外周血中外泌体检测在喉癌下咽癌早期诊断中的临床研究

目的提取并检测喉癌、下咽癌的患者外周血中外泌体(exosomes)并探讨其临床意义。方法收集我院2015年6月～2017年6月共计22例头颈肿瘤患者术前外周血,其中喉癌11例,下咽癌11例,所有患者均术后病理明确诊断,并收集11例正常人血液作为对照组,用试剂盒System Biosciences(EXOTC10A-1)提取exosomes。采用透射电子显微镜下观察exosomes形态,纳米粒子跟踪分析(NTA)对exosomes进行计数(即颗粒浓度)和测粒径,蛋白浓度定量试剂盒(BCA)检测exosomes蛋白浓度,蛋白质免疫印迹(WB)检测蛋白的表达。结果喉癌组和下咽癌组的上清液中可以分离出肿瘤来源的exosomes,透射电子显微镜下观察具有杯状结构的特征,直径在30～100 nm,其体积比对照组更大。喉癌组及下咽癌组的exosomes蛋白浓度与对照组相比显著增加。三组exosomes中均检测到CD63蛋白及CD81蛋白,未检测到Calnexin蛋白,exosomes颗粒浓度各组间无明显差异。与对照组比较,喉癌组exosomes粒径增加但无显著差异,下咽癌组的exosomes粒径显著增加。结论喉癌、下咽癌患者外周血清来源的exosomes是十分有潜力的肿瘤标志物,可能对喉癌、下咽癌的早期诊断带来帮助。

难治性分泌性中耳炎术后听力的影响因素分析

目的探讨难治性分泌性中耳炎术后听力的影响因素。方法将160例患者分为对照组和联合组,分别采用单纯鼓膜置管术与乳突轮廓化联合鼓膜置管术,观察两组临床疗效,并分析可能影响术后听力改变的相关因素。结果联合组听力提高率明显高于对照组,差异有统计学意义;鼓膜表象及脱管史是影响术后听力的独立危险因素。结论乳突轮廓化联合鼓膜置管术治疗难治性分泌性中耳炎效果较好,鼓膜表象及脱管史是影响术后听力的重要因素。

完壁式乳突根治术治疗胆脂瘤型中耳炎80例

在中耳炎症中,胆脂瘤型中耳炎较为严重,易引起并发症,可导致周围的神经和血管损伤,造成面神经麻痹,严重者可危及生命[1],故一旦诊断为胆脂瘤型中耳炎,须及时行手术治疗,传统手术采用开放乳突根治术,侧重于清除病灶,防止颅内并发症,不注重提高听力。

鼻内镜手术治疗鼻腔鼻窦肿瘤35例临床分析

随着鼻内镜技术在临床日益普及,临床手术技巧的不断提高,通过鼻内镜手术治疗鼻腔鼻窦肿瘤日益增多。我院在开展鼻内镜治疗鼻内翻性乳头状瘤等良性肿瘤日益成熟的基础上,又逐渐开展鼻内镜下鼻腔鼻窦恶性肿瘤切除手术。现将2010年1月至2013年6月在我院行鼻腔鼻窦肿瘤鼻内镜手术的35例患者临床资料总结如下：

三种方法切除会厌囊肿的效果比较

目的分析支撑喉镜联合鼻内窥镜、单纯支撑喉镜、单纯麻醉喉镜下行会厌囊肿摘除效果,探讨三种方法治疗会厌囊肿的优劣。方法回顾性分析确诊为会厌囊肿的246例病例资料,按照手术方式分为单纯麻醉喉镜组(麻醉组)158例,单纯支撑喉镜组(喉镜组)46例和鼻内窥镜联合支撑喉镜组(联合组)42例。对三组患者手术结果进行分析。结果治愈率:联合组97.6%,喉镜组84.8%,麻醉组65.8%;术后并发症发生率联合组最低,其次是喉镜组,麻醉组最差。结论支撑喉镜联合鼻内窥镜组疗效最佳,其次是单纯支撑喉镜组,单纯麻醉喉镜组效果最差。

喉癌细胞来源外泌体通过微小核糖核酸-21-5p促进巨噬细胞M2极化的作用及机制研究

目的 研究喉癌患者术前及术后血清来源外泌体及其微小核糖核酸-21-5p(miR-21-5p)的变化,探讨喉癌细胞通过miR-21-5p促进巨噬细胞M2极化的机制。方法 收集正常人群血清以及喉癌患者术前和术后1个月及6个月血清样本,分离外泌体,纳米流式细胞仪揭示粒子粒径和数量,BCA和Western blot分析外泌体的含量和标记分子表达。建立人喉癌细胞系AMC-HN-8和巨噬细胞共培养体系以及外泌体处理巨噬细胞体系,流式分析巨噬细胞极化情况,qRT-PCR检测外泌体和细胞中miR-21-5p水平。结果喉癌术前和术后1个月及术后6个月血清来源外泌体CD9、CD63和CD81阳性表达,术前喉癌血清来源外泌体数量和蛋白浓度均高于对照组,而患者术后血清来源外泌体数量和蛋白浓度均比术前低。细胞水平发现AMC-HN-8与巨噬细胞共培养或者其来源外泌体处理巨噬细胞均降低了M1型巨噬细胞比例,提升M2型细胞比例。分子水平检测发现术前喉癌血清来源外泌体中miR-21-5p水平升高,术后则明显下降,AMC-HN-8与巨噬细胞共培养或其来源外泌体处理巨噬细胞均能升高巨噬细胞中miR-21-5p水平。抑制AMC-HN-8中miR-21-5p水平,其分泌的外泌体中miR-21-5p也受到抑制,处理巨噬细胞后,巨噬细胞中miR-21-5p水平和M2型细胞比例下降,而M1型细胞比例有所恢复。结论 喉癌患者血清外泌体含量以及miR-21-5p水平较高,喉癌细胞可通过外泌体传递miR-21-5p作用于巨噬细胞,促进巨噬细胞M2极化。

微囊泡和微泡变化与头颈部癌的疗效关系

1微囊泡（exosomes）和微泡（microvesicles）微囊泡（exosomes）和微泡（microvesicles）是由多种细胞产生的膜性小囊泡。这两类外囊泡能够影响血管形成和细胞外基质重组,参与建立适合转化和转移肿瘤细胞的微环境。在头颈部癌中,微囊泡和微泡存在于鼻咽癌相关的epstein-barr病毒（epstein-barr virus,EBV）中。