生防菌与茄病镰刀菌在黄瓜根际动态变化

应用荧光定量PCR和稀释分离法检测了枯草芽孢杆菌Bacillus subtilis和木霉菌Trichoderma spp.与茄病镰刀菌Fusarium solani f.sp.cucurbitae在黄瓜根际动态变化及其对黄瓜根腐病的防治效果。结果表明,施用500×木霉菌肥、100×枯草芽孢杆菌7 d后对黄瓜根腐病的防效分别为100%和92.5%,14和28 d的防效分别为96.71%、86.76%和85.35%、79.24%;100×枯草芽孢杆菌初始拷贝数为130787 copys/μL,7 d内枯草芽孢杆菌拷贝数下降到51161 copys/μL,14和28 d时数量开始上升到295139和680556 copys/μL。木霉菌肥的变化趋势与枯草芽孢杆菌相同;用枯草芽孢杆菌和木霉菌肥防治黄瓜根腐病后,茄病镰刀菌变化趋势一致,初始拷贝数分别为2.61和15.34 copys/μL,7 d内茄病镰刀菌DNA拷贝数增加明显,100×枯草芽孢杆菌和木霉菌DNA拷贝数分别为11.22和20.98 copys/μL,之后茄病镰刀菌数量保持平稳。经过稀释分离法分离2种生防菌和茄病镰刀菌的数量,变化趋势与荧光定量PCR检测趋势相似。因此使生防菌快速定殖是提高其对土传病害防治效果的重要因素之一。

玉米丝黑穗病菌对寄主防御相关酶活性的影响

玉米丝黑穗病是玉米生产上的一种主要病害,对玉米生产造成了严重损失。研究表明:当丝黑穗病菌侵染玉米后,激活寄主体内相关防御酶系,使PAL、SOD、EST和PPO四种酶活性明显提高,抗病品种新铁10的酶活性升高幅度大于感病品种沈单16;而POD和CAT酶活性却下降,抗病品种新铁10的酶活性下降幅度大于感病品种沈单16。不同品种的成株期抗病性与其相关防御酶活性高低明显相关。

产生ACC脱氨酶的PGPR种衣剂对黄瓜细菌性茎软腐病的防治效果

为防治近几年越冬茬黄瓜上的新病害——细菌性茎软腐病,从海边盐生植物根际土壤中富集培养、分离和鉴定了产1-氨基环丙烷-1-羧酸(ACC)脱氨酶的植物根际促生菌(PGPR),共鉴定出了嗜麦芽寡养单胞菌Stenotrophomonas maltophilia、土生拉乌尔菌Raoultella terrigena、土壤杆菌Agrobacterium tumefaciens、产酸克雷伯菌Klebsiella oxytoca、成团泛菌Pantoea agglomerans、产气肠杆菌Enterobacter aerogenes和克吕沃尔氏菌Kluyvera cryocrescens共7个种的PGPR。测定了ACC脱氨酶活性,其中嗜麦芽寡养单胞菌菌株CRG-2,产生ACC脱氨酶活性最高,为324.3μmol/(mg·h)。将菌株CRG-2和枯草芽胞杆菌复配制成丸化种衣剂后,测定了对黄瓜细菌性茎软腐病的田间防治效果。结果表明,嗜麦芽寡养单胞菌和枯草芽胞杆菌复配后形成的种衣剂对黄瓜细菌性茎软腐病的田间防治效果达到73.13%,高于中生菌素防治效果15.79%。由此可见该种衣剂有望在生产上用于防治黄瓜细菌性茎软腐病。

玉米丝黑穗病及病菌生理分化研究进展

玉米丝黑穗病是玉米生产上的一种主要病害,从玉米丝黑穗病的发生与危害、病原菌生物学、抗病性鉴定与育种、防治、病原菌生理分化以及植物病原菌生理分化鉴定技术等方面进行了综述。

玉米丝黑穗病菌DNA多态性的初步研究

从169个随机引物中筛选出了9个单引物和3个双引物,利用这些引物对玉米丝黑穗病菌进行了RAPD遗传多态性分析。聚类分析结果将24个菌株划分为3个致病类型:菌株03-12、03-13、03-01、03-02、03-03、03-11、03-04、03-16、03-07、03-08和03-14聚为一类;03-18、03-20、03-17、03-26、03-29、03-27、03-23、03-25、03-28聚为一类;03-21、03-22、03-15和03-10聚为一类。表明玉米丝黑穗病菌菌株间存在一定的遗传多态性和遗传分化,分化与菌株地域来源关系不大。

保护地蔬菜土壤中木霉菌种群影响因素

采用传统的形态学特征和ITS、TEF序列比对鉴定出11个木霉种,其中长枝木霉Trichoderma longibrachiatum、深绿木霉Trichoderma atroviride和哈茨木霉Trichoderma harzianum是蔬菜保护地土壤中的优势种群。同时研究表明种植年限、蔬菜种类、轮作制度、杀菌剂等均会影响木霉菌数量和分布,木霉菌的数量与种植年限、蔬菜种植结构密切相关,连作时,当种植年限超过10 a,木霉菌数量减少;轮作地比连作地木霉菌数量虽然下降,但在真菌中的比例却呈上升趋势;种植葱蒜类蔬菜的地块比种植番茄、黄瓜的地块木霉菌数量多。从蔬菜田中分离到的木霉菌对杀菌剂的抗性较强。土壤因素中以土壤有机质含量对木霉菌数量的影响最为重要,达到极显著水平,回归直线方程为y=0.13x-1.07。表明提高土壤中有机质含量及轮作是提高木霉菌生物种群多样性的主要因子。

玉米丝黑穗病菌生理分化研究

利用6个抗病性差异明显的鉴别寄主对玉米丝黑穗病菌进行生理分化鉴定,结果鉴别出7个生理分化致病类型:菌株03-13、03-04、03-07、03-22和03-12属于致病类型Ⅰ;菌株03-23、03-18和03-29属于致病类型Ⅱ;菌株03-20、03-26、03-16和03-14属于致病类型Ⅲ;菌株03-17、03-03、03-11和03-28属于致病类型Ⅳ;菌株03-02和03-08属于致病类型Ⅴ;菌株03-10、03-21和03-25属于致病类型Ⅵ;菌株03-01属于致病类型Ⅶ。高梁丝黑穗病菌对所有的鉴别寄主都不具有侵染力,归属于致病类型Ⅰ。

灰色关联分析筛选抗逆生防木霉发酵条件的研究

为明确木霉生防效果的高低与木霉菌的产孢能力和在土壤中定殖力的高低的关系,采用灰色关联分析方法研究了397株木霉生防效果与菌丝生长速度、产孢量、耐低温性等抗逆性状的相关性,对优势菌株的发酵条件及生防效果进行测定。结果表明,TRS060186和TRW079634两个菌株与抗逆性状的相关性最高,关联度系数分别为0.874和0.757;TRW079634和TRS060186对黄瓜枯萎病的相对防效分别为88.7%和70.1%;温度是影响2个菌株产生不同类型孢子的关键条件,TRS060186在20℃产生分生孢子,28℃产生厚垣孢子。TRW079634则于28℃产生分生孢子,25℃有利于产生厚垣孢子。因此,木霉的适应性强弱是影响木霉菌生防效果的最主要的因子。

保护地土壤生防木霉菌种群多样性研究

采用传统的形态学特征和分子方法(ITS、TEF序列和UP-PCR)研究了蔬菜保护地土壤中木霉菌种群多样性及其影响因素。结果表明:提交genbank 11个木霉种的序列,分别为长枝木霉(Trichoderma longibrachiatum)、拟康氏木霉(Trichoderma pseud-okoningii)、黄绿木霉(Trichoderma aureoviride)、棘孢木霉(Trichoderma asperellum)、深绿木霉(Trichoderma atroviride)、哈茨木霉(Tri-choderma harzianum)、非钩木霉(Trichoderma inhamatum)、微孢木霉(Trichoderma minutisporum)、长孢木霉(Trichoderma longipile)和粘绿木霉(Trichoderma virens);木霉菌24个菌株经UP-PCR扩增,引物AS4、AS19、L45扩增出一条500 bp大小的木霉菌种的特征性谱带,其他谱带则为多态性谱带,多态性达93.5%;营养条件、杀菌剂及土壤因素对不同种木霉菌的影响不同,得到2株适应性较强的木霉菌株,有望成为生防菌株。

太阳能消毒与植物根际促生菌(PGPR)联合对黄瓜根腐病的防治效果

为明确太阳能土壤消毒与植物根际促生菌(PGPR)联合对黄瓜根腐病防治效果,在对温室进行太阳能土壤消毒之后,采用蘸根和灌根的方式测定了解磷、抑菌效果较好的3个菌株JPG-5、LWG-5和YB-4对黄瓜根腐病的田间防治效果及其对黄瓜根围养分的影响。结果表明:1)YB-4300倍蘸根对黄瓜根腐病防治效果最高,病指防效为89.49%,显著高于LWG-5300倍和JPG-5500倍的防治效果。2)LWG-5500倍灌根对黄瓜根腐病防治效果最高,为89.47%,显著高于LWG-5800倍和JPG-5500倍防治效果。3)不管是灌根还是蘸根,JPG-5500倍和YB-4300倍均能显著提高黄瓜根围有效磷含量,分别为99.68、86.81 mg/kg和84.30、86.56 mg/kg。因此,PGPR菌株在田间促进养分转化效果和对根腐病的防治效果综合评判,用YB-4300倍蘸根、JPG-5500倍灌根和LWG-5500倍灌根效果较好。

植物根际促生菌(PGPR)解磷菌的筛选及其对番茄促生作用的研究

【目的】筛选能降解难溶性磷的PGPR菌株。【方法】采用解磷圈法从15株PGPR中筛选透明圈直径最大的菌株,并将解磷菌加入到番茄育苗基质和灌根方式测定了解磷菌对幼苗期和成株期番茄促生作用及根围土壤养分的影响。【结果】经过16srRNA序列比对,2株解磷菌LZT-5和FQG-5分别为不动杆菌(Acinetobacter)和嗜麦芽寡养单胞菌(Stenotrophomonas maltophilia),其解磷透明圈直径分别为2.33和2.27 cm。用10%FQG-5和LZT-5育苗后番茄幼苗株高、茎粗和叶面积最高,分别为13.66 cm、0.35 cm、28.95 cm2和13.70 cm、0.36 cm、29.75 cm2,显著高于其他处理。用FQG-5灌根后露地番茄根围的速效磷、速效钾、硝态氮、有机质、全氮、全磷、全钾含量分别为40.05 mg·kg^-1、193.00 mg·kg^-1、78.30 mg·kg^-1、50.53 mg·kg^-1、37.79 g·kg^-1、0.80 g·kg^-1、0.79 g·kg^-1和2.03 g·kg^-1,均显著高于其他处理。【结论】解磷菌FQG-5可以促进番茄根围土壤养分转化成速效性养分,从而促进番茄植株生长,提高产量。

玉米对丝黑穗病菌抗性影响因子研究

在进行抗病性鉴定的基础上,测定了抗、感病品种胚芽和胚根内的N、P、K、可溶性糖和维生素C的含量以及不同时期玉米生长点内防御酶活性的变化。结果表明:玉米对丝黑穗病菌的抗性与胚根和胚芽内的N、P、K含量呈正相关,与Vc和可溶性糖含量呈负相关。当病菌侵入后抗病品种苯丙氨酸解氨酶(PAL)和过氧化物酶(POD)活性上升幅度高于感病品种,而多酚氧化酶(PPO)、酯酶(EST)和超氧化物歧化酶(SOD)在感病品种中上升幅度高。土壤施用氮肥和钾肥能明显提高玉米对丝黑穗病菌的抗性,磷肥效果不明显。

玉米丝黑穗病菌RAPD分析的引物筛选

采用CTAB法提取了玉米丝黑穗病菌DNA,研究了RAPD最佳优化条件,确定为20μL体系中10×buffer 2μL,25 mmol/L MgCl22μL,dNTP 0.5μL,DNA模板2μL,引物2μL,Taq 0.4μL(5 U/μL),ddH2O 11.8μL,并为玉米丝黑穗病菌RAPD分析筛选出了9个单引物和3个双引物。

木霉菌肥对青椒生长性状及品质的影响

为确定木霉菌肥对青椒生长性状的影响,以施基肥的方式,设置1 500,3 000,6 000,9 000 kg·hm^(-2)等4个不同施用量,施用木霉菌肥,以期筛选出对青椒生长性状及品质最佳的木霉菌肥施用量。结果表明,木霉菌肥施用量为9 000 kg·hm^(-2)时,青椒株高为32.56 cm,茎粗为0.85 cm,青椒光合速率为24.29μmol·(m2·s)-1,蒸腾速率为2.06 g·(m2·h)-1,光照度为69.78 lx,青椒可溶性糖和Vc的质量分数分别为266.5 g·kg-1和703.8 mg·kg-1,显著高于其他施用量。因此,建议在青椒生产上选用木霉菌肥的施用量为9 000 kg·hm^(-2)。

食用菌木霉种类及棉籽皮菌糠上木霉产孢量研究

从河北省栽培的食用菌上分离到了57株木霉,按Rifai和Bissett的分类系统共鉴定出6种木霉:康氏木霉、拟康木霉、哈茨木霉、桔绿木霉、长枝木霉和非钩木霉。其中康氏木霉和拟康木霉是河北省食用菌木霉菌优势种,分别占总菌株数的50.87%和26.32%,经过筛选向棉籽皮菌糠中添加黄腐酸可以增加木霉菌产孢量,可达6.5×108个/g。

黄瓜内生木霉菌对尖孢镰孢菌黄瓜专化型(Fusarium oxysporum f.sp.cucumerinum)的抑制作用

采用内生菌常规分离法,对健康无病的黄瓜植株体内的内生真菌进行了分离筛选,将筛选出的10种内生木霉菌与黄瓜枯萎病菌对峙培养,编号为Th1402的木霉菌株抑菌率最高达77.59%。从中挑选出5种抑菌率较高的木霉菌株三三复配,挑取出亲和力最好的Th1401,Th1402,Th1403组合,进行固体发酵,在基础培养基与液体黄腐酸的质量比为20∶9时,木霉产孢量最高,达到6.25×108个/g。

河北蔬菜保护地土壤镰孢菌种群分布研究

研究了河北省蔬菜保护地土壤镰孢菌种群分布情况,分析了棚龄、蔬菜种类、土壤真菌、土壤有机质及速效性化肥对镰孢菌种群分布的影响,鉴定出13种镰孢菌,分别是雪腐镰孢菌(Fusarium nivale)、茄病镰孢菌(Fusarium solani)、水生镰孢菌(Fusarium aquaeductum)、梨孢镰孢菌(Fusarium poae)、拟枝孢镰孢菌(Fusarium sporotrichioides)、弯角镰孢菌(Fusarium campto-ceras)、半裸镰孢菌(Fusarium semitectum)、潮湿镰孢菌(Fusarium udum)、串珠镰孢菌(Fusariummoniliforme)、尖孢镰孢菌(Fusarium oxysporum)、木贼镰孢菌(Fusarium equiseti)、柔毛镰孢菌(Fusarium flocciferum)和双胞镰孢菌(Fusarium dimerum),其中尖孢镰孢菌(F.oxysporum)和茄病镰孢菌(F.solani)是优势种;同时表明土壤等因子对镰孢菌种群的分布有着重要的影响,但规律不尽相同;木霉对镰孢菌的生长有着明显的抑制作用。

玉米丝黑穗病菌DNA提取方法比较（简报）

玉米丝黑穗病是玉米生产上的一大主要病害,严重威胁着玉米的可持续生产.华致甫等 [1]用妇人指等5个自交系作鉴别寄主,对玉米丝黑穗病菌的致病力进行了试验,认为我国至少存在5个生理小种.用鉴别寄主来鉴定生理小种易受环境条件的限制,生理小种间是否存在遗传物质的差异,才能从根本上说明小种致病力的分化,而DNA的纯度是制约RAPD扩增质量的一个重要基础.因此,笔者对玉米丝黑穗病菌的DNA提取方法进行了初步探讨.

食用菌木霉种类鉴定

从不同食用菌上分离到57株木霉,按Rifai和Bissett的分类系统共鉴定出6种木霉:康氏木霉(Tri-choderma koningii)、拟康木霉(Trichoderma pseudokoningii)、哈茨木霉(Trichodema harzianum)、桔绿木霉(Tri-choderma citrinviride)、长枝木霉(Trichoderma longibrachiatum)和非钩木霉(Trichodema inhamatum)。首次从白灵菇的培养基质上分离到了非钩木霉、康氏木霉和拟康木霉,后两种是食用菌上木霉的优势种,分别占总菌株数的50.87%和26.32%。

职技高师植保专业实践教学中存在的问题及改革探索

针对目前植物保护专业人才培养存在的实践教学示范性内容多而综合性创新性内容少、实践教学操作程序不规范、考核不严格、实验仪器设备少、实践教学基地缺乏、实践教学内容缺乏连贯性等问题,认为植物保护专业的实践教学应在实验室建设、创新能力培养、实践教学内容突出综合性和创新性、实践教学时间等方面,采用"开放式"实践教学模式,充分利用天然实习基地,建立并巩固农化企业等校外实习基地。对学生、用人单位的调查结果表明,植保专业学生的培养采用"开放式"实践教学模式取得了较为满意的效果。