基于ACOX1-CPT2基因表达变化探讨肉苁蓉苯乙醇苷对高脂饮食诱导ApoE-/-小鼠肝组织脂质代谢的改善作用

目的:探讨肉苁蓉苯乙醇苷(phenylethanoid glycosides from Cistanche deserticola, PGCD)对高脂饮食诱导ApoE-/-小鼠肝组织脂质代谢的影响。方法:70只雄性ApoE-/-小鼠随机分为模型组(MOD)、阿伐他汀[20 mg/(kg·d)]+依折麦布[20 mg/(kg·d)]组(A+E)及肉苁蓉苯乙醇苷组[(250、500、1000 mg/(kg·d))](L-PGCD、M-PGCD、H-PGCD),均以高脂饮食(脂肪42%、胆固醇0.15%)饲养,另取14只雄性C57BL/6J小鼠喂食普通饲料作为正常对照组。12周末,检测各组小鼠血浆三酰甘油(TG)含量和谷丙转氨酶(ALT)和谷草转氨酶(AST)活性。取新鲜肝组织匀浆,ELISA方法检测脂肪酸合成酶(FAS)、长链脂酰辅酶A脱氢酶(LCAD)等脂质代谢相关酶的含量;检测谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)和超氧化物歧化酶(SOD)活性及丙二醛(MDA)和过氧化脂质(LPO)含量;RT-PCR检测肝组织酰基辅酶A氧化酶1(ACOX1)和肉碱棕榈酰基转移酶2(CPT2)的基因表达。结果:与模型组相比,3个剂量PGCD均明显降低血清和肝脏TG水平,抑制血清ALT、AST的活性,剂量依赖性地减少FAS含量,显著提升LCAD含量和GSH-Px和SOD活性,并降低MDA和LPO含量。RT-PCR实验显示,PGCD显著升高肝组织ACOX1和CPT2 mRNA表达。结论:肉苁蓉苯乙醇苷能够通过调控肝组织ACOX1和CPT2基因表达改善肝组织脂质代谢,降低肝组织的脂质沉积。

泰山蛹虫草多糖对高脂高胆固醇诱导ob/ob小鼠非酒精性脂肪肝的影响

目的:探讨蛹虫草多糖对高脂高胆固醇诱导ob/ob小鼠非酒精性脂肪肝的影响。方法:40只雄性ob/ob小鼠随机分为模型组、非诺贝特组[20 mg/(kg·d)]及[25、50、100 mg/(kg·d)]蛹虫草多糖组,均以高脂高胆固醇饮食(脂肪34.90%、胆固醇22.80%)饲养。12周末,酶法检测血清TC、TG、HDL-C水平,赖氏法检测肝组织中ALT与AST活力;分别采用WST-1法和TBA法检测肝组织SOD活性与MDA含量;分别采用酶法和ELISA方法测定肝组织TG、TC、FFAs含量;HE染色检测肝组织脂质蓄积水平。结果:与模型组相比,100 mg/(kg·d)蛹虫草多糖下调小鼠血浆TC和TG含量;3个剂量蛹虫草多糖组均不同程度升高HDL-C水平;升高肝组织SOD活性,下调肝组织MDA含量;50、100 mg/(kg·d)剂量蛹虫草多糖下调肝组织TG和TC含量,降低ALT活性,100 mg/kg·d蛹虫草多糖下降AST活性;HE染色结果显示蛹虫草多糖显著改善肝脏脂质变性。结论:泰山蛹虫草多糖可通过调控血脂、减轻氧化应激水平改善高脂高胆固醇诱导的脂肪肝病变,对非酒精性脂肪肝具有良好防治效果。

顶空-气相色谱法与氢气微电极法用于富氢水中氢气含量的检测

氢气含量为富氢水的关键指标之一,但目前尚无标准检测方法。本文将超饱和富氢水稀释后采用顶空-气相色谱法与氢气微电极法测定了氢气含量,对检测方法进行了条件优化、方法学评价,并对市售富氢水产品进行了氢气含量检测。结果显示,顶空-气相色谱法优化后的顶空进样平衡温度为70℃、平衡时间为20 min。在0~1.61 mg/L氢气含量范围内决定系数(R^(2))为0.9976,在0.161、0.805、1.449 mg/L添加水平,回收率分别为104.90%、102.22%和97.78%,相对标准偏差(RSD)分别为3.87%、2.29%和1.69%。氢气微电极法在0~1.61 mg/L氢气含量范围内R^(2)为0.9978,在0.161、0.805、1.449 mg/L添加水平,回收率分别为96.75%、95.78%和98.00%,RSD分别为1.84%、0.98%和2.80%。对7种市售罐装富氢水的检测发现,不同产品中氢气含量相差较大,从0.8~6.2 mg/L不等,但均达到现有团体标准的要求。开盖后超饱和富氢水中氢气存留量在30 min内降低约10%,6 h内降低约50%。本研究建立了富氢水中氢气含量的检测方法,顶空-气相色谱法与氢气微电极法均可用于实际样品的测定。

基于肠道菌群调控探讨泰山蛹虫草多糖对ob/ob小鼠肝组织脂质代谢和炎症反应的影响

目的:探讨蛹虫草多糖对高脂高胆固醇诱导ob/ob小鼠肝组织脂质代谢、炎症反应和肠道菌群的影响。方法:40只雄性ob/ob小鼠随机分为模型组、非诺贝特组[20 mg/(kg·d)]及蛹虫草多糖低、中、高剂量组[25、50、100 mg/(kg·d)],均以高脂高胆固醇饮食(脂肪34.9%,胆固醇22.8%)饲养。12周末,取新鲜肝组织匀浆,ELISA方法检测肝组织脂质代谢相关酶脂肪酸合成酶(FAS)、长链脂酰辅酶A脱氢酶(LCAD)活性及C反应蛋白(CRP)、单核细胞趋化蛋白1(MCP-1)、血清淀粉样蛋白A(SAA)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、核转录因子κB亚基p65(NF-κB p65)、白介素6(IL-6)含量。另取小鼠新鲜粪便,采用16S rDNA扩增子测序,检测多糖对小鼠肠道菌群的影响。结果:与模型组相比,高剂量蛹虫草多糖可显著降低FAS含量(P<0.05),显著提升LCAD含量(P<0.01);高、中剂量蛹虫草多糖显著抑制CRP表达(P<0.01,P<0.05),同时明显降低MCP-1和SAA表达(P<0.05)。与模型组比较,3个剂量蛹虫草多糖能显著抑制NF-κB p65和TNF-α表达(P<0.01,P<0.05),高剂量多糖可降低IL-6水平(P<0.05),而低、中剂量组无显著性差异。16S rDNA检测显示,高剂量多糖可逆转肠道有益菌群Marinifilaceae、Odoribacter、Lachnospiraceae等在模型组小鼠中的丰度降低。结论:泰山蛹虫草多糖可通过调控肠道菌群改善肝组织脂质代谢,减轻炎症反应。

蛹虫草多糖对ApoE^(-/-)小鼠非酒精性脂肪性肝病的保护效应及机制

目的确证蛹虫草多糖(CMPS)对高脂饮食诱导的ApoE^(-/-)小鼠非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)的保护作用,并探讨相关机制。方法将32只ApoE^(-/-)小鼠随机分为ApoE^(-/-)组及CMPS(25、50、100μg/g)组,均高脂饲养,CMPS组同时喂饲相应剂量CMPS干预。另取8只C57BL/6小鼠普通饲料喂饲作为野生对照组(WT组)。12周后取材,计算小鼠肝脏指数,HE染色观察肝脏组织学改变,按照试剂盒说明检测血清甘油三酯(TG)浓度及肝脏TG浓度、超氧化物歧化酶(SOD)活性、过氧化脂质(LPO)含量。荧光定量PCR及Western blot分析肝组织中过氧化物酶体增殖物激活受体α(PPARα)及酰基辅酶A氧化酶1(ACOX1)的表达水平。结果与ApoE^(-/-)组相比,CMPS干预可明显降低小鼠肝脏质量和肝脏指数,减轻高脂饮食诱导的肝脂肪变性,逆转肝脏、血清中TG水平的升高。同时,CMPS组肝脏中PPARα及ACOX1的mRNA和蛋白表达均上调。此外,CMPS喂饲可增加ApoE^(-/-)小鼠肝脏中抗氧化酶SOD活性,降低肝脏LPO含量。结论CMPS有效改善高脂饮食诱导的ApoE^(-/-)小鼠非酒精性脂肪性肝病,其机制可能与其促进肝内脂肪酸氧化和抑制氧化应激有关。