Mg(Al)O催化环氧丙烷一步法合成碳酸二甲酯的研究

由水滑石焙烧制得镁-铝氧化物,使用镁-铝氧化物催化剂以环氧丙烷(PO)、二氧化碳和甲醇为原料一步催化合成了碳酸二甲酯(DM C)并联产碳酸丙烯酯(PC)和丙二醇(PG).实验表明,n(M g)/n(A l)=8的水滑石经773 K焙烧后得到的催化剂对一步合成具有最佳的催化性能.在反应温度433 K和压力6 M Pa下,使用镁-铝氧化物催化剂反应10 h后PO转化率达到100%,DM C选择性为20.2%.

双核铜配合物[Cu_2(Ophen)_2]·2H_2O(HOphen=2-羟基-1,10-啉菲咯啉)的水热合成和晶体结构

通过水热合成法制备了带有两个游离水分子的羟基化邻菲咯啉双核铜配合物[Cu2(O phen)2].2H2O(HO phen=2-羟基-1,10-啉菲咯啉).通过红外光谱和X射线单晶衍射进行结构表征.结果表明标题化合物属正交晶系,晶胞参数为:a=0.384 2(5)nm,b=1.913(3)nm,c=2.691(3)nm,α=β=γ=90.00,°晶体的其他参数为:Z=2,V=1.978(4)nm3,Dc=1.344 m g/m3,R1=0.083 9,wR1=0.147 1.该化合物中,配体邻菲咯啉发生了羟基化反应,形成羟基化邻菲咯啉,结构中还含有两个游离水分子.芳环之间的π-π堆积作用、铜-铜之间的弱作用使得该化合物分子形成一维梯形结构.

防晒化妆品中纳米TiO_2的检测技术研究

与传统的防晒化妆品相比,纳米TiO2防晒化妆品有显著的优越性。目前,针对我国防晒化妆品纳米级TiO2的存在判定及形貌鉴别确定尚未形成统一的方法标准。本文通过X-射线荧光光谱仪(XRF)、等离子子发射光谱仪(ICP)、红外显微镜(IR)、热重分析仪(TG)、X射线衍射仪(XRD)、扫描电镜(SEM)、透射电子显微镜(TEM)、氮气吸附/脱附仪(BET)及紫外线分光光度(UV)等手段对防晒品中纳米TiO2的晶体形貌、颗粒尺寸大小、分布、比表面积及对紫外线的吸收和反射能力等进行了较全面的考察,建立了完整的防晒化妆品中纳米TiO2的识别体系。

应用ICP-MS测定国际比对果汁样品中铅、镉和锡的含量

建立了微波消解、电感耦合等离子体质谱法(ICP-MS)同时测定国际比对果汁样品中铅、镉和锡的方法。应用微波消解进行样品前处理,采用在线内标校正基体干扰,采用干扰方程抑制质谱干扰,使用工作曲线计算出样品中铅、镉和锡元素的含量。测定结果表明,铅、镉和锡元素的检出限分别为0.021、0.016和0.052μg/L,相对标准偏差(RSD<5%),加标回收率介于90%～105%,用该方法测定FAPAS国际比对果汁样品,反馈的统计结果显示铅、镉和锡元素的Z值分别为-0.4、0.1和-0.2,结果均为满意。该方法快速、简单、精确,适于果汁中铅、镉和锡的测定。

火焰原子吸收光谱法测定钒铁中铜含量的方法研究

建立了火焰原子吸收光谱法测定钒铁中铜含量的方法。用硫酸和氢氟酸处理样品,样品溶液直接导入火焰进行测定。结果表明:在0.25-3.00 mg/L浓度范围内,体系吸光度值与铜浓度线性关系良好(线性相关系数≥0.9994),检出限为0.0029 mg/L,加标回收率为95%-105%。铜元素含量<0.01%时,RSD(n=10)<2%;铜元素含量为0.01%-0.1%时,RSD(n=10)<1%。

微生物实验室常用菌种保存方法及临床意义的探讨

目的 探索微生物实验室常用菌种的适宜保存方法,为临床提供准确可靠的检验结果.方法 采用6种菌种保存方法,对22种常用菌种进行保存,探究各种方法下菌种存活率和最佳保存时间.结果 血琼脂培养基低温保存法、固体培养基低温保存法和营养琼脂斜面培养基低温保存法,第4个月菌种存活率下降至<50%,甚至降为0%;甘油肉汤法和液体石蜡法,第6个月菌种存活率>70%;脱脂牛奶法第18个月菌种存活率为100%,并且菌量和菌落形态正常,生化反应特性基本不变.结论 血琼脂培养基低温保存法、固体培养基低温保存法和营养琼脂斜面培养基低温保存法适合菌种短期内保存;甘油肉汤法和液体石蜡法适合菌种长期保存;脱脂牛奶低温冻存法则可以将菌种进行超长期保存.

p53在层流剪切应力下对EPCs分化及功能的影响

目的:研究p53蛋白在层流剪切应力(LSS;12 dyn/cm^(2))作用下对内皮祖细胞(EPCs)分化及功能的影响,为心血管疾病的防治找到新的靶点。方法:采用密度梯度离心法获得大鼠骨髓单个核细胞,用EGM-2培养基诱导获得EPCs;通过Western blot方法检测p-p53及p53蛋白水平的变化;采用RT-qPCR及流式细胞术分别检测内皮标志物CD31和vWF的mRNA及蛋白表达;使用ELISA检测培养液上清中vWF含量;分别利用Matrigel、Boyden小室、细胞贴壁法、CCK-8法和EdU技术检测EPCs成血管、迁移、黏附和增殖能力。结果:LSS作用促进EPCs中pp53和p53蛋白水平升高;p53抑制剂pifithrin-α处理后,与单纯LSS组相比,EPCs的CD31和vWF表达、黏附、迁移及成血管能力均降低,但其增殖能力升高。结论:LSS是调节EPCs分化及其生物学功能的重要力学因素,而p53蛋白可能在该过程中起关键的调节作用。

一种大容量细胞灌流液中外泌体的提取方法及鉴定

目的:建立一种从大容量细胞灌流液中提取外泌体的方法,并进行外泌体的鉴定。方法:人脐静脉内皮细胞株(EA.HY926)是人脐静脉内皮细胞和人肺腺癌细胞株A549杂交成的永生化细胞株,因其具有血管内皮细胞的特性,广泛用于内皮细胞相关研究。本研究采用含10%胎牛血清的M199培养基培养,利用Flexcell STR-4000平行板流室系统对EA.HY926施以振荡剪切应力。收集流体剪切应力处理后的细胞灌流液,去除细胞碎片后冻成干粉,脱盐、提取纯化外泌体。电镜观察外泌体形态、纳米粒径电位分析仪检测外泌体大小、PKH26染色检测外泌体膜性结构、BCA蛋白定量法检测外泌体的蛋白浓度、Western blot检测外泌体特异性蛋白CD9和CD81的表达,荧光定量RT-PCR检测内皮细胞相关基因的表达。结果:该方法提取的外泌体,大小均一,结构完整,呈典型囊泡样结构;粒径集中在30~150 nm,多数粒径为97.63 nm;表达外泌体特异性蛋白CD9和CD81;PKH26染色阳性,并可被细胞摄取;EA.HY926分泌的外泌体表达内皮细胞相关的CD31、vWF等mRNA,以及miR-126、miR-21、miR-155等microRNA分子。结论:本方法能够有效从大容量细胞灌流液中提取到结构完整的、高浓度、高质量的外泌体,为开展以流体力学干预细胞为基础的外泌体相关研究提供技术方法。

miR-21/PTEN/Akt参与白藜芦醇促EPC的体外成血管能力

目的探讨miR-21及其下游PTEN/Akt信号通路在白藜芦醇促进大鼠骨髓源性内皮祖细胞(EPC)体外成血管能力中的作用。方法采用密度梯度离心法分离大鼠四肢骨髓的单个核细胞,培养于含10%胎牛血清的EGM-2MV完全培养基中诱导分化成EPC,实验用3~5代的EPC。白藜芦醇(20μmol/L)干预12 h后,采用Matrigel胶检测EPC的体外成血管能力;实时荧光定量PCR检测miR-21及PTEN基因的表达情况;干扰miR-21表达后检测EPC的体外成血管能力;双荧光素酶报告基因检测miR-21对PTEN的靶向调控;Western blot检测PTEN蛋白表达情况以及Akt磷酸化水平。结果白藜芦醇(20μmol/L)明显促进EPC的体外成血管能力(P<0.05),抑制了miR-21(P<0.01)的表达,然而却促进了miR-21下游靶基因PTEN的基因(P<0.01)及蛋白表达(P<0.05),进而抑制PTEN下游信号分子Akt的磷酸化水平。双荧光素酶报告基因检测结果显示,miR-21可与PTEN mRNA的3′UTR靶向结合(P<0.01)。结论miR-21调控了白藜芦醇促EPC的体外成血管能力,其机制可能是通过PTEN/Akt信号通路来发挥的,该研究结果揭示了白藜芦醇调控EPC功能一种新的细胞内信号机制。

岩藻黄素在振荡剪切应力致EPCs功能改变及衰老中的影响作用

目的探讨岩藻黄素(Fucoxanthin,FUCO)对振荡剪切应力作用下内皮祖细胞(Endothelial progenitor cells,EPCs)生物学功能及细胞衰老的影响作用。方法采用Flexcell STR-4000平行板流动系统模拟体内扰动流剪切应力(振荡剪切应力,Oscillatory shear stress,OSS,±4 dynes/cm^2,1 Hz)并加载于EPCs;利用结晶紫染色法观察OSS作用后EPCs的形态学改变;应用Boyden小室、自发性细胞贴壁及Matrigel基质胶分别检测细胞迁移、黏附和体外血管形成能力的变化;采用Western blot检测促沉默信息调节因子1(Silent mating type information regulation 2 homolog-1,SIRT1)蛋白和β-半乳糖苷酶法检测细胞衰老程度的改变;通过Dihydroethidium(DHE)荧光探针法检测细胞内超氧化物阴离子。结果与静态培养组相比,OSS导致EPCs形态学发生明显改变,表现为细胞长宽比降低,细胞之间间距增加;而FUCO对OSS导致的EPCs形态学改变无显著影响作用;与OSS处理组相比,FUCO可显著促进EPCs的迁移(10.00±1.73 vs 21.00±2.65)、黏附(8.00±1.00 vs 20.00±1.73)及体外血管形成能力(8538.67±1231.47 vs 11009.33±570.08)。进一步研究发现,FUCO可降低OSS导致的β-半乳糖苷酶阳性细胞比例(21.18%±1.38%vs 12.69%±3.94%)以及促进SIRT1蛋白表达上调;同时,FUCO可减弱OSS诱导的EPCs胞内超氧阴离子的产生(P<0.05)。结论FUCO可缓解OSS环境下引发的EPCs细胞功能降低、细胞衰老的发生,提示其可有效提升内源性EPCs的血管修复能力。