病毒颗粒中氢氘置换的证实

已知重水(D2O)能增加某些病毒的热稳定性,但其机理不清.用基质辅助气体同位素质谱法,研究了日本乙型脑炎病毒(Japanese encephalitis virus,JEV)和甲型肝炎病毒(hepatitis A virus,HAV)用D2O处理后,测定病毒及其RNA结构中的氘氢比值(D/H),以δDSMOW表示.结果说明,与正常病毒相比,上述D2O处理后的病毒样品中国δDSMOW值明显升高,其升高值与病毒样品的加入量呈良好的线性关系.实验还指出,D2O处理后的病毒国δDSMOW值的升高与其热稳定性的升高是相关联的.实验结果证明,D2O处理导致病毒及其RNA结构中发生氢氘置换,氢氘置换可导致病毒生物学性状(热稳定性增加)的表型改变.

冻干甲型肝炎减毒活疫苗(H_2株)诱导的人体特异性细胞免疫应答

目的了解接种冻干甲型肝炎（甲肝）减毒活疫苗[Hepatitis A（Live）Vaccine，Freezedried；Hep A]后，机体能否产生特异性细胞免疫应答。方法研究对象经HepA（H2株）1剂次免疫，流式法检测淋巴细胞亚群CD2^＋、CD4^＋、CD8^＋的百分率及表达干扰素（IFN）-γ及白细胞介素（IL）-4的阳性细胞百分率；T淋巴细胞的特异性增殖试验（MTT法）检测T淋巴细胞增殖反应；酶联免疫斑点法（ELISPOT）检测淋巴细胞的IFNγ分泌能力。结果接种后2周，CD^＋上升，以4周上升为显著，与接种前相比，差异有显著的统计学意义（t=2．571，P〈0．05）；接种后4周～3个月，淋巴细胞对特异性刺激物甲肝病毒的反应都有明显增强，与接种前相比，差异均有非常显著的统计学意义（t=3．215～3．959，P均〈0．01）；接种后2周，表达IL-4和IFN-γ的阳性细胞百分率上升，以IL-4为明显，与接种前相比，差异有显著的统计学意义（t=2．197，P〈0．05）；接种后3年，用ELISPOT法检测IFN-γ，阳性率为57．1％（8／14）。结论接种HepA（H2株）后，机体能有效地产生特异性细朐免疫席答。

基质稀释同位素质谱法测定微量富氘生物样品δD值

目的建立一种分析检测方法——基质稀释同位素质谱法，并测定微量富氘生物样品的6I）值。方法通过优化实验条件，如基质的选取、氧化燃烧的温度及时间、样品和氧化剂吸附水的脱除及氧化剂的用量等，建立基质稀释同位素质谱法，并用该法测定基质牛血清白蛋白（BSA）及两组微量富氘生物样品（A和B）的δDVSMOW值。结果本研究成功地构建了基质稀释同位素质谱法，最终选取BSA为基质，用量为5mg；氧化剂用量为CuO（500nag），V2O5（50mg）；100℃条件下脱吸附水20min；燃烧氧化温度为850℃，反应时间为30min。基质稀释同位素质谱法成功地测定了基质BSA及用A、B两种富氘生物样品制备的系列样本的δDVSMOW值。δDVSMOW值变化随生物样品A和B的加入量呈现良好的线性关系（R2〉0．99），两条直线的截距分别为-75和-74，与基质BSA的测定结果相吻合。结论基质稀释同位素质谱法能够用于测定微量富氘生物样品的δDVSMOW值。

病毒颗粒中氢氘置换的证实

已知重水(D2O)能增加某些病毒的热稳定性，但其机理不清。用基质辅助气体同位素质谱法，研究了日本乙型脑炎病毒(Japanese encephalitis virus，JEV)和甲型肝炎病毒(hepatitis A virus，HAV)用D2O处理后，测定病毒及其RNA结构中的氘氢比值(D／H)，以δDSMOW表示。结果说明，与正常病毒相比，上述D2O处理后的病毒样品中δDSMDW值明显升高，其升高值与病毒样品的加入量呈良好的线性关系。实验还指出，D2O处理后的病毒δDSMOW值的升高与其热稳定性的升高是相关联的。实验结果证明，D2O处理导致病毒及其RNA结构中发生氢氘置换，氢氘置换可导致病毒生物学性状(热稳定性增加)的表型改变。