葡萄汁有孢汉逊酵母与酿酒酵母共培养发酵野樱桃饮品研究

利用从野樱桃发酵底泥中筛选的一株葡萄汁有孢汉逊酵母(Hanseniaspora uvarum)YT-35与商业酿酒酵母(Sacharomyces cerevisiae)共培养发酵野樱桃饮品,以2株菌的单菌株发酵为对照,对不同发酵阶段中的微生物数量、还原糖、乙醇等动态变化分析,利用高效液相色谱(HPLC)对有机酸进行动态检测,采用顶空固相微萃取/气相色谱-质谱(HS-SPME/GC-MS)对发酵饮品的挥发性风味物质进行测定。结果表明,H.uvarum YT-35在共培养发酵前期占据主导优势;与单一S.cerevisiae发酵相比,共培养发酵可以获得低乙醇含量(3.51 g/L)饮品;HPLC结果表明,共培养发酵可降低柠檬酸、苹果酸和奎宁酸的产量,增加冰醋酸的产量;HS-SPME/GC-MS结果表明,共培养发酵可产生更多的酯类风味物质,如己酸乙酯、苯甲酸甲酯、辛酸异戊酯、肉桂酸甲酯、反式肉桂酸乙酯、十八酸乙酯、苯甲酸苄酯和邻苯二甲酸二异丁酯,同时可增强如月桂酸乙酯、辛酸乙酯、苯乙醇、苯甲醇、辛酸和月桂酸等风味物质的含量;聚类分析表明,H.uvarum YT-35与S.cerevisiae共培养发酵野樱桃对丰富饮品中挥发性物质种类及含量提高有重要贡献。本研究旨在为具有不同代谢潜能的混合菌株在提升果汁发酵饮品品质中的研究提供一定科学依据和理论指导。

纳米氧化锆对PMMA义齿基托性能影响的研究进展

近年来,材料学的发展促进了口腔修复学的进步,聚甲基丙烯酸甲酯(Polymethyl methacrylate,PMMA)由于具有易加工、成本低、生物相容性好等特点,是常用的义齿基托材料。然而在使用过程中发现PMMA存在着许多问题,如物理性能降低导致其易折断以及细菌粘附等,使用寿命较短,让其在临床上的使用变得局限,随着纳米颗粒材料的应用,多项研究发现加入纳米颗粒尤其是加入纳米氧化锆颗粒(nano zirconia,ZrNp)后的PMMA义齿基托的物理性能、抗菌性、抗老化性、生物相容性等得到了有效改善。因此本文就加入ZrNp对PMMA性能影响的研究进展进行综述,以期为口腔修复材料的临床选择及相关研究提供参考。

基于ITS2一级序列和二级结构对土茯苓及混伪品的鉴别研究

目的:使中药材土茯苓与其混伪品得到有效区分,确保土茯苓药材临床用药安全。方法:采用内转录间隔区2 (ITS2)一级序列联合二级结构信息鉴别土茯苓及其混伪品,收集土茯苓正品及混伪品30条ITS2序列,使用基于隐马尔可夫模型(hidden Markov model,HMM)的方法注释,采用MEGA 7.0比对序列,基于Kimura-2-Parameter模型计算种内、种间的遗传距离,并构建邻接法(neighbor-joining,NJ)系统发育树;通过ITS2 Database预测各品种的ITS2二级结构,利用4Sale软件进行二级结构的比对,运用ProfDistS软件基于距离法构建联合一级序列及其二级结构的剖面邻接(profile neighbor joining,PNJ)系统发育树。结果:土茯苓的平均ITS2序列长度为245 bp,平均碱基G+C占比为82.8%,各物种种间遗传距离均显著大于种内遗传距离,NJ系统发育树和PNJ系统发育树的物种分支关系基本一致,土茯苓与其各种混伪品均分别各自聚为一支,可以有效鉴别土茯苓正品与混伪品。结论:ITS2可以作为鉴定土茯苓及其混伪品的DNA条形码,结合二级结构信息可使基于ITS2一级结构结果得到修正和优化,为中药材土茯苓临床安全应用和质量评价提供了参考。

基于ITS2序列及二级结构对紫苏与其变种、紫苏子与其混伪品的鉴别

采用ITS2一级序列联合其二级结构对紫苏与其变种、紫苏子与其混伪品进行鉴定,为紫苏药材的使用提供更科学的分类方法。收集紫苏与其近缘种、紫苏子混伪品基源植物样本,提取DNA进行PCR扩增;并结合GenBank中的序列获得所有物种的ITS2序列。应用MEGA7.0软件进行序列分析、计算种内种间遗传距离、构建NJ树,利用ITS2数据库预测各物种的ITS2二级结构。利用4Sale软件进行一级结构联合二级结构矩阵的比对,运用ProfDistS软件构建PNJ树。ITS2序列的扩增成功率高。除白苏以外,紫苏与其他变种的ITS2序列具有明显的Barcoding gap;NJ树显示,ITS2可将紫苏、白苏与其他变种区分;紫苏和白苏在ITS2二级结构中有差异。紫苏子与其混伪品的ITS2序列差异较大,种间具有显著的遗传距离,NJ树和PNJ树显示紫苏子与各混伪品分别各自聚为一支,且有较高的自展支持率。因此,基于ITS2条形码可以准确鉴别紫苏子与其混伪品,为规范药材市场和保障临床用药安全提供可靠方法;但对于紫苏与其变种白苏的鉴别需要结合ITS2二级结构,或建议将白苏和紫苏合并为一个种,为紫苏属的植物分类提供参考。

酒曲中产酶微生物的筛选及其对发酵米酒品质的影响

为解决商业米酒品质稳定但风味寡淡,而传统米酒口感醇厚但品质难于控制的问题,本研究从不同地区的酒曲中筛选出产淀粉酶、蛋白酶、酯化酶的可培养真菌,将其与商业甜酒曲进行复配发酵米酒,测定米酒的各项指标以评估其对发酵米酒品质的影响。根据产酶特性及18S rDNA分子鉴定,筛选获得5株产酶真菌,分别为米根霉(Rhizopus oryzae)、卷枝毛霉(Mucor circinelloides)、兰瑟毛霉(M.lanceolatus)、两株扣囊复膜酵母(Saccharomycopsisfibuligera)。添加了S.fibuligeraHB单菌曲发酵的米酒提高了乙醇、氨基酸态氮的含量,丰富了有机酸的种类和含量,降低了苦味氨基酸的含量和占比,同时增加了挥发性物质含量,其中苯乙醇和乙酸乙酯的含量明显高于其他组。因此,S.fibuligeraHB能显著提升米酒品质,具有应用于强化曲进行发酵米酒的潜力。

基于psbA-trnH分子标记的鼠曲草属植物鉴定

目的采用叶绿体基因psbA-trnH间隔区序列对鼠曲草植物、近缘种及其混伪品进行分子鉴定研究,为制定该鼠曲草药材的质量标准提供科学依据,确保其合理使用和进一步的科学发展。方法采集鼠曲草Gnaphalium affine D.Don及其近缘种植物,分别进行DNA基因组提取,经PCR扩增psbA-trnH间隔区序列,进行双向测序,并结合GenBank下载鼠曲草属植物序列,应用MEGA7.0软件分析,进行序列比对、计算遗传距离、构建NJ系统聚类树。结果实验中鼠曲草psbA-trnH序列长度为387~423bp,鼠曲草与其近缘物种psbA-trnH种间平均遗传距离为0.132,种内最大K2P遗传距离为0.005,种间最小K2P遗传距离为0.099,且种间最小遗传距离大于其种内最大遗传距离。基于psbA-trnH序列构建的NJ聚类树显示,鼠曲草属样品聚为一支,其混伪品各自聚为一支。结论psbA-trnH片段可作为鉴别鼠曲草属植物及其易混品种的分子条形码,有利于保障鼠曲草药材的质量安全和临床疗效。

基于ITS2序列及二级结构对易混淆药材牛尾独活、当归、独活和羌活的鉴别研究

本文利用ITS2序列及其二级结构对传统中药材牛尾独活、当归、独活和羌活进行分类鉴定。通过GenBank数据库中下载牛尾独活等药材共7个物种26条ITS序列,采用隐马尔可夫模型注释获得ITS2序列。采用MEGA软件计算种内、种间K2P遗传距离,构建NJ系统发育树。同时利用ITS2 Database预测各样本ITS2二级结构,并利用4Sale软件比对一级结构和二级结构的联合矩阵,最终采用ProfDistS软件基于距离法构建PNJ进化树。结果表明,各样本种间平均遗传距离均远大于种内平均遗传距离,各药材间存在明显的Barcoding Gap;系统发育树显示各样本均独立分支;样本间的二级结构均有一定的差异;PNJ进化树比NJ树显示出更高的分辨率。因此,本研究建议将ITS2作为鉴别药材牛尾独活、当归、独活和羌活及其基源植物的DNA条形码,为4种中药材的分类与准确鉴定提供一定的科学依据。