口腔鳞癌组织中LINC01605的表达及对细胞侵袭、迁移的影响

目的:探究LINC01605在口腔鳞癌组织中的表达及对细胞侵袭、迁移的影响。方法:收集口腔鳞癌病人的口腔鳞癌组织及相对应的癌旁组织标本各40例,分析口腔鳞癌组织中LINC01605的表达与临床病理特征的关系。将处于对数期的口腔鳞癌细胞CAL-27随机分为:CK组(正常培养)、si-NC组(转染si-NC)、si-LINC01605组(转染si-LINC01605)、pcDNA组(转染pcDNA)、pcDNA-LINC01605组(转染pcDNA-LINC01605);qRT-PCR检测组织和细胞中LINC01605表达;CCK-8法检测细胞增殖;平板克隆实验检测细胞克隆形成能力;Transwell实验检测细胞侵袭;划痕实验检测细胞迁移;Western blotting检测细胞中增殖细胞核抗原(PCNA)、基质金属蛋白酶(MMP)-2、MMP-9、神经型钙黏素(N-cadherin)、上皮型钙黏蛋白(E-cadherin)表达;体内移植瘤实验检测肿瘤生长情况。结果:口腔鳞癌组织中LINC01605表达高于癌旁组织(P<0.01);LINC01605表达与TNM分期、分化程度、淋巴结转移有关(P<0.05~P<0.01);与CK组、si-NC组比较,si-LINC01605组CAL-27细胞中吸光度值、克隆形成率、侵袭细胞数目、划痕愈合率、PCNA、MMP-2、MMP-9、N-cadherin蛋白表达及裸鼠体内移植瘤质量均降低(P<0.01),E-cadherin蛋白表达升高(P<0.01);与CK组、pcDNA组比较,pcDNA-LINC01605组CAL-27细胞中对应指标变化趋势与上述相反(P<0.01)。结论:LINC01605在口腔鳞癌组织中高表达,沉默LINC01605可抑制CAL-27细胞侵袭和迁移。

circBACH1靶向miR-4500调控口腔鳞状细胞癌HSC3细胞增殖、迁移及侵袭的分子机制研究

目的:探讨circBACH1对口腔鳞状细胞癌HSC3细胞生物学行为的影响及其可能作用机制。方法:体外培养HSC3细胞,分为si-NC组、si-circBACH1组、miR-NC组、miR-4500组、si-circBACH1+anti-miR-NC组、si-circBACH1+anti-miR-4500组,分别转染si-NC、si-circBACH1、miR-NC、miR-4500 mimics、si-circBACH1与anti-miR-NC、si-circBACH1与anti-miR-4500。qRT-PCR检测口腔鳞状细胞癌组织、癌旁组织及各组HSC3细胞中circBACH1、miR-4500的表达量;CCK-8、平板克隆形成实验分别检测细胞增殖及克隆形成能力;划痕实验与Transwell小室实验分别检测细胞迁移及侵袭能力;双荧光素酶报告基因实验检测circBACH1对miR-4500的靶向调控作用;Western blotting检测E-cadherin、N-cadherin的蛋白表达量。结果:与癌旁组织比较,口腔鳞状细胞癌组织中circBACH1的表达量明显升高(P<0.01),miR-4500的表达量明显降低(P<0.01)。与si-NC组比较,si-circBACH1组HSC3细胞活力明显降低(P<0.01),细胞克隆形成数和侵袭细胞数均明显减少(P<0.01),划痕愈合率和N-cadherin蛋白水平均明显降低(P<0.01),E-cadherin蛋白水平明显升高(P<0.01)。与miR-NC组比较,miR-4500组HSC3细胞活力明显降低(P<0.01),细胞克隆形成数和侵袭细胞数均明显减少(P<0.01),划痕愈合率和N-cadherin蛋白水平均明显降低(P<0.01),E-cadherin蛋白水平明显升高(P<0.01)。WT-circBACH1与miR-4500 mimics共转染组HSC3细胞的荧光素酶活性明显低于WT-circBACH1与miR-NC共转染组(P<0.01)。qRT-PCR实验结果显示,与pcDNA组比较,pcDNA-circBACH1组miR-4500的表达量降低(P<0.05);与si-NC组比较,si-circBACH1组miR-4500的表达量升高(P<0.05)。与si-circBACH1+anti-miR-NC组比较,si-circBACH1+anti-miR-4500组HSC3细胞活力明显升高(P<0.01),细胞克隆形成数和侵袭细胞数均明显增多(P<0.01),划痕愈合率和N-cadherin蛋白水平均明显升高(P<0.01),E-cadherin蛋白水平明显降低(P<0.01)。结论:干扰circBACH1表达可通过负向调控miR-4500的表达从而抑制口腔鳞状细胞癌HSC3细胞增殖、克隆形成、迁移及侵袭。