滇西鼠疫疫源地野外鼠形动物感染贝氏柯克斯体的调查

目的调查滇西鼠疫疫源地野外鼠形动物贝氏柯克斯体感染情况。方法2015年12月至2016年10月,课题组以云南省玉龙县、剑川县和梁河县鼠疫疫源地为采样点,使用夹夜法在不同季节、不同海拔、不同生境捕获野外鼠形动物,收集到2524份肝脾样本。采用巢氏PCR方法对Q热病原体贝氏柯克斯体(Coxiella burnetii,Cb)Com 1基因的保守片段进行扩增。应用SPSS20.0软件,采用χ^(2)检验或Fisher确切概率法分析不同疫源地、海拔梯度、生境、季节、性别间Cb在野外鼠形动物中的流行分布情况。结果检测2524份样本,Cb阳性23份,阳性率为0.91%。检出Cb的鼠形动物包括齐氏姬鼠、中华姬鼠、黄胸鼠、社鼠、锡金小鼠、大绒鼠、臭鼩鼱和毛猬。不同生境、性别间野外鼠形动物Cb阳性率无差异(χ^(2)_(生境)=6.514,χ^(2)_(性别)=0.076,P>0.05);季节间Cb阳性率春季(2.44%)高于秋季(0.37%)(χ^(2)=11.550,P<0.008);剑川鼠疫疫源地Cb阳性率(1.46%)高于玉龙鼠疫疫源地(0.34%)(χ^(2)=6.121,P<0.017);剑川鼠疫疫源地海拔2450 m以上野外鼠形动物Cb阳性率(4.64%)高于2450m以下(0.13%)(χ^(2)=28.504,P<0.001)。同源性和系统发育分析显示滇西鼠疫疫源地野外鼠形动物Cb Com1序列和Genbank相关参考序列高度同源。结论滇西鼠疫疫源地野外鼠形动物Cb阳性率较低,但野外鼠形动物Cb感染广泛,Cb Com 1基因片段在野外鼠形动物中呈现出高度保守的流行与分布。

云南家鼠鼠疫疫源地人群和指示动物血清鼠疫F1抗体调查

目的了解云南省家鼠鼠疫疫源地静息期人和指示动物血清鼠疫F1抗体情况,分析鼠疫发生和流行的风险。方法2019年7—8月,课题组选择云南省家鼠鼠疫疫源地弥勒市、芒市和梁河县作为研究区域,对8个曾经报告2次及以上鼠疫的自然村和8个从未报告鼠疫的自然村的人群及指示动物进行血清采集,每个自然村采集人血清不少于20份,指示动物血清不少于10份。用间接血凝法检测鼠疫F1抗体,并用上转发光法对阳性样本进行再次检测确认。结果368份人血清中仅有1份鼠疫F1抗体阳性,307份犬血清和12份猫血清鼠疫F1抗体均为阴性。结论云南家鼠鼠疫疫源地人群鼠疫F1抗体阳性率非常低,但鼠疫F1抗体阳性的自然村需要加强鼠疫监测。指示动物未检测出鼠疫F1抗体,当地发生鼠疫的风险不高。

鼠型斑疹伤寒流行现状及其影响因素

鼠型斑疹伤寒是由斑疹伤寒立克次体引起的一种威胁人类健康的自然疫源性传染病,其主要宿主动物和传播媒介分别是啮齿类动物和蚤类。鼠型斑疹伤寒呈全球性分布,但主要发生在热带、亚热带和温带地区。在国内,鼠型斑疹伤寒发生主要以散发形式存在,局部地区出现小型暴发,但各省(市、区)均有病例报告。随着生态旅游业的发展和原生环境的不断开发,人群与疾病宿主动物和传播媒介的接触机会增多,感染斑疹伤寒立克次体的风险和范围增加。为有效预防和控制鼠型斑疹伤寒的发生和流行,保护人群的生命健康安全,维护和促进旅游经济的稳定发展,本文对鼠型斑疹伤寒的流行现状进行了概述,并简要分析了生物因素、自然因素和社会环境因素对鼠型斑疹伤寒发生和流行的影响。

云南省鼠疫疫源地水中金属元素含量分析

目的分析云南省鼠疫疫源地水样中8种金属元素含量。方法2015年12月至2016年11月选取云南玉龙、剑川和梁河鼠疫疫源地作为采样地,按春、夏、秋、冬4个季节,在有鼠类活动的区域采集地表水,应用火焰原子吸收分光光度计测定水样中钙(Ca)、铁(Fe)、锌(Zn)、铬(Cr)、铅(Pb)、锰(Mn)、镉(Cd)、铜(Cu)8种金属元素含量,对数据[中位数(四分位数间距)]进行统计分析。结果玉龙、剑川和梁河鼠疫疫源地分别采集26、58、54份水样。3个鼠疫疫源地Pb和Cd元素含量[玉龙:0.19(0.78)、0.08(0.07)mg/L;剑川:0.23(0.56)、0.03(0.06)mg/L;梁河:0.13(0.61)、0.09(0.08)mg/L]高于《地表水环境质量标准》(Pb:0.10 mg/L,Cd:0.01 mg/L)。8种金属元素含量除Ca、Cd两种元素含量在3个疫源地地区间比较差异有统计学意义(P均<0.05)外,其余6种金属元素含量地区间比较差异无统计学意义(P均>0.05);玉龙鼠疫疫源地Ca元素含量最高,梁河鼠疫疫源地最低(P均<0.017)。玉龙鼠疫疫源地除Fe元素外,其余7种金属元素含量季节间比较差异有统计学意义(P均<0.05);剑川鼠疫疫源地除Cr元素外,其余7种金属元素含量季节间比较差异有统计学意义(P均<0.05);梁河鼠疫疫源地除Ca元素外,其余7种金属元素含量季节间比较差异有统计学意义(P均<0.05)。结论3个鼠疫疫源地水中Pb和Cd元素含量较高,玉龙和剑川鼠疫疫源地水中金属元素含量季节变化趋势接近。

滇西鼠疫疫源地野外鼠形动物斑点热群立克次体和莫氏立克次体感染调查

目的了解滇西鼠疫疫源地野外鼠形动物斑点热群立克次体(spotted fever group Rickettsiae,SFGR)和莫氏立克次体(Rickettsia mooseri,R.mooseri)感染情况。方法应用磁珠法提取2015-2016年自滇西梁河县、剑川县和玉龙县鼠疫疫源地捕获的2512只野外鼠形动物肝脏样本DNA,选用热休克蛋白groEL基因引物进行巢式PCR扩增。分别采用DNAStar 7.1软件和美国国家生物技术信息中心(NCBI)的GenBank进行基因序列剪切、拼接和Blast同源性比对分析,同时采用DNAStar 7.1软件和MEGA 6.0软件构建系统发育树。结果感染SFGR的野外鼠形动物有锡金小鼠、斯氏家鼠、灰麝鼩和臭鼩鼱(各1只),总感染率为0.16%(4/2512);未检出R.mooseri感染。梁河县和剑川县鼠疫疫源地野外鼠形动物SFGR感染率分别为0.49%(3/611)和0.10%(1/1029),玉龙县鼠疫疫源地野外鼠形动物未检出SFGR感染。同源性分析显示,SFGR阳性样本的基因序列与参考序列同源性为95.45%~100.00%;4份阳性样本间groEL基因部分序列高度相似,同源性达89.60%~97.40%。序列进化分析显示,梁河县鼠疫疫源地的3个SFGR阳性样本序列聚在同一分支,同源性达94.40%~97.40%;剑川县鼠疫疫源地的1个阳性样本序列单独为1个分支。结论滇西鼠疫疫源地野外鼠形动物SFGR感染率较低,未发现R.mooseri感染。

云南省家鼠鼠疫疫源地鼠形动物戊型肝炎病毒感染及基因多态性研究

目的了解云南省家鼠鼠疫疫源地鼠形动物戊型肝炎病毒(hepatitis E virus,HEV)感染情况及基因多态性。方法2019年7-8月,在云南省家鼠鼠疫疫源地的16个自然村(弥勒市4个、芒市6个、梁河县6个)周围,采用夹夜法收集鼠形动物,提取肝脏RNA,应用一步法荧光定量PCR检测鼠HEV目的基因,计算鼠HEV阳性率;采用PCR法对阳性样本进行目的基因扩增及克隆测序,应用MegAlign和MEGA 7.0软件对测序样本序列与GenBank注册的HEV基因序列进行序列对比分析,构建系统进化树。结果共捕获鼠形动物491只,隶属3目、5科、8属、15种;鼠HEV阳性率为4.89%(24/491),其中黄胸鼠和针毛鼠的阳性率分别为9.39%(23/245)和1/3,其他鼠形动物未检出。不同生境鼠形动物鼠HEV阳性率比较差异有统计学意义(P=0.014),且民居附近生境鼠HEV阳性率高于其他生境(P均<0.05)。序列对比分析结果显示,来源于梁河县的P018样本基因序列与来自香港首例感染鼠HEV患者的样本MG813927.1序列同源性为100.0%,且与MG813927.1及来源于鼠的样本LC549185.1序列聚为同一分支,为HEV C型;来源于芒市的G024样本与其他病毒株的序列同源性为20.7%~31.5%,与来源于鸟类的样本AY535004.1序列聚为同一分支。结论云南省家鼠鼠疫疫源地鼠形动物存在鼠HEV感染,可能存在基因多态性,且感染差异与生境有关。