N-乙烯基-2-吡咯烷酮-丙烯酸共聚物/聚乙二醇半互穿网络水凝胶的合成及其药物缓释性能

以 N -乙烯基 -2 -吡咯烷酮 (NVP)、丙烯酸 (AA)及聚乙二醇 60 0 0 (PEG60 0 0 )为原料 ,N ,N -亚甲基双丙烯酰胺 (BIS)为交联剂 ,偶氮二异丁腈 (A IBN )为引发剂 ,采用自由基聚合法合成了乙烯基吡咯烷酮 -丙烯酸共聚物与聚乙二醇 (poly[NVP-AA] /PEG)半互穿网络 (semi-IPN )水凝胶。聚合物的 DSC分析表明材料属于非均相材料 ,体系中的 poly[NVP-AA]与 PEG部分相容。溶胀性能的测定显示材料对 p H敏感。利用上述聚合物为载体对抗癌药 5 -氟脲嘧啶 (5 -F U )进行包埋 ,分别在模拟的胃液和肠液 ,即 SGF和 SIF缓冲溶液中 ,3 7℃下进行体外释药研究。结果表明 ,随着样品中 PEG量的增加 ,释药曲线趋于平缓 ,释药周期变长 ,最终的平衡释药量减小 ;另外 ,聚合物交联度对释药性能的影响与释放介质有关 ,在 SIF缓冲溶液中 ,释药行为基本与交联度无关 ,而在 SGF缓冲溶液中 ,交联度越高 ,释药周期越长。

茯苓总多糖对H1N1流感疫苗和乙肝疫苗抗原的佐剂作用

目的研究茯苓总多糖（PCP）对人用H1N1流感疫苗抗原和乙肝疫苗抗原的佐剂作用。方法在50℃条件下,采用水提、醇沉、透析和冷冻干燥方法制备PCP。苯酚-硫酸法测定总多糖含量,凝胶渗透色谱法测定多糖相对分子质量分布,毛细管电泳法测定单糖组成。H1N1流感病毒裂解液为抗原（每鼠3μg）,与PCP（每鼠0.2或1.0 mg）联用,肌内注射免疫小鼠1次,免疫后14 d采用ELISA法测定小鼠血清特异性抗体Ig G滴度。乙肝表面抗原（HBs Ag）蛋白为抗原（每鼠2μg）,与PCP（每鼠1.0 mg）联用,肌内注射免疫小鼠2次,于第2次免疫后14,21,28和35 d,采用ELISA法测定小鼠血清特异性抗体Ig G滴度。结果PCP中多糖含量为40.8%,由岩藻糖、甘露糖、葡萄糖和半乳糖组成,摩尔比为1.00∶1.36∶0.48∶2.67。PCP与H1N1流感抗原联用免疫小鼠1次,能明显提高小鼠抗原特异性抗体Ig G滴度（P〈0.05）,效果与铝佐剂相当。与单用HBs Ag抗原组相比,PCP与HBs Ag联用初次免疫即能显著提高小鼠血清抗原特异性抗体滴度（P〈0.01）,且与铝佐剂组无显著性差异;二次免疫后14~21 d,PCP与HBs Ag联用组小鼠抗体水平进一步升高,且高于铝佐剂组（P〈0.05）,28~35 d PCP与HBs Ag联用组小鼠抗体滴度与铝佐剂组相当。结论PCP对人用H1N1流感疫苗和HBs Ag疫苗具有良好的佐剂活性,该多糖能显著提高小鼠体液免疫功能。

细胞色素P450CYP3A65斑马鱼模型建立及对环境污染物的生物响应

目的：建立细胞色素P450CYP3A65荧光标记转基因斑马鱼用于快速、直观检测重金属（铜、镉、锌）及类二噁英化合物五氯联苯（ PCB126）等环境污染物。方法 PCR方法钓取斑马鱼CYP3A65基因调控序列，构建于pT2AL200R150G转座载体克隆位点，将pTol2-CYP3A65-EGFP 质粒与pCS-TP 转座酶mRNA共同注射入斑马鱼胚胎单细胞，通过荧光筛选，遗传选育和建立荧光标记转基因斑马鱼品系 Tg （ CYP3A65-EGFP）；利用该转基因斑马鱼胚胎及幼鱼检测上述3种重金属及 PCB126的生物学响应。结果成功建立了CYP3A65荧光标记转基因斑马鱼品系，绿色荧光在肝和消化道表达；该转基因斑马鱼对3种重金属及PCB126产生生物学响应。染毒96 h后，铜0.1和0.2μmol·L^－1、镉0.35和0.7μmol·L^－1组、锌1.5和3μmol·L^－1组、PCB126所有浓度组荧光相对表达量显著增强（ P＜0.01）；铜0.9μmol·L^－1组、镉2.7和5.4μmol·L^－1组及锌24μmol·L^－1组荧光相对表达量显著减弱（ P＜0.01）；染毒168 h 后，铜0.1和0.2μmol·L^－1组、镉0.35和0.7μmol·L^－1组、锌1.5和3μmol·L^－1组及PCB1262～32μmol·L^－1浓度组荧光相对表达量显著增强（ P＜0.01），铜0.9μmol·L^－1组、镉2.7和5.4μmol·L^－1组、锌12和24μmol·L^－1组荧光相对表达量减弱（ P＜0.05），随着浓度增加荧光减弱，呈现出量效关系。结论 CYP3A65荧光标记转基因斑马鱼模型可以用来检测铜、镉、锌及PCB126等环境污染物。

α-淀粉酶抑制剂筛选方法的优化

目的对α-淀粉酶活性测定方法进行优化,用于α-淀粉酶抑制剂的筛选。方法采用3,5-二硝基水杨酸方法(Bernfeld法)测定α-淀粉酶活性。本实验对反应体系的总体积、可溶性淀粉浓度、α-淀粉酶浓度、阳性药阿卡波糖浓度分别进行考察和优化。结果建立一个系统稳定、结果可靠、重现性好的α-淀粉酶抑制剂筛选方法。结论优化后的Bernfeld法可用于α-淀粉酶抑制剂的筛选。

国内外新药研发平台建设的初步比较

新药研发平台是整合新药研发技术体系及相关要素而构成的对研发新药具有基础支撑和综合集成载体作用的、开放完整并不断发展创新的有机系统。国际上政府层面的平台比较宏观综合,科研院所和大型制药公司层面的平台具有系统性、规模性,中小型制药公司层面的平台比较细致专业。我国新药研发平台的建设自"九五"以来经历了萌芽期、雏形期,现已在"重大新药创制"科技重大专项的支持下步入全面建设期,从单一技术性的研发中心发展到包含完整研发链条的综合性技术平台。本文通过比较分析国内外平台建设情况,对今后我国新药研发平台的建设和管理提出了建议和展望。

胆固醇修饰的非天然HR序列肽类HIV-1融合抑制剂的合成及活性初筛

将胆固醇分子通过1个半胱氨酸侧链硫醚键和1个β-丙氨酸连接臂引入到所设计的非天然HR序列抗HIV融合活性多肽的C端和N端,合成了与天然C肽序列同源性很低的非天然序列的类肽抗HIV融合分子,以考察胆固醇修饰对非天然HR序列活性的影响,探讨克服耐药性的新思路.生物活性评价结果表明,胆固醇与HR肽C端结合物抑制HIV融合活性显著提高,而连接到N端的序列则完全失去了抗病毒活性,表明所设计的非天然序列确实具有与天然序列类似的作用机制.

用作HIV-1融合抑制剂的多肽及其类似物

HIV-1通过其包膜糖蛋白跨膜亚基gp41介导的病毒-细胞膜融合进入和感染靶细胞.HIV-1融合抑制剂以gp41为靶点,通过阻断病毒与宿主细胞膜的融合,在感染的初始环节切断HIV-1的复制周期.2003年,首个多肽类融合抑制剂T-20获美国食品药物管理局(FDA)批准上市,但其易被体内蛋白酶降解、临床剂量大、耐受性差,且耐药性HIV-1毒株也很快出现.针对这些缺点,近年来在融合抑制剂的作用机制研究和新融合抑制剂的研发等方面取得了重要进展.以gp41不同功能区为靶点,具有高活性和更好代谢性质的多肽及多肽类似物候选分子不断被发现,成为抗HIV药物研究领域的热点之一.本文综述了多肽和类肽类融合抑制剂的研究进展,为相关的药物开发和基础研究提供参考.

实施专利战略 提高研究所创新能力

结合军事医学科学院毒物药物研究所的实际工作，探讨了研究所如何运用专利战略，逐步形成具有自身特色的专利管理体系，提高研究所的综合创新能力。

国外药品专利战略及其启示

目前，美国、日本、德国作为国际医药专利申请数量全世界排名前3位的国家，其在实施药品专利战略方面的相关做法为我们提供了很好的参考。以介绍它们的药品专利战略为出发点，探讨其对我国制订和实施药品专利战略的启示。

HIV-1融合抑制剂研究现状及发展趋势

HIV-1融合抑制剂是继逆转录酶和蛋白酶抑制剂后的新一类抗HIV感染药物,通过阻断病毒与靶细胞膜的融合从而抑制病毒进入靶细胞,在感染的初始环节切断HIV-1的传播,其中多肽类融合抑制剂T-20已于2003年上市。HIV-1融合抑制剂以HIV-1跨膜糖蛋白gp41为作用靶标,它们是一些天然或合成的多肽以及小分子化合物,通过与gp41功能区结合从而抑制其促融合功能的发挥。近年来,随着对膜融合过程分子机制以及gp41功能研究的不断深入,新的以gp41不同功能区为靶点的融合抑制剂分子不断被发现,成为倍受关注的研究热点之一。本文着重对近年来HIV-1融合抑制剂的研究现状及发展趋势进行综述。