敲降低密度脂蛋白受体相关蛋白表达对肝癌血管异常化的影响及其机制

目的探讨低密度脂蛋白受体相关蛋白(LDLR)表达对肝癌血管异常化的影响及其机制。方法从Oncomine癌症基因芯片数据库提取87例肝癌组织的基因转录组信息,分析肝癌组织中LDLR的表达水平与癌胚抗原(CEA)和CD31表达水平的相关性。采用短发卡RNA靶基因慢病毒转染的方法,构建LDLR敲降的MHCC-97H和HLE肝癌细胞。通过转录组测序、实时荧光定量聚合酶链反应、蛋白免疫印迹法检测LDLR敲降后肝癌细胞的差异基因及其表达水平变化。通过富集分析明确LDLR参与的基因相关信号通路。通过对肝癌细胞条件培养基中CEA含量的检测评估LDLR对CEA的影响。采用血管生成实验检测LDLR对人脐静脉内皮细胞血管生成能力的影响,以及CEA在LDLR调控血管生成过程中的作用。收集2019年1月至2022年12月于天津医科大学肿瘤医院手术切除的肝癌组织标本176例,采用免疫组织化学染色检测176例肝癌组织中LDLR及146例肝癌组织中CEA和CD31的表达水平,分析肝癌组织中LDLR的表达水平与肝癌组织中CEA和CD31的表达水平、血清CEA和丙氨酸氨基转移酶(ALT)水平的相关性。结果Oncomine数据库分析显示,发生门静脉转移的肝癌患者肝癌组织中LDLR和CEA的表达呈负相关(r=-0.64,P=0.001),而CEA和CD31的表达呈正相关(r=0.46,P=0.010);转录组测序结果显示,LDLR敲降组与对照组MHCC-97H细胞的差异表达基因共有1032个,其中517个基因表达上调,515个基因表达下调。CEA相关细胞黏附分子5(CEACAM5)在LDLR敲降组细胞中上调明显。基因本体论功能富集分析显示,差异基因最明显富集在血管生成的功能上。京都基因与基因组百科全书信号通路富集分析显示,涉及的相关通路主要包括细胞粘着斑、细胞外基质受体相互作用等。LDLR敲降组条件培养基中CEA含量为43.75±8.43,高于对照组(1.15±0.14,P<0.001)。血管生成实验结果显示,在5 h,用LDLR敲降组MHCC-97H细胞的条件培养基培养HUVEC细胞形成的血管主结点数、主分段数和网格总面积分别为(295.3±26.4)个、(552.5±63.8)个和(2239781.0±138211.9)平方像素,均高于对照组[分别为(113.3±23.5)个、(194.8±36.5)个和(660621.0±280328.3)平方像素,均P<0.01];用LDLR敲降组HLE细胞的条件培养基培养HUVEC细胞形成的血管主结点数、主分段数和网格总面积分别为(245.3±42.4)个、(257.5±20.4)个和(2535754.5±249094.2)平方像素,均高于对照组[分别为(113.3±23.5)个、(114.3±12.2)个和(1565456.5±219259.7)平方像素,均P<0.01];在对照组MHCC-97H细胞条件培养基中加入CEA培养HUVEC细胞形成的血管主结点数、主分段数和网格总面积分别为(178.9±12.0)个、(286.9±12.3)个和(1966990.0±126249.5)平方像素,均高于对照组[分别为(119.7±22.1)个、(202.7±33.7)个和(1421191.0±189837.8)平方像素,均P<0.01]。肝癌组织中LDLR的表达与CEA的表达无相关性,与肝癌组织中CD31的表达、血清CEA水平、血清ALT水平均呈负相关(r=-0.167,P=0.044;r=-0.061,P=0.032;r=-0.147,P=0.05)。肝癌组织中CEA的表达与CD31的表达呈正相关(r=0.192,P=0.020),血清CEA水平与血清ALT水平呈正相关(r=0.164,P=0.029)。结论肝癌细胞敲降LDLR可通过释放CEA促进肝癌血管异常化。

肿瘤血管异常化的基础研究与临床应用进展

肿瘤病理性血管的形成可介导缺氧和高渗漏的肿瘤微环境,进而促进肿瘤复发转移、免疫抑制及药物抵抗等诸多肿瘤恶性生物学行为的发生。在肿瘤发生发展的过程中,微环境中的促血管生成因子如血管内皮生长因子(VEGF)和血管生成素(Ang)等被大量释放,进而刺激周围正常血管的增生和突破,形成比正常血管更脆弱、更不稳定以及更容易出血和渗漏的血管网络从而促进肿瘤的生长和扩散。因此,了解和干预肿瘤异常血管生成的机制,可为肿瘤的治疗提供新的思路和方法。虽然通过阻断肿瘤血管形成从而减少肿瘤血供和营养的抗血管生成疗法在肿瘤治疗中已取得一定成功,但适用肿瘤类型的局限性及其可能存在的副反应和耐药性一定程度上限制了临床应用的普适性。研究结果表明,通过改善肿瘤血管的结构和功能可以增加氧气和药物的输送效率以及增加免疫细胞浸润,这种促进血管的修复和正常化的策略是当前肿瘤研究和临床治疗中的热点。

PD-L1在混合型肝癌中的表达及临床意义

目的检测混合型肝癌组织中程序性死亡蛋白配体1(PD-L1)的表达水平,探讨PD-L1表达水平与混合型肝癌患者临床特征和预后的关系。方法回顾性分析2011年1月至2019年12月天津医科大学肿瘤医院收治并行手术治疗的75例混合型肝癌患者的临床资料,其中男性61例,女性14例,年龄范围36~77岁,中位年龄55岁。应用免疫组化法检测75例癌组织中PD-L1表达水平,并分为PD-L1阴性组(n=66)和阳性组(n=9),并分析其与患者临床病理学特征及预后的关系。结果在低分化混合型肝癌的癌组织中PD-L1表达阳性比例为21.1%(8/38),高于中高分化癌组织的2.7%(1/37),差异有统计学意义(χ^(2)=4.366,P=0.037)。PD-L1阳性患者的中位无复发生存期(DFS)、总生存期(OS)分别为12.3个月和15.1个月,低于PD-L1阴性患者的中位DFS 14.4个月和OS 23.3个月,但仅DFS差异具有统计学意义(χ^(2)=4.052,P=0.044)。在多因素分析中,仅有大血管侵犯(DFS:HR=1.965,95%CI:1.119~3.450,P=0.019;OS:HR=1.781,95%CI:1.022~3.105,P=0.042)和淋巴结转移(DFS:HR=2.451,95%CI:1.1033~5.814,P=0.042;OS:HR=2.652,95%CI:1.120~6.279,P=0.027)是影响患者DFS、OS的独立预后因素。结论PD-L1在低分化混合型肝癌中的阳性比例较中高分化癌高;大血管侵犯和淋巴结转移是影响混合性肝癌患者预后的独立因素。

Carba NP法对产碳青霉烯酶菌株快速检测的研究

目的探讨生化试验Carba NP法用于产碳青霉烯酶肠杆菌属和假单胞菌属细菌的快速检测,以及鉴别区分产碳青霉烯酶A、B、D类型的准确程度与适用性。方法对2014年10月-2015年3月从医院临床标本分离的23株亚胺培南耐药菌株进行Carba NP法试验,并将阳性结果与PCR结果进行比对。结果 Carba NP法检测的23株胺培南耐药菌株中4株显色结果呈阳性,说明其产生碳青霉烯酶,并可将其进一步区分为2株A型、2株B型;对该4株耐药菌进行PCR检测产碳青霉烯酶基因,1株含基因VIM,1株含基因NDM(B型),2株含基因KPC(A型),该结果与Carba NP法结果相符。结论 Carba NP法简单易行、成本低廉、快速方便,特异性和灵敏度均较高,不仅能快速检测出产碳青霉烯酶菌株,并且能进一步判定产碳青霉烯酶菌株的类型,节省了检测时间,有助于提高产碳青霉烯酶菌株的检出率,结合PCR及测序能有效控制医院获得性感染。

催化汽油降硫助剂对硫分布的影响

为了满足车用汽油产品质量升级的要求,需要降低催化汽油中的硫含量,对MS012汽油降硫助剂进行中试实验,验证助剂对硫分布的影响。实验结果表明:MS012汽油降硫助剂加入量达到系统总藏量的10%时,催化汽油降硫效果较好,催化汽油硫含量下降29.2%。