果胶内切酶的分离纯化和酶学特性研究

由黑曲霉发酵的商品果胶酶经SephacrylS-300柱层析分离纯化后得到电泳纯的果胶内切酶PG2,该酶的分子量为37.4ku,最适pH值为4.5,最适温度为35℃,Ca2+和Al3+对其酶活有明显的激活作用,Pb2+有明显的抑制作用,Km为1.26%,pI为3.12,对其氨基酸分析结果表明该酶中酸性氨基酸含量大于碱性氨基酸。

菠萝渣生产果胶酶的研究

以菠萝渣为主要营养源，在分析比较了黑曲霉与高大毛霉的产酶效果基础上，以黑曲霉为菌种生产果胶粗酶，通过硫酸铵盐析和Sephacryl S-300柱层析对果胶粗酶进行分离纯化。实验结果表明，培养基水分含量对黑曲霉产酶效果起到关键性作用，水分含量在40％～70％范围内，虽然黑曲霉菌体长势不如高大毛霉，但是产酶效果均明显优于高大毛霉。果胶粗酶经过硫酸铵盐析后酶活力由原来的68U／mg上升到了96U／mg。经过Sephacryl S-300柱层析分离纯化得到PFl和PF2两种酶，薄层层析分析结果表明PF1和PF2分别为外切果胶酶和内切果胶酶。