率为87.7%~111.5%,相对标准偏差(RSD)为2.3%~10.0%;方法检出限为0.01μg/kg,方法定量限为0.03μg/kg。结论本方法快速、准确、可靠,灵敏,适合食物和呕吐物中米酵菌酸的快速定性定量测定。

超高效液相色谱-四极杆/静电场轨道阱高分辨质谱对药酒中乌头类生物碱的快速筛查与测定

目的 建立快速筛查与定量测定药酒中乌头类生物碱的方法。方法 样品经水稀释,HSS T3色谱柱(100 mm×2. 1 mm,1. 8μm)分离,以含0. 1%甲酸的甲醇-5 mmol/L乙酸铵为流动相梯度洗脱,全扫描/数据依赖二级质谱扫描(Full MS-dd MS2)模式分析,利用自建生物碱数据库对药酒样品检索匹配定性,并对筛查出的乌头类生物碱以目标离子选择性扫描(Targeted-SIM)模式分析,外标法定量。结果 筛查出的生物碱信息与标准生物碱信息比对一致,并与临床中毒症状吻合,考察的7种乌头类生物碱在5μg/L~100μg/L内线性关系良好,相关系数均> 0. 99,方法检出限(LOD)为0. 5μg/L~1. 5μg/L,定量限(LOQ)为1. 5μg/L~4. 5μg/L,在5μg/L、40μg/L、100μg/L 3个水平下,加标回收率为76. 3%~119. 1%,相对标准偏差为4. 3%~13. 4%。结论 该筛查方法具有快速、准确、分析通量高等优点,结合定量方法能够用于药酒中毒样品中乌头类生物碱的快速筛查与定量测定。