藜麦内参基因筛选及盐胁迫相关基因表达分析

为了利用实时荧光定量PCR(quantitative Real-Time PCR,qRT-PCR)分析藜麦(Chenopodium quinoa Willd)相关基因表达,提高结果的准确性,筛选出稳定表达的内参基因至关重要.我们分别利用geNorm、NormFinder和Bestkeeper程序分析了6个藜麦候选内参基因在NaCl胁迫下表达的稳定性,并用实时荧光定量PCR技术对藜麦盐胁迫相关基因P5CS1和CMO基因相对表达量进行分析.结果表明,藜麦在NaCl胁迫下ACT-1和TUB-6做为内参基因表达最稳定,为最佳内参基因;藜麦P5CS1基因表达水平上调6倍左右,CMO基因上调30~40倍.本研究为NaCl胁迫下藜麦基因表达分析提供了可靠的内参基因,并且对NaCl胁迫下P5CS1和CMO基因表达情况做出初步分析.

藜麦CqNHX基因家族鉴定及表达模式分析

NHX基因亚家族在植物响应盐胁迫的过程中起到重要作用.本研究对藜麦CqNHX基因家族进行系统分析,结果表明:藜麦基因组中存在10个CqNHX基因家族成员,基于系统发育进化树被分为3组,每组的基因结构及功能相似;部分CqNHX基因的表达具有明显的组织特异性,且部分基因受到干旱和高温胁迫的调控.

中华补血草LsRab7基因的克隆及盐、干旱胁迫下表达分析

利用RT-PCR技术从中华补血草中获得了LsRab7基因的cDNA序列,利用NCBI ORF founder分析表明,该基因包含1个618 bp的开放阅读框,编码含205个氨基酸残基的蛋白质,利用ExPASy服务器预测其相对分子质量为22 849.95,理论等电点为5.67.qRT-PCR分析结果表明,在盐处理或干旱处理条件下,在一定时间内LsRab7基因的表达水平均有升高,说明LsRab7可能参与中华补血草的抗逆反应过程,为探究中华补血草的抗逆分子机制奠定了一定的基础.

苹果砧木YUCCA10a基因的克隆及其在嫁接树体的定量表达分析

为了研究M9矮化砧和八棱海棠砧YUCCA10a基因的结构特征及其嫁接树体的表达特征,从M9矮化砧和八棱海棠砧中克隆了YUCCA10a基因,并对该基因进行了序列分析以及不同时期2种砧木嫁接"烟富3"的定量表达分析。通过分析表明,该基因的编码序列为1 149 bp,推导编码382个氨基酸,预测蛋白质分子量为94 285.29 Da,理论等电点为5.08。实时荧光定量PCR结果表明,5月和10月份的M9矮化砧嫁接"烟富3"中YUCCA10a基因相对表达量明显低于八棱海棠砧,2种砧木嫁接的"烟富3"中YUCCA10a基因在10月份的相对表达量略高于5月份。本试验结果为研究M9矮化砧和八棱海棠砧YUCCA10a基因的结构特征和砧木对嫁接"烟富3"影响的机理方面提供理论依据。