KLF4对肿瘤干细胞自我更新和增殖潜能的影响

目的:分析Kr櫣ppel样因子4(Krppel-like factor4,KLF4)对肿瘤干细胞T3A-A3自我更新和增殖能力的影响。方法:构建靶向干扰KLF4的慢病毒载体pLVTHM-shKLF4,利用前期实验分离与鉴定的肿瘤干细胞T3A-A3,应用RT-PCR和Western blotting分别检测pLVTHM-shKLF4感染后T3A-A3细胞中KLF4mRNA和蛋白的表达。细胞球形成实验检测pLVTHM-shKLF4感染对T3A-A3细胞自我更新的影响,平板集落形成实验检测T3A-A3细胞的克隆形成能力,流式细胞术检测T3A-A3细胞周期变化。裸鼠皮下移植瘤实验观察pLVTHM-shKLF4干扰KLF4表达后对T3A-A3细胞移植瘤生长的影响。结果:与肝癌细胞BEL-7402、HepG2相比,肿瘤干细胞T3A-A3表达更高水平的KLF4;pLVTHM-shKLF4感染能够在mRNA和蛋白水平下调T3A-A3细胞中KLF4的表达。pLVTHM-shKLF4感染的T3A-A3细胞形成细胞球的直径明显小于对照病毒的pLVTHM-shNC感染的T3A-A3细胞[(104.33±16.28)vs(186.67±28.15)μm,P<0.01],pLVTHM-shKLF4感染细胞形成的细胞克隆数目明显少于对照细胞[(83.5±7.78)vs(125±9.19)个,P<0.01),pLVTHM-shKLF4感染的T3A-A3细胞G1期比例明显升高[(39.65±4.03)%vs(29.35±1.00)%,P<0.01]。pLVTHM-shKLF4感染的T3A-A3细胞的移植瘤生长速度较对照细胞移植瘤明显减慢[细胞接种33 d,(46.14±12.94)vs(228.12±94.86)mm3,P<0.01]。结论:干扰KLF4的表达可抑制肿瘤干细胞T3A-A3的自我更新及其在体内外的增殖潜能。

离子通道与肿瘤

钾、钙、氯等离子通道在肿瘤细胞中异常表达,与肿瘤的发生发展密切相关。其可能机制是离子通道通过调节细胞膜电位、细胞周期、细胞体积、胞内钙浓度和胞质pH值等调控肿瘤细胞增殖与凋亡。本文综述了离子通道与肿瘤关系的研究进展,随着研究不断深入,离子通道有可能成为防治肿瘤的新靶标。

癌基因和抑癌基因中的阴阳

癌症发生是癌基因(阳)和抑癌基因(阴)逐渐不平衡表达的结果,二者在调控细胞生长和增殖过程中发挥相反作用。以癌基因myc和抑癌基因p53为例,说明在癌基因和抑癌基因中同样存在阴阳。阴基因p53的阴中之阴是抑制细胞生长促进细胞凋亡;阴中之阳是修复受损DNA,使细胞继续存活。阳基因myc的阳中之阳是促进细胞生长和增殖;阳中之阴是诱导细胞凋亡。阐明癌基因和抑癌基因中的阴阳作用,对于癌症全面深入研究具有重要意义。

癌蛋白促凋亡现象引发的思考

肿瘤生物学中一个矛盾现象是:曾经被认为促进肿瘤生长增殖的癌蛋白,现在发现它可以引起肿瘤细胞自杀。自杀行为由癌蛋白促凋亡介导完成,MYC是其中的典型代表,癌蛋白的这种行为可能对肿瘤的发生发展具有重大意义,目前通过诱导肿瘤细胞凋亡治疗癌症是否完全合理,有待临床实践的进一步验证,今后的抗癌治疗应该辩证合理地看待肿瘤细胞凋亡。

microRNA-145在肿瘤中的作用

microRNA（miRNAs）是一类非编码蛋白质的单链小RNA，由内源基因编码，主要功能是负性调节靶基因的表达。目前发现microRNA多定位于肿瘤相关的脆性位点，与肿瘤的发生密切相关。miR-145是近年来新发现的一类具有肿瘤抑制作用的microR-NA，可以靶向多个肿瘤相关基因，参与肿瘤生长、转移侵袭和肿瘤血管生成。并且，miR-145可以调控细胞重新编程基因OCT4、SOX2、KLF4和C-MYC的表达，由于这些基因也具有癌基因的特性，因此miR-145在肿瘤干细胞中的作用也受到关注。本文就miR-145在肿瘤中的这些作用进行综述。

KLF4对肝癌细胞HepG2化疗和光动力治疗的调节作用

目的:分析重组人Krüppel类因子4(Krüppel-like factors 4,KLF4)基因在肝癌HepG2细胞中对化疗和光动力治疗的调节作用。方法:构建人KLF4慢病毒pWPTS-KLF4载体,应用RT-PCR、Western blotting检测pWPTS-KLF4感染后HepG2细胞中KLF4 mRNA和蛋白的表达,MTT实验检测HepG2细胞对顺铂、环磷酰胺或氟尿嘧啶耐受性的变化以及对光动力治疗敏感性的变化,罗丹明123染色检测HepG2细胞线粒体膜电位的变化。结果:成功构建慢病毒pWPTS-KLF4载体。顺铂、环磷酰胺或氟尿嘧啶处理HepG2细胞72 h后,pWPTS-KLF4感染组HepG2细胞存活率较对照组明显增高[(43.43±4.78)%vs(18.09±1.02)%;(110.51±4.58)%vs(75.23±5.92)%;(34.55±2.93)%vs(19.16±1.32)%,P<0.01]。光敏剂艾拉介导的光动力治疗后24 h,pWPTS-KLF4感染组HepG2细胞存活率较对照组明显减少[(37.16±3.26)%vs(57.24±8.01)%,P<0.01],细胞的线粒体膜电位明显降低。结论:重组人KLF4可以提高HepG2细胞化疗耐受性,增加光动力治疗敏感性。

shRNA干扰HERG钾通道治疗裸鼠皮下人成神经细胞移植瘤

目的:探讨发卡结构小片段RNA(small hairpin interfering RNA,shRNA)干扰人ERG(human ether-α-go-go-related gene,HERG)钾通道治疗裸鼠皮下人成神经细胞移植瘤的疗效和作用机制。方法:用真核转录载体mU6pro构建针对herg基因的发卡状RNA干扰质粒(shRNA-herg)。18只BALB/c裸小鼠皮下接种成神经细胞瘤SH-SY5Y细胞,建立裸鼠皮下人成神经细胞移植瘤模型,当瘤体积达到100mm3时随机分成3组,分别为生理盐水组(Ⅰ)、对照质粒组(Ⅱ)、干扰质粒组(Ⅲ)。各组瘤内分别注射生理盐水、对照质粒、干扰质粒,以后每7d注射1次,连续15d。观察各组肿瘤生长情况,RT-PCR测定肿瘤组织herg基因mRNA含量变化,免疫组化检测肿瘤组织中HERG钾通道蛋白变化。结果:经治疗后,第Ⅲ组肿瘤生长受到明显抑制,Ⅱ、Ⅲ组抑瘤率分别为3.04%和29.78%(P<0.05)。肿瘤组织内herg基因mRNA含量、HERG钾通道蛋白,Ⅲ组较Ⅰ、Ⅱ组表达减弱。结论:构建的shRNA干扰质粒可通过靶向性抑制herg基因及其编码的HERG钾通道蛋白的表达,有效地抑制人成神经细胞瘤的生长。

HERG钾通道抑制——祸兮?福兮?

过去的10多年,许多药物由于引起QT间期延长被撤市或限制使用,原因可能是HERG钾通道受到抑制,可诱发致死性心律失常。抑制HERG钾通道的药物因而成为临床用药的潜在祸患。另一方面,HERG钾通道还参与癌症和骨骼肌萎缩的发病过程,提示HERG钾通道抑制剂可能对这些疾病具有潜在治疗价值。HERG钾通道抑制究竟是"祸"还是"福"呢?本文就这一现象进行讨论。

肿瘤细胞的低碳生活

细胞能量异常是肿瘤细胞的十大特征之一,正常细胞能量代谢主要通过线粒体氧化磷酸化释放二氧化碳,而肿瘤细胞能量代谢主要通过有氧糖酵解产生乳酸代替二氧化碳释放,这种能量代谢的特点使内环境中二氧化碳释放减少。因此,肿瘤细胞处于一种低碳生活状态,具有体细胞逐渐恶变的进程中获得特征性生长表型,在肿瘤细胞增殖、侵袭转移中发挥独特的生物学作用。本文就肿瘤细胞低碳生活与肿瘤细胞主要的特殊能量需求、基因突变、环境选择、酸抵抗、凋亡逃避和肿瘤干细胞特性维持等机制进行综述。

阿瑞匹坦预防高致吐性化疗所致恶心呕吐的效果和安全性评价

目的:探讨神经激肽1(NK1)受体拮抗剂阿瑞匹坦联合地塞米松、托烷司琼预防高致吐性化疗方案所致恶心呕吐的效果,阐述该方案对患者生活质量的影响,并进一步评价其治疗的安全性。方法:选择156例经病理确诊为恶性肿瘤的患者,其中乳腺癌129例,肺癌24例,宫颈癌3例,接受顺铂≥70mg·m^(-2)的化疗方案或环磷酰胺联合蒽环类的化疗方案,其中环磷酰胺使用量大于1 000mg·d^(-1)。随机分为2组,观察组75例,患者于第1天化疗前1h口服阿瑞匹坦125mg及地塞米松6mg,静滴托烷司琼4mg,第2~4天口服阿瑞匹坦80mg及地塞米松3.75mg;对照组81例,患者于第1天化疗前口服地塞米松6mg,静滴托烷司琼4mg,第2~4天口服地塞米松3.75mg。主要研究终点为急性和延迟性恶心呕吐的完全缓解率比较,次要研究终点为评价患者生活质量的改善情况。结果:总体评价主要研究终点,即恶心呕吐的缓解情况,观察组完全缓解率为69.3%(52/75),对照组完全缓解率为53.1%(43/81),2组间比较差异有统计学意义(P=0.049);其中对于急性恶心呕吐(0~24h)的缓解情况,观察组完全缓解率为78.7%(59/75),对照组完全缓解率为75.3%(61/81),2组比较差异无统计学意义(P=0.705);对于延迟性恶心呕吐(25~120h),观察组完全缓解率为76.0%(57/75),对照组完全缓解率为54.3%(44/81),2组比较差异有统计学意义(P=0.007)。次要研究终点观察,观察组和对照组患者呕吐功能性生活指数(FLIE)平均得分分别为(120.8±12.4)和(84.0±8.7)分,2组比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论:阿瑞匹坦预防高致吐性化疗引起的急性及延迟性恶心呕吐疗效确切,预防延迟性恶心呕吐效果优于托烷司琼,并可以提高患者的生活质量。

2022年ASCO转移性乳腺癌的治疗进展

美国临床肿瘤学会(ASCO)2022年会的乳腺癌研究首次证实HER-2靶向治疗可改善HER-2低表达患者的生存预后,HR阳性/HER-2阴性转移性乳腺癌患者使用戈沙妥珠单抗后延长无进展生存期,驱动基因HER-3成为乳腺癌治疗的新靶点,哌柏西利联合来曲唑一线治疗的总生存结果为阴性,HR阳性/HER-2阴性转移性乳腺癌标准治疗进展后更换内分泌药物并持续CDK4/6抑制剂治疗仍可延长患者无进展生存期。本文将就此次大会中有关转移性乳腺癌治疗的重要进展进行综述。

老年乳腺癌临床特征预后多因素分析

目的探讨老年乳腺癌患者的临床病理学特征、生存状态及预后的独立影响因素。方法回顾性分析267例老年乳腺癌患者(≥65岁)和1 910例非老年乳腺癌患者(<65岁)的临床病理学特征、复发转移及生存情况。结果老年与非老年乳腺癌患者5年无瘤生存率(disease free survival,DFS)和总生存率(overall survival,OS)比较差异均无统计学意义(P=0.185,P=0.206);老年乳腺癌患者中,Ⅲ期患者12.7%,肿瘤直径>5 cm者4.1%,腋窝淋巴结阳性>4枚者15.0%,组织学分级Ⅲ级患者7.5%,分子亚型Luminal A型60.3%,行乳腺癌根治术者70.4%,术后行辅助化疗50.6%,术后放疗21.0%,以上患者比例与非老年乳腺癌组比较差异均具有统计学意义(均P<0.05)。单因素及多因素分析结果显示分子亚型、肿瘤大小、淋巴结状态、组织学分级、病理类型是影响老年乳腺癌DFS及OS的危险因素。结论老年乳腺癌患者具有特殊的临床特征和独立预后因素,术后化疗及内分泌治疗可延长老年乳腺癌患者的生存期。

205例初治转移性乳腺癌的临床病理特点和生存分析

目的：探讨转移性乳腺癌（metastatic breast cancer，MBC）的临床病理特征及生存预后。方法：收集2008年1月至2010年12月天津医科大学肿瘤医院205例乳腺癌根治术后出现复发及转移的初治患者的临床资料，对其临床病理特征及生存情况进行回顾性分析。结果：205例初治MBC患者的中位生存期为32（1～132）个月，分子分型为Luminal A、Luminal B、HER-2过表达型和三阴型乳腺癌，其中位生存期分别为36（4～132）、32（7～122）、29（1～85）和24（1～98）个月。单因素和多因素分析显示，淋巴结转移、临床分期、分子分型、内脏转移、首发转移部位数目均与转移性乳腺癌患者的预后有关（P〈0.05）。淋巴结转移、临床分期、分子分型及内脏转移是影响转移性乳腺癌患者预后的独立因素（P〈0.05）。结论：淋巴结转移、临床分期、三阴型乳腺癌及内脏转移是影响不良预后的独立因素，对判断预后和制定个体化治疗提供了重要依据，并对今后临床工作的开展具有指导意义。

乳腺癌多原发癌的临床病理特征及预后分析

目的:探讨乳腺癌多原发癌(multiple primary cancers,MPCs)患者的临床病理特征及预后因素。方法:回顾性分析2005年1月至2015年12月天津医科大学肿瘤医院收治的226例乳腺癌MPCs患者的临床病理资料,应用单因素及多因素分析方法分析其临床病理学特征及影响预后的因素。结果:226例中74例(32.7%)为同时型MPCs,152例(67.3%)为异时型MPCs。在第二原发恶性肿瘤中甲状腺癌最常见,为90例。患者的中位随访时间为84.75(4.1~384.5)个月,226例患者的3年及5年总生存率分别为91.7%和82.9%。乳腺癌MPCs患者的病理特征以肿瘤负荷大(65.5%vs.34.5%,P=0.005)和ER受体阳性(76.1%vs.23.9%,P=0.046)多见,异时型MPCs更倾向于高龄人群(62.4%vs.37.6%,P<0.001)。无淋巴结转移(95%CI:0.341~0.932,P=0.025)和异时型MPCs(95%CI:0.033~0.220,P<0.001)患者预后佳。结论:甲状腺是最常见的第二原发肿瘤,肿瘤负荷大及ER受体阳性患者易发生乳腺癌MPCs,高龄患者易患异时型MPCs,有无淋巴结转移和MPCs的类型是患者预后的独立影响因素。

双膦酸盐治疗乳腺癌骨转移患者的临床病理特征及预后分析

目的:探讨乳腺癌骨转移患者的临床、病理、治疗及预后因素。方法:收集2005年1月至2013年4月天津医科大学肿瘤医院收治的183例至少接受6个月双膦酸盐治疗的乳腺癌骨转移患者的临床资料,根据双膦酸盐类型分为帕米膦酸二钠组、唑来膦酸组及帕米膦酸二钠序贯唑来膦酸组,探讨骨转移的特点、骨相关事件(skeletal-related events,SREs)、治疗及预后特征。结果:胸椎和肋骨为骨转移的常见转移部位,骨转移至发生首次SREs的中位时间为4.2个月,51.9%(95/183)患者发生SREs,累计SREs事件数达167次,其中110次(65.9%)发生在骨转移后1年内,SREs类型以骨放疗为主。患者在不同双膦酸盐药物组的SREs发生率差异无统计学意义(P>0.05)。183例患者骨转移后的中位生存期为43.1个月,激素受体状态、无病生存期、是否合并内脏转移及脊柱转移与否是乳腺癌骨转移患者的独立预后因素(P<0.05)。结论:胸椎和肋骨是乳腺癌骨转移的常见转移部位,SREs主要发生在骨转移后1年内并以骨放疗为主。激素受体阴性、无病生存期短、合并内脏及脊柱转移是影响乳腺癌患者骨转移不良预后的独立因素。

luminal B型晚期乳腺癌临床病理特征及预后分析

目的:探讨luminal B型晚期乳腺癌患者的临床病理特征及预后因素。方法:收集2008年6月至2013年6月天津医科大学肿瘤医院收治的206例luminal B型晚期乳腺癌患者的临床资料,回顾性分析其临床病理特征及影响预后的因素。结果:206例患者中HER-2阳性型54例(26.2%),HER-2阴性型152例(73.8%)。其中HER-2阳性型患者中Ki-67>30%为57.4%(31/54),较HER-2阴性型的55.9%(85/152)高,差异具有统计学意义(P<0.01);HER-2阳性型患者中无病生存期(disease free survival,DFS)<36个月为79.6%(43/54),较HER-2阴性型的65.1%(99/152)高,差异具有统计学意义(P<0.05)。206例患者的中位生存期为25(2.1~85.0)个月,是否合并内脏转移、一线解救化疗疗效、是否行解救内分泌治疗是luminal B型晚期乳腺癌患者的独立预后因素(P<0.05)。结论:luminal B型晚期乳腺癌患者中,HER-2阳性型中的Ki-67指数比HER-2阴性型更高,且更易在3年内发生复发、转移。合并内脏转移、一线解救化疗时病情进展、未行解救内分泌治疗是影响luminal B型晚期乳腺癌患者不良预后的独立因素。

初诊Ⅳ期老年乳腺癌MDT诊治报道

本文介绍1例初诊Ⅳ期老年乳腺癌病例的多学科专家组(multidisciplinary team,MDT)诊治过程。该病例初诊时78岁,右乳腺巨大肿物破溃,伴随多发骨转移、肺转移和淋巴结转移,疾病分期为Ⅳ期老年乳腺癌。经MDT讨论后患者接受紫杉醇联合卡培他滨化疗,疗效不显著,再次MDT讨论后,接受右乳腺癌改良根治术。术后行内分泌药物(来曲唑)治疗,实现疾病控制和生活质量提高。治疗10个月,疾病进展,更换内分泌治疗(氟维司群),获得长期获益。唑来膦酸治疗20个月后,患者出现左侧下颌骨病变,因无法明确是下颌骨坏死还是骨转移进展,经MDT讨论并尊重患者意愿,行姑息治疗9个月后死亡,总生存期32个月。该诊治过程说明,MDT诊治对转移性乳腺癌治疗可提供重要支持;老年乳腺癌因不同的疾病特点且缺乏前瞻性临床研究数据,尤其需要MDT模式指导治疗,全面评估风险与获益,予以个体化治疗方式。

HDAC抑制剂下调乳腺癌细胞系HER-2的表达及miRNA表达谱的变化

目的:探讨组蛋白去乙酰化酶(histone deacetylase,HDAC)抑制剂下调乳腺癌HER-2的表达机制,为乳腺癌抗HER-2治疗提供新的实验依据。方法:利用HDAC抑制剂处理HER-2阳性乳腺细胞,q PCR和Western检测HER-2基因和蛋白水平的变化,同时采用mi RNA芯片筛选HDAC抑制剂相关的mi RNA谱,q PCR验证mi RNA表达变化。结果:体外细胞实验证实HDAC抑制剂TSA和SAHA可下调乳腺癌细胞系HER-2的表达,TSA可下调BT474的HER-2基因表达,浓度为100 nmol时下调10.7%,浓度为200 nmol时下调38.9%(P<0.05)。TSA对原代细胞HER-2基因表达无明显下调(P>0.05)。SAHA对BT474中HER-2基因表达的影响,浓度5μmol/L组下调93.9%(P<0.05),而1μmol/L组无明显下调。SAHA对原代细胞HER-2基因表达下调较为明显,浓度1μmol/L时下调92.7%,浓度5μmol/L时下调87.1%。通过mi RNA芯片筛选出7条mi RNA,q PCR监测SAHA、TSA处理后,mi R-762基因表达上调2.11倍。结论:HDAC抑制剂可能通过mi RNA表达谱改变介导下调乳腺癌HER-2的表达。

小白菊内酯抗肿瘤作用机制研究进展

小白菊内酯是中药野生甘菊的主要提取成分,它是倍半萜烯内酯的主要成分,过去主要用来治疗偏头痛,发热和类风湿性关节炎等。近年来研究发现,小白菊内酯在多种肿瘤中通过不同机制发挥抗癌作用,并且研究发现小白菊内酯可以增强化疗药物和放疗对肿瘤细胞的杀伤性。因此小白菊内酯成为抗肿瘤药物的研究热点。本文主要从小白菊内酯的药理研究进展进行综述,以期进一步推动小白菊内酯在抗肿瘤作用中的研究和应用。