MCM7和CDC6蛋白表达与肝细胞癌病理特征的相关性

目的探讨微染色体维持蛋白7(MCM7)和细胞分裂周期蛋白6(CDC6)与肝细胞癌病理特征的相关性。方法选取68例原发性肝细胞癌患者,分别取癌组织和癌旁组织,采用免疫组化染色(SP)法检查MCM7和CDC6表达,比较癌组织及癌旁组织中MCM7阳性检出率及CDC6高表达占比;分析不同临床病理特征的肝细胞癌患者MCM7阳性占比及CDC6高表达占比,采取多因素logistics回归分析MCM7阳性、CDC6高表达的危险因素;3年院外随访,记录癌组织MCM7阳性及CDC6高表达患者术后3年存活率。结果癌组织内MCM7阳性检出率及CDC6高表达占比高于癌旁正常组织,差异有统计学意义(P<0.05);不同性别、年龄及乙肝抗原(HBsAg)阳性患者的MCM7阳性检出率及CDC6高表达占比差异无统计学意义(P>0.05);肿瘤直径≥5 cm、肿瘤淋巴结转移(TNM)分期Ⅲ~Ⅳ期、分化程度低分化、血清甲胎蛋白(AFP)≥400μg/L、有卫星结节患者的MCM7阳性检出率及CDC6高表达占比较高,差异有统计学意义(P<0.05);肿瘤直径≥5 cm、TNM分期Ⅲ~Ⅳ期、低分化、HBsAg阳性、血清AFP≥400μg/L、有卫星结节是MCM7阳性和CDC6高表达的危险因素(P<0.05);所有患者均获得3年院外随访,3年死亡率38.24%(26/68),存活率61.76%(42/68);MCM7阳性原发性肝癌患者死亡率44.00%(22/50)、存活率56.00%(28/50),MCM7阴性患者死亡率22.22%(4/18)、存活率83.05%(14/18),Kaplan-Meier生存分析显示癌组织MCM7阳性检出率越高患者存活率越低(P<0.05));CDC6高表达原发性肝癌患者死亡率50.00%(20/40)、存活率50.00%(20/40),CDC6低表达患者死亡率21.43%(6/28)、存活率78.57%(22/28),Kaplan-Meier生存分析显示癌组织CDC6表达越高患者存活率越低(P<0.05)。结论原发性肝细胞癌患者癌组织内MCM7和CDC6与疾病的进展有关,癌组织MCM7阳性及CDC6高表达均会影响患者的3年存活率。

circ_0048764在乳腺癌中的表达及意义

目的:探讨环状RNA(circRNA)_0048764(circ_0048764)在乳腺癌中的生物学功能和分子机制。方法:逆转录实时定量PCR(qRT-PCR)用于测量circ_0048764的表达。结果:circ_0048764在乳腺癌组织和细胞中上调。高表达的circ_0048764与乳腺癌患者的肿瘤大小(P=0.031)、淋巴结状态(P=0.004)、TNM分期(P=0.006)显著相关。结论:circ_0048764在乳腺癌组织和细胞中高表达,并且与患者的不良病理特征相关。

VEGFR-3 siRNA对人结肠癌细胞黏附力和侵袭性的抑制作用

目的:探讨VEGFR-3对人结肠癌细胞黏附力和侵袭性的影响。方法:构建携靶向VEGFR-3基因siRNA(small interfering RNA)表达载体,转染人结肠癌LoVo细胞,半定量RT-PCR和Western blotting检测转染前后LoVo细胞VEGFR-3 mRNA和蛋白表达的变化,基质-黏附实验检测细胞转染后的黏附能力,细胞侵袭实验检测转染后肿瘤细胞侵袭性的改变。结果:携靶向VEGFR-3基因siRNA的表达载体成功构建,RT-PCR检测转染siRNA后LoVo细胞VEGFR-3 mRNA表达水平降低;Western blotting检测转染siRNA后72 h LoVo细胞VEGFR-3蛋白表达下降,其表达相对值由(1.26±0.19)降至(0.39±0.12)(P<0.05)。转染siRNA 72 h后LoVo细胞的黏附能力显著下降[(0.626±0.047)vs(0.407±0.029),P<0.05];LoVo细胞穿膜细胞数(6.38±3.25)明显低于空白对照组(24.82±3.44)、非特异性对照组(23.58±3.73)(P<0.05)。结论:siRNA能够在LoVo细胞中引发RNA干扰效应,下调VEGFR-3基因的表达,进而抑制LoVo细胞的黏附能力和侵袭性。

成人直肠脱垂:如何选择手术方式?

成人直肠脱垂严重影响患者生活质量,病因复杂,手术仍是目前治疗该病的主要手段。具体术式较多,主要的手术方式有经会阴手术、经腹手术和经腹腔镜手术,至今仍没有一个有效的数据评价各种术式的有效性和适应证,最理想的治疗方法仍然具有争议。如何进一步提高手术疗效,恢复良好的排便功能,降低复发率,减少并发症,是目前关注的问题。治疗方法的个体化可能会达到最佳的治疗效果。直肠脱垂手术方法的选择主要依赖于患者的临床特点和医生的经验。术前评估应该包括患者的解剖缺陷,脱垂的原因、程度,考虑合并症、症状和肛门直肠功能评价,以及患者的整体状态,以确定是否适合手术及确定手术的最佳途径和具体手术方式。虽然现有的研究数据有限,但术前至少应评估患者术后并发症,术后排便功能如便秘、排便失禁和术后复发等问题。对直肠脱垂患者实行围手术期系统的功能评价和规范的个体化手术治疗可能会使患者得到一个理想的治疗效果。

轴突诱导因子4D和血管内皮生长因子在胰腺癌组织中的表达

目的探讨轴突诱导因子4D(Sema 4D)和血管内皮生长因子(VEGF)在胰腺癌组织中的表达及其临床意义。方法采用免疫组织化学法检测43例胰腺癌组织和10例癌旁组织中Sema 4D和VEGF的表达,分析Sema 4D和VEGF在胰腺癌组织中表达的相关性,以及胰腺癌组织中Sema 4D和VEGF的表达与临床病理特征、患者预后的关系。结果 Sema 4D和VEGF在胰腺癌组织中的阳性表达率分别为51.2%(22/43)和46.5%(20/43),在癌旁组织中的阳性表达率分别为10.0%(1/10)和20.0%(2/10),Sema 4D和VEGF在胰腺癌组织中的阳性表达率均显著高于癌旁组织(P<0.01)。胰腺癌组织中Sema 4D和VEGF的表达呈正相关(r=0.445,P<0.05)。Sema 4D和VEGF的阳性表达均与肿瘤分期、淋巴结转移、脉管内瘤栓有关(P<0.05),与患者的性别、年龄、分化程度、肿瘤直径无关(P>0.05)。VEGF表达阳性者中位生存时间低于VEGF表达阴性者(P<0.05)。Sema 4D表达阳性者中位生存时间与Sema 4D表达阴性者差异无统计学意义(P>0.05)。结论 Sema 4D和VEGF在胰腺癌组织中异常表达可能与胰腺癌的发生发展有一定关系,且二者可能对诱导血管新生具有协同效应;VEGF的表达与胰腺癌预后有关。

胰腺癌中低氧诱导因子-1α和轴突诱导因子4D的表达及其临床意义

目的:研究低氧诱导因子-1α(hypoxia inducible factor-1α,HIF-1α)和轴突诱导因子4D(Semaphorin 4D,Sema4D)在胰腺癌组织中的表达,探讨两者之间的相关性及其临床意义。方法:采用免疫组织化学(immunohistochemistry,SP)法检测天津医科大学附属肿瘤医院和邯郸市中心医院82例胰腺癌组织和相应癌旁组织中HIF-1α和Sema4D的表达,采用Chi-square检验分析HIF-1α和Sema4D在不同组织中的表达差异,采用Chi-square检验分析HIF-1α和Sema4D与患者的性别、年龄、分化程度、肿瘤大小、胰腺癌分期、淋巴结转移、神经受侵、脉管内瘤栓等的相关性。HIF-1α和Sema4D在胰腺癌组织中的表达的相关性采用Mc Nemar检验分析其相关性。HIF-1α和Sema4D对胰腺癌患者生存率的影响分析采用Kaplan-meier法,生存曲线的比较采用Log-rank检验。Cox回归模型多因素分析方法,分析HIF-1α和Sema4D是否胰腺癌独立预后因素。结果:HIF-1α和Sema4D的阳性表达主要在细胞质内,呈棕黄色颗粒。HIF-1α和Sema4D在胰腺癌组织中的阳性表达率分别为52.4%(43/82)和51.2%(42/82),显著高于两者在癌旁组织的表达,差异有统计学意义(P<0.05)。HIF-1α的异常表达与胰腺癌分期(χ~2=11.398,P=0.000)、淋巴结转移(χ~2=20.341,P=0.000)、神经受侵(χ~2=23.478,P=0.000)、脉管内瘤栓(χ~2=8.281,P=0.000)相关,Sema4D的异常表达与胰腺癌分期(χ~2=7.212,P=0.007)、淋巴结转移(χ~2=60129,P=0.013)、神经受侵(χ~2=25.794,P=0.000)、脉管内瘤栓(χ~2=6.678,P=0.010)相关。HIF-1α和Sema4D的表达之间存在正相关性(κ=0.438,P=0.000)。单因素生存分析HIF-1α(χ~2=12.098,P=0.001)、Sema4D(χ~2=9.644,P=0.002)是影响胰腺癌的预后因素,Cox分析显示2者均不是影响胰腺癌的独立预后因素。结论:胰腺癌组织中存在HIF-1α和Sema4D表达的上调,两者具有明显相关性,与胰腺癌淋巴结转移、神经受侵、脉管内瘤栓有关,HIF-1α、Sema4D的表达可能提示胰腺癌患者分期较晚和预后不良。

VEGFR-3 siRNA体外对人结肠癌细胞生长的抑制作用

目的:探讨血管内皮生长因子受体-3(VEGFR-3)在肿瘤细胞生长中的作用.方法:根据人VEGFR-3mRNA编码序列,设计3个RNA干涉靶点,构建siRNA表达载体,并转染到LoVo细胞中,应用半定量RT-PCR检测基因转染前后VEGFR-3mRNA表达水平的变化,采用四甲基偶氮唑蓝显色法(MTT)观察细胞生长变化,并应用流式细胞计数仪分析细胞凋亡的情况.结果:针对VEGFR-3基因的siRNA表达载体成功构建,psiRNA-VEGFR-3可显著抑制LoVo细胞中VEGFR-3基因的表达,转染psiRNA-VEGFR-3细胞生长明显抑制,并可诱导LoVo细胞出现凋亡.结论:psiRNA-VEGFR-3载体能够在LoVo细胞中引发RNA干扰效应,下调VEGFR-3基因的表达可以抑制细胞增殖,诱导细胞凋亡.

腹腔镜改良直肠前切除术治疗重度直肠脱垂的临床体会

目的:评价腹腔镜改良直肠前切除术治疗重度直肠脱垂的临床效果与应用价值。方法:回顾分析为25例确诊为成人完全型重度直肠脱垂患者行腹腔镜改良直肠前切除术的临床资料,分析治疗效果。结果:25例手术均获成功。手术时间平均(110.0±19.0)min,出血量平均(80.0±20.5)ml,切除标本长度平均(18.5±3.0)cm,术后平均住院(7.0±3.3)d。无严重并发症发生,平均随访(36.0±11.3)个月,23例(92.0%)无复发,2例(8.0%)轻度复发。结论:腹腔镜改良直肠前切除术治疗成人重度直肠脱垂安全、可靠,疗效确切,复发率低,具有明显的微创优势,临床疗效较满意。

生长因子受体结合蛋白1表达和微血管密度与肝癌临床病理特征的关系

目的探讨肝癌组织中生长因子受体结合蛋白1(Gab1)表达和微血管密度(MVD)及其与临床病理特征的关系。方法选择2014年1月至2016年12月邯郸市中心医院40例肝癌患者手术切除的癌组织标本和其中10例癌旁组织标本为研究对象。采用免疫组织化学法检测肝癌组织和癌旁组织中Gab1和血小板内皮黏附分子34(CD34)的表达,并以CD34在肝癌组织和癌旁组织中的表达值作为MVD,分析其与临床病理学特征的关系。结果肝癌组织和癌旁组织中Gab1阳性表达率分别为47. 5%(19/40)和10. 0%(1/10);肝癌组织中Gab1阳性表达率高于癌旁组织(χ^2=10. 040,P <0. 05)。肝癌组织和癌旁组织中MVD分别为33. 72±5. 20和8. 57±4. 35;肝癌组织中MVD高于癌旁组织(P <0. 05)。肝癌组织中Gab1的表达与患者的性别、年龄、乙型肝炎病毒无相关性(P> 0. 05),而与肿瘤组织分化程度、肿瘤大小、肿瘤分期、门静脉癌栓、甲胎蛋白(AFP)水平显著相关(P <0. 05)。MVD与肿瘤大小、肿瘤分期、门静脉癌栓显著相关(P <0.05),与患者的性别、年龄、乙型肝炎病毒、肿瘤组织分化程度及AFP水平无相关性(P>0.05)。结论肝癌组织中Gab1表达和MVD高于癌旁组织,且与肝癌分期、肿瘤大小、门静脉癌栓、AFP水平有关。

腹腔镜改良直肠前切除治疗老年直肠脱垂的疗效

目的:探讨采用腹腔镜改良直肠前切除治疗老年直肠脱垂的可行性、安全性和临床疗效.方法:收集2005-01/2013-12收治的确诊为直肠脱垂的老年患者,腹腔镜手术组20例和开腹手术组20例,对其临床资料进行比较分析.结果:两组患者均获得成功,手术切除标本平均长度21.7 cm±2.2 cm和22.3 cm±2.1 cm,差异无统计学意义(P>0.05).平均出血量118.0 mL±40.8 mL和156.0 mL±33.5 mL,肠道功能恢复时间2.3 d±0.9 d和3.9 d±0.7 d,术后平均住院时间6.3 d±1.1d和9.9 d±1.7 d,两组平均手术时间146.0 min±22.3 min和115.0 min±16.5 min,差异有统计学意义(P<0.05).并发症发生率分别为15%和45%,腹腔镜手术组术后并发症发生率低,与开腹手术组比较差异有统计学意义(P<0.05).术后平均随访36.0 mo±11.3 mo,两组复发率差异无统计学意义(P>0.05).结论:采用腹腔镜改良直肠前切除术治疗老年直肠脱垂安全、可靠,具有明显的微创优势,临床疗效比较满意.

胰腺癌神经浸润机制研究新进展

胰腺癌机制复杂,致死率高,至今其疗效仍较差,5年生存率极低。胰腺癌中PNI发生率高,是造成胰腺癌术后局部复发的主要因素,是胰腺癌不良预后因素之一。然而,胰腺癌PNI发生的分子生物学原因仍然不清楚,胰腺组织及周围具神经纤维丰富,是胰腺癌PNI的发生发展的解剖学基础。胰腺癌生长的微环境,癌组织介导的神经重塑,都可能是肿瘤细胞PNI的原因。胰腺癌乏氧微环境、慢性炎性微环境以及高糖微环境的协同作用,形成了复杂的网络调控作用,肿瘤基质及肿瘤微环境的网络调控,使神经与肿瘤细胞之间的相互作用发生和形成了PNI。

腹腔镜与开腹改良直肠前切除术治疗成人重度直肠脱垂的对比研究

目的：对比分析腹腔镜与开腹改良直肠前切除术治疗成人重度直肠脱垂的临床疗效及安全性。方法：回顾分析2009~2015年采用腹腔镜改良直肠前切除术治疗的30例成人重度直肠脱垂患者的临床资料,并与同期开腹手术治疗的30例患者进行对比分析。结果：两组手术均获成功,手术切除标本长度平均（24.2±4.0）cm与（23.6±4.4）cm,两组相比差异无统计学意义。术中出血量平均（85.5±24.1）ml与（181.7±44.2）ml,肠道功能恢复时间平均（2.3±1.8）d与（4.2±1.5）d,术后平均住院（7.7±1.1）d与（11.4±1.8）d,手术时间平均（170.0±11.8）min与（120.9±20.3）min,两组相比差异有统计学意义。并发症发生率分别为16.7%与46.7%,腔镜组术后并发症发生率低,两组相比差异有统计学意义。术后平均随访（36.0±11.3）个月,两组复发率差异无统计学意义。结论：腹腔镜改良直肠前切除术治疗成人重度直肠脱垂安全、可靠,可取得与开腹手术相同的效果,复发率低,具有明显的微创优势,术后康复快,临床疗效较满意。

轴突诱导因子4D和Ki67在胰腺癌中的表达及其与临床病理特征的关系

目的探讨轴突诱导因子4D(Sema4D)和Ki67在胰腺癌中的表达与临床病理特征的关系。方法采用免疫组化(SP)法检测2013年1月-2016年12月邯郸市中心医院收集的40例胰腺癌组织及10例癌旁组织中Sema4D和Ki67蛋白的表达,并分析其与临床病理学特征的关系。2组间计数资料的比较采用χ~2检验,相关性分析采用Spearman秩相关法。结果 Sema4D和Ki67在胰腺癌组织中的阳性表达率分别为47.5%(19/40)和45.0%(18/40),高于二者在癌旁组织中的表达,差异均有统计学意义(χ~2值分别为10.040、10.000,P值分别为0.020、0.022)。Sema4D和Ki67的异常表达在不同肿瘤分期、淋巴结是否转移的患者中存在显著差异(χ~2值分别为6.352、4.912、12.031、6.465,P值分别为0.013、0.028、0.001、0.025)。Sema4D和Ki67的表达呈正相关(r=0.347,P=0.028)。结论在胰腺癌组织中Sema4D和Ki67较其在胰腺癌癌旁组织中的表达明显升高,二者具有协同作用,与胰腺癌肿瘤分期、淋巴结转移有关。

成人直肠脱垂个体化手术治疗的临床经验

目的探讨成人直肠脱垂个体化手术治疗的临床经验和选择。方法回顾性分析我院手术治疗成人直肠脱垂患者78例的临床资料。经腹直肠前切除及固定术11例,经腹腔镜直肠前切除及固定术20例,经会阴直肠乙状结肠部分切除术治疗23例,采用PPH术25例。结果所有患者手术均顺利,无围手术期死亡病例。术后随访8~48个月,经腹直肠前切除及固定术、经腹腔镜直肠前切除及固定术及采用PPH术者无复发,经会阴直肠乙状结肠部分切除术者3例轻度复发。结论对直肠脱垂患者实行围手术期系统的功能评价和规则的个体化的手术治疗,患者可能会得到一个理想的治疗效果。

聚丙烯补片在修补腹壁巨大切口疝中的应用

目的分析应用聚丙烯补片,采用肌肉后腹膜前修补术(sublay法)修补腹壁巨大切口疝的临床效果。方法回顾分析应用聚丙烯补片对腹壁巨大切口疝患者36例行肌肉后腹膜前修补术(sublay法)的临床资料。结果 36例患者均获痊愈,随访2年无复发。结论应用聚丙烯补片肌肉后腹膜前修补术对腹壁巨大切口疝进行修补,操作简单,效果良好,且费用相对较低。

经腹改良直肠前切除治疗直肠脱垂11例报告

目的探讨经腹改良直肠前切除治疗成人完全型直肠脱垂的临床疗效。方法对我科2005～2010年收治的11例成人完全型直肠脱垂采用经腹改良直肠前切除、悬吊固定术治疗的临床资料作回顾性分析。结果 11例患者全部治愈,术后平均住院时间8d。随访8～48个月无复发。结论经腹改良直肠前切除、直肠悬吊手术治疗成人完全型直肠脱垂疗效比较满意。该手术方式可以治疗直肠本身以及乙状结肠病变,而且可以纠正肠外因素,降低手术并发症。

轴突诱导因子4D对人胰腺癌细胞增殖、迁移及血管生成的影响

目的探讨siRNA沉默轴突诱导因子4D(Sema4D)对人胰腺癌细胞增殖、迁移及血管生成的影响。方法设计合成Sema4D-siRNA,转染至人胰腺癌细胞系中,瞬时转染48 h后利用反转录-聚合酶链反应检测转染前后Sema4D mRNA表达的变化;瞬时转染72 h后利用Western blot法检测转染前后Sema4D蛋白表达的变化;采用四甲基偶氮唑蓝显色法观察转染后细胞生长变化;Transwell迁移实验、划痕修复实验检测转染后人胰腺癌细胞迁移性的改变;小管形成实验观察转染后人胰腺癌细胞培养上清液对血管形成能力的影响。结果转染siRNA后,人胰腺癌细胞中Sema4D mRNA和Sema4D蛋白表达、胰腺癌细胞的生长速度均较阴性对照组和空白对照组下降(P<0.05);Transwell迁移实验和划痕修复实验显示,胰腺癌细胞穿膜细胞数和划痕修复率显著低于阴性对照组和空白对照组(P<0.05);小管形成实验显示,转染siRNA组、阴性对照组和空白对照组血管形成数目分别为0.50±0.02、1.45±0.60、1.37±0.52,组间比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论 Sema4D-siRNA能够在胰腺癌细胞中引发RNA干扰效应,下调Sema4D基因表达,抑制胰腺癌细胞增殖,使胰腺癌细胞迁移能力明显下降,抑制血管生成。

VEGFR-3siRNA对人结肠癌细胞生长和侵袭力的影响

目的探讨不同浓度血管内皮生长因子受体-3(vascular endothelial growth factor receptor-3,VEGFR-3)小分子干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)对人结肠癌细胞生长和侵袭力的影响。方法设计合成VEGFR-3siRNA,以不同剂量转染到人结肠癌细胞株(human colon adenocarcinoma cell line,LoVo)细胞中,采用四甲基偶氮唑蓝显色法[3-(4,5 dimethl-2 thiahiazoyi)-3,5-di-phenyl-tetrazolium bromide,MTT]观察细胞生长变化,应用半定量逆转录聚合酶链反应、Western-blot检测转染前后VEGFR-3 mRNA和VEGFR-3蛋白表达的变化,基质黏附实验检测细胞转染后黏附能力,体外侵袭试验检测转染后肿瘤细胞侵袭性的改变。结果 VEGFR-3 siRNA引起LoVo细胞生长抑制,在一定范围内呈浓度、时间依赖性;转染siRNA后VEGFR-3 mRNA和VEGFR-3蛋白表达下降;转染siRNA 72 h后LoVo细胞的黏附能力显著下降,与对照组相比差异均有统计学意义(P<0.05);VEGFR-3 siRNA使LoVo细胞侵袭能力明显下降,LoVo细胞穿膜细胞数明显低于空白对照组、非特异性对照组(P <0.05)。结论 VEGFR-3siRNA能够在LoVo细胞中引发RNA干扰效应,下调VEGFR-3基因的表达可以抑制细胞增殖,使LoVo细胞黏附力和侵袭能力明显下降。

MCM2、MCM4、MCM10在胰腺癌中的表达和预后价值及其作用机制

基于生物信息学分析MCM2、MCM4、MCM10在胰腺癌中的表达及其与患者预后的关系,胰腺癌组织MCM2、MCM4、MCM10的表达明显高于正常胰腺组织(P<0.05),MCM2、MCM4、MCM10 mRNA表达水平与胰腺癌患者的无病生存率(DFS)、总生存率(OS)显著相关(P<0.05)。高表达MCM2、MCM4、MCM10的胰腺癌患者总生存期较差(P<0.05)。进一步探讨MCM2、MCM4、MCM10参与胰腺癌发生发展的机制,发现MCM2、MCM4、MCM10表达与胰腺癌的发生具有明显的相关性,与其具有相互作用的蛋白有MCM5、MCM6、RPA3、RPA1、POLA2、ORC2、ORC3、DBF4、CDC6、GINS2等。MCM2、MCM4、MCM10主要富集在前复制复合体的活化、DNA复制、DNA合成、DNA复制的启动、细胞核DNA的复制、CDC6相关的复制起点识别复合物、皮瓣转移、介导通路、体温自动调节通路等信号通路中。MCM2、MCM4、MCM10在胰腺癌组织中呈现高表达,与患者预后显著相关。MCM2、MCM4、MCM10表达具有明显相关性,其构成功能模块,通过前复制复合体的活化、DNA复制、DNA合成、DNA复制的启动、细胞核DNA的复制、CDC6相关的复制起点识别复合物等生物过程参与胰腺癌细胞的发生与发展。MCM2、MCM4、MCM10在胰腺癌中功能模块的发现有望为胰腺癌的靶标治疗提供新的方向。

靶向血管内皮生长因子受体3基因的小干扰RNA表达载体构建及其生物学效应

目的构建靶向血管内皮生长因子受体3(VEGFR-3)基因的小干扰RNA(siRNA)表达载体(psiRNA-VEGFR-3),并观察其抑制人结肠癌细胞株LoVo细胞中VEGFR-3基因表达的效果及生物学效应。方法设计并合成1对VEGFR-3编码基因的反向重复序列,定向克隆至载体pSUPER,构建siRNA真核表达载体,利用脂质体2000将构建的psiRNA-VEGFR-3载体转入LoVo细胞中,应用半定量RT-PCR检测基因转染前后VEGFR-3mRNA表达水平的变化,四甲基偶氮唑蓝法观察细胞生长变化、凋亡率及细胞周期的变化。结果成功构建针对VEGFR-3基因的siRNA表达载体。psiRNA-VEGFR-3可显著抑制LoVo细胞中VEGFR-3基因的表达(P<0.01);转染psiRNA-VEGFR-3后能够诱导LoVo细胞发生明显凋亡。结论psiRNA-VEGFR-3载体能够在LoVo细胞中引发RNA干扰效应,通过下调VEGFR-3基因表达可以抑制细胞增殖,诱导LoVo细胞发生明显凋亡。