西妥昔单抗对脑缺血再灌注大鼠神经元凋亡、胶质细胞活化及脑组织淀粉样前体蛋白表达的影响

目的:探讨西妥昔单抗对大鼠脑缺血再灌注后神经元凋亡、胶质细胞活化及脑组织淀粉样前体蛋白(APP)表达的影响。方法:27只SD大鼠随机分为假手术组、缺血再灌注组、西妥昔单抗组,每组9只。结扎大脑中动脉制备缺血再灌注模型,立即经侧脑室注射给予西妥昔单抗(106μg/d),持续7 d。每组选取3只,在术后第3和7天进行神经功能评分。每组分别在缺血再灌注术后第3和7天处死3只,取脑组织制备冰冻切片,用免疫荧光染色观察APP及胶质细胞胶质纤维酸性蛋白(GFAP)表达,用TUNEL染色法检测神经元凋亡指数。提取新生大鼠大脑皮层组织制备胶质细胞悬液,培养的胶质细胞换成含有西妥昔单抗(10μg/mL)的无糖无血清培养基在缺氧培养箱中培养2 h,然后换成正常糖/血清的培养基在正常氧的培养箱中继续培养6 h,收集细胞,观察胶质细胞GFAP荧光强度的变化,对照组不进行缺氧/复氧处理,缺氧/复氧组不加西妥昔单抗。结果:与假手术组比较,缺血再灌注组大鼠神经功能评分升高,凋亡指数增加,胶质细胞GFAP免疫荧光强度增强,APP表达升高(P<0.05)。与缺血再灌注组相比,西妥昔单抗组神经功能评分下降,凋亡指数降低,GFAP免疫荧光强度减弱,APP表达下降(P<0.05)。体外实验结果显示,与对照组比较,缺氧/复氧组胶质细胞GFAP免疫荧光强度增强,而西妥昔单抗组较缺氧/复氧组降低(P<0.05)。结论:西妥昔单抗能促进脑缺血再灌注大鼠神经功能恢复,其机制可能与减少APP的表达、抑制神经元凋亡及胶质细胞活化有关。

体外诱导大鼠骨髓间质干细胞分化为胰岛素分泌细胞(英文)

目的探索大鼠骨髓间质干细胞体外诱导分化为胰岛素分泌细胞的方法。为解决胰岛移植物来源匮乏这一问题提供新的思路。方法 采用横向分化技术,将成年大鼠骨髓间质干细胞诱导成为胰岛素分泌细胞。间接免疫荧光法鉴定诱导前后细胞nestin、胰岛素、胰高血糖素、生长抑素及Pdx-1的表达,RT-PCR法检测诱导前后细胞nestin,胰岛素-1,葡萄糖转运子-2,葡萄糖激酶及其转录因子Isl-1,Pdx-1,Pax-4和Pax-6 mRNA的表达;测定24 h胰岛素分泌量和胰岛素刺激实验评价诱导前后细胞的功能。结果 诱导5 h,nestin阳性细胞为(44.6±7.3)％;诱导24 h,nestin阳性细胞增至(61.8±8.4)％;此后,nestin阳性细胞数目开始下降,诱导第14天后,nestin表达基本消失。诱导后的胰岛素分泌细胞可以表达胰岛素、胰高血糖素、生长抑素和Pdx-1等蛋白;表达胰岛素-1、葡萄糖转运子-2、葡萄糖激酶及其多种转录因子mRNA;胰岛素分泌量增加;胰岛素刺激实验反应敏感等。而诱导前MSCc不县备上述特点。结论 大鼠骨髓间质干细胞体外可以诱导成为胰岛素分泌细胞,为胰岛移植开辟新的研究思路。

新生大鼠神经干细胞的分离培养

目的 探讨新生大鼠神经干细胞的分离培养方法及其外源报告基因在神经干细胞中的表达情况。方法 采用无血清细胞培养技术，间接免疫细胞化学染色法及其绿色荧光蛋白转导技术。结果 从新生大鼠脑组织分离的细胞具有连续克隆能力，表达神经上皮干细胞蛋白，诱导分化后的细胞表达成熟神经细胞和星形胶质细胞特异性的蛋白。绿色荧光蛋白报告基因转导神经干细胞后能够有效表达。结论 该方法分离培养的神经干细胞保持了干细胞的未分化属性，具有自我更新、增殖能力和多分化潜能，而且外源报告基因在神经干细胞中能够有效表达。

黄芩甙体外诱导大鼠骨髓基质细胞成为神经细胞

目的 :探讨黄芩甙体外诱导成年大鼠骨髓基质细胞 (MSCs)分化为神经细胞的条件。方法 :采用黄芩甙诱导 6h后 ,继续维持诱导 6d。免疫细胞化学染色评价神经细胞特异性烯醇化酶 (NSE)、神经微丝 (NF)、胶质纤维酸性蛋白 (GFAP)和波形蛋白 (vimentin)的表达率 ;Hoechst332 58染色评价细胞存活率。结果 :诱导 6d后MSCs形态改变 ,胞体成锥形 ,突起交织成网。免疫细胞化学染色NSE、NF、GFAP和vimentin表达率分别为 70 5 %± 1 1 6 % ,68 3 %± 1 3 4% ,<1 % ,<1 % ,细胞存活率为 88 4%± 5 0 %。结论 :黄芩甙可以诱导成年大鼠MSCs在体外分化成为神经细胞 。

NF-κB在黄芩甙诱导大鼠骨髓基质细胞分化为神经细胞中的作用(英文)

目的 研究核因子-κB(NF-κB)在中药单体黄芩甙体外诱导骨髓基质细胞分化为神经细胞的作用。方法 实验分为黄芩甙组和对照组。黄芩甙组采用黄芩甙作为主要诱导剂,诱导成年大鼠骨髓基质细胞6d。对照组仅用无血清培养基诱导。采用间接免疫荧光染色检测神经细胞标记蛋白和NF-κB亚基P65的表达。结果黄芩甙诱导6d,骨髓基质细胞形成较典型的神经细胞形态,同时表达多种神经细胞标记蛋白;对照组未见神经细胞标记蛋白表达。而且,对照组诱导6d,P65信号出现核移位,胞浆中信号明显减弱到(18.4±3.0)％,黄芩甙组P65信号(84.8±3.0)％主要仍在胞浆。结论 黄芩甙可以抑制NF-κB的活化,在骨髓基质细胞诱导分化为神经细胞过程中可能起到一定的作用。 [中国当代儿科杂志,2003,5(1):1—4]

体外培养大鼠胰岛细胞凋亡的实验研究

目的 研究体外培养条件下大鼠胰岛凋亡发生及其机制。方法 采用网状纤维染色观察大鼠胰岛分离前后网状纤维分布情况 ;Hoechst 332 5 8荧光染色法 ,透射电镜法测定培养 1,3 ,7,14,2 1d胰岛细胞凋亡率 ;放射免疫法测定胰岛素 2 4h累积分泌量 ;MTT比色法间接测定细胞存活率 ;免疫细胞化学ABC法评价Fas,Fas配体 (Fas-L)阳性蛋白表达率。结果 大鼠分离后的胰岛网状纤维消失。培养 3d后 ,电镜观察可见胰岛细胞核皱缩 ,染色质边集于核膜处等典型的凋亡表现。培养 3d ,胰岛凋亡率为 (7.6± 5 .8) % ;随培养时间延长 ,胰岛凋亡率逐渐增加 ,培养 14,2 1d ,胰岛凋亡率分别为 (6 3.0± 2 .6 ) % ,(4 7.2± 8.1) %。免疫细胞化学检测Cateninβ表达培养 7d消失 ;Fas阳性蛋白表达率从培养 3d时 (8.1± 1.8) %上调至 14d ,2 1d时 (38.5± 4.7) % ,(35 .6±6 .5 ) % ;Fas -L在培养 3d前无表达 ,培养 7d为 (6 .8± 3 .2 ) % ,14d ,2 1d显著上调 ,分别达到 (19.6± 4.8) % ,(12 .4± 7.1) %。同时 ,胰岛素 2 4h累积分泌量 ,细胞存活率逐渐下降。结论 大鼠胰岛在体外培养条件下易发生凋亡 ;Fas,Fas-L可能参与胰岛凋亡事件的发生和发展。

成年大鼠骨髓基质细胞体外诱导分化为NSE阳性细胞

目的 研究成年大鼠骨髓基质细胞 (MSCs)在体外分化为NSE阳性细胞的方法。方法 采用 β -巯基乙醇预诱导MSCs2 4h ,再诱导 5h。神经细胞特异性烯醇化酶 (NSE)免疫细胞化学染色鉴定、计数诱导前后的细胞。结果 诱导后MSCs形态改变 ,胞体呈锥形 ,突起交织成网。免疫细胞化学染色NSE表达率达到 (6 3.7±4.5 ) %。结论 β -巯基乙醇可以诱导成年大鼠MSCs在体外分化成为NSE阳性细胞。

高血糖对体外培养的胎鼠胰岛Pdx-1基因的影响

目的 :研究在体外培养时 ,高血糖对胎鼠胰岛胰和十二指肠同源盒基因 - 1(Pdx - 1)和胰岛素基因的影响。方法 :胶原酶法分离胎鼠胰岛 ,分别在葡萄糖浓度为 5 .5mmol/L ,11.1mmol/L ,33.3mmol/L的条件下培养 2 4h。采用胰岛素含量测定、胰岛素释放实验评价胰岛功能 ;免疫细胞化学染色检测Pdx - 1在细胞内的表达 ;逆转录PCR(RT -PCR)检测Pdx - 1和胰岛素mRNA表达水平。结果 :高血糖组 1(11.1mmol/L)胎鼠单位重量胰岛细胞内胰岛素水平和刺激指数高于低糖组 (5 .5mmol/L)和高血糖组 2 (33.3mmol/L)。而且 ,高血糖组胎鼠胰岛Pdx - 1蛋白的核移位率和mRNA表达水平均高于低糖组 ,但是高糖组 2胰岛素mRNA表达低于高血糖组 1,与低糖组无显著性差异。结论 :高血糖刺激可以促进胎鼠Pdx - 1表达和转录活性 ,可能是影响胰岛功能和 β细胞对葡萄糖刺激敏感性增加的原因之一。

高压氧对缺氧缺血性脑损伤新生大鼠内源性神经干细胞和髓鞘的保护作用

目的以前的研究已经证实高压氧(HBO)对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤(HIBD)有保护作用,但其确切机制尚不清楚。该研究从HBO对内源性神经干细胞(NSCs)和髓鞘的影响来探讨HBO保护作用的机制。方法7日龄SpragueDawley新生大鼠随机分为4组:正常对照组、HIBD组、高压空气治疗组(HBA)和高压氧治疗组(HBO)。HBA组和HBO组于缺氧缺血后1h内分别行HBA和HBO处理,每日1次连续7d。BrdU免疫组化检测在体内源性神经干细胞(NSCs)。Westernblot测定nestin的表达。髓鞘碱性蛋白(MBP)免疫组化检测髓鞘损伤。结果HIBD后3周,HIBD组缺血侧的室管膜下(SVZ)区和海马齿状回(DG)BrdU阳性细胞数目明显少于正常对照组(均P<0.01),HBO组SVZ区BrdU阳性细胞增多不明显,但DG区BrdU阳性细胞明显增多,与HIBD组比较差异有显著性意义(P<0.05)。HIBD组nestin表达较正常对照组下降,HBO组表达增加,HBA组增加不明显。HIBD后1周,HIBD组MBP免疫组化损伤评分增加,HBO组与HBA组损伤评分均有减轻,HBO组与HIBD组比较差异有显著性(P<0.01),但与HBA组比较差异无显著性(P>0.05)。结论HBO可减少新生大鼠HIBD后内源性NSCs的死亡和减轻髓鞘损伤,这可能是HBO的保护作用机制之一。

核因子-κB在黄芩甙诱导大鼠骨髓基质细胞分化为神经细胞中的作用

目的研究核因子 κB(NF- κB)在黄芩甙诱导骨髓基质细胞分化为神经细胞中的作用。方法在无血清条件下 ,以中药单体黄芩甙作为主要诱导剂 ,诱导大鼠骨髓基质细胞分化为神经细胞 ;同时以无血清培养基为对照组。采用免疫荧光细胞化学染色检测神经细胞标记蛋白表达和NF-κB亚基P6 5核移位情况 ;蛋白质印迹 (Westernblot)检测细胞中NF-κB抑制蛋白 (IκBα)表达变化 ;原位末端标记 (TUNEL法 )染色评价细胞凋亡率。结果黄芩甙诱导后细胞形成较典型的神经细胞形态 ,同时表达多种神经细胞标记蛋白。对照组无类似情况 ,但出现P6 5由胞浆向胞核移位 ,细胞内IκBα表达水平显著降低 ,细胞凋亡率为 (2 8.2±6.1) % ;黄芩甙诱导后P6 5信号主要仍在胞浆中表达 ,细胞内IκBα表达水平降低程度较少 ,细胞凋亡率〔(12 .2± 2.8) %〕 ,也显著低于对照组 (P <0. 0 1)。结论黄芩甙可抑制NF κB的活化 。

骨髓间充质干细胞外泌体可减少脊髓损伤后A1型星形胶质细胞的活化

背景:课题组前期研究发现,骨髓间充质干细胞来源外泌体可减少脊髓损伤区域反应性星形胶质细胞的数量,有利于损伤后运动功能的改善。目的:探索骨髓间充质干细胞外泌体对脊髓损伤后A1型星形胶质细胞活化的影响及其在损伤后修复中的作用。方法:培养SD大鼠骨髓间充质干细胞,利用超速离心法提取细胞上清液中的外泌体并进行鉴定。将80只成年雄性SD大鼠随机分为假手术组、脊髓损伤模型组、骨髓间充质干细胞组、骨髓间充质干细胞外泌体组,每组20只。除假手术组外,其余3组均使用Allen法制备脊髓损伤模型,术后2 h通过尾静脉注射等体积的PBS、骨髓间充质干细胞悬液、骨髓间充质干细胞外泌体悬液,每隔2d注射1次,共注射3次。脊髓损伤术前、术后1,3,7,14,28 d采用BBB评分法评估后肢运动功能;术后7 d通过苏木精-伊红染色、透射电镜观察脊髓组织形态,免疫荧光检测A1型星形胶质细胞数量、NeuN阳性神经元数量、caspase-3阳性凋亡细胞数量,ELISA法检测脊髓组织肿瘤坏死因子α、白细胞介素1α水平,Western blot检测脊髓组织C3、GFAP的表达水平。结果与结论:①骨髓间充质干细胞外泌体在透射电镜下呈茶托状,表达外泌体标志CD63、CD9;②骨髓间充质干细胞外泌体减少脊髓组织炎症细胞浸润、减轻髓鞘脱失、轴突退变,降低炎症因子肿瘤坏死因子α、白细胞介素1α水平和C3的表达水平,降低A1型星形胶质细胞数量,减少细胞凋亡,提高残余神经元数量,改善肢体运动功能;③以上结果提示,骨髓间充质干细胞外泌体能减少脊髓A1型星形胶质细胞的活化,促进脊髓损伤后运动功能恢复。

大鼠脑缺血急性期脑组织miRNA的表达变化

目的:观察脑缺血急性期大鼠脑组织小RNA(microRNA,miRNA)差异表达。方法:采用双颈总动脉结扎方法制备大鼠脑缺血模型(2VO),脑缺血后30min,将动物断头取皮层脑组织,miRNA表达谱芯片检测miRNA差异表达。结果:与正常组比较,2VO术后60min大鼠皮层脑组织中35个已知miRNA表达上调2倍以上;89个表达下调2倍以上等,其中促进凋亡和影响细胞周期的miRNA,如miR-23、-24、-26、-30、-103、-107等显著上调,与神经干或前体细胞分化有关的let-7、miR-124、-128、-9等也显著上调。结论:miRNA在脑缺血早期表达即有明显差异,可能在大鼠脑缺血早期病理生理变化中发挥作用。

麝香提取物对大鼠皮层神经细胞炎性损伤的保护作用

目的研究麝香提取物(musk extract,ME)对脂多糖(LPS)诱导大鼠大脑皮层神经细胞炎性损伤的保护作用及其可能机制。方法分别培养新生大鼠大脑皮层神经细胞和星形胶质细胞(AC),使用终浓度为10mg/LLPS及ME18mg/L、36mg/L、72mg/L、144mg/L的分别作用于纯化的星形胶质细胞24h,收集条件培养液(ACM)。在神经细胞培养体系中分别加入ACM,采用MTT法及AO/EB染色法测定神经细胞存活率和凋亡率;ELISA法检测ACM中所含炎症因子的变化。结果 ME18mg/L、36mg/L、72mg/L及144mg/L组的神经细胞存活率(%)分别为52.55±3.52、55.77±2.36、64.89±3.45及73.67±1.80,较模型组(43.62±4.51)均显著提高(P<0.05);细胞凋亡率(%)分别为68.11±2.16、44.27±3.68、32.56±2.14及21.89±2.46,与模型组(71.33±3.25)比较,均显著下降(P<0.05,P<0.01);ME组ACM中IL-6呈指数降低,且均呈剂量依赖性。结论麝香提取物对脂多糖所致神经细胞炎性损伤具有显著的保护作用,以144mg/L浓度最佳,其可能通过减少星形胶质细胞分泌IL-6起作用。

中成药天智颗粒对血管性痴呆大鼠脑内神经细胞增殖的影响

目的观察中成药天智颗粒对血管性痴呆大鼠学习记忆能力和神经前体细胞与星形胶质细胞增殖水平的影响。方法老年雄性SD大鼠192只,随机分为治疗组、模型组、假手术组和正常对照组,每组48只。治疗组、模型组采用双侧颈总动脉结扎方法建立血管性痴呆大鼠模型,于造模60d后治疗组大鼠应用天智颗粒5g/(kg·d)治疗30d。采用三等分Y型电迷宫测试各组大鼠的学习记忆能力,应用免疫组织化学尿嘧啶脱氧核苷(BrdU)和胶质纤维酸性蛋白(GFAP)染色方法标记并观察神经细胞增殖变化,以比较各组大鼠学习记忆能力和神经细胞增殖的变化规律和差异。结果与正常对照组相比,假手术组大鼠的学习记忆能力和免疫组织化学检测结果无明显变化。经天智颗粒治疗30d后,治疗组大鼠学习记忆能力明显改善,与模型组相比差异有统计学意义(P<0.05),BrdU阳性细胞显著增加(P<0.05),而星形胶质细胞明显减少(P<0.05);但与正常对照组相比,其学习记忆能力、BrdU阳性细胞和星形胶质细胞数量仍未恢复至正常水平(P<0.05)。结论天智颗粒可通过促进神经前体细胞的增殖而抑制星形胶质细胞的增殖,从而改善血管性痴呆大鼠的学习记忆能力。

黄芩苷抑制大鼠胰岛细胞瘤细胞株增殖的分子机制研究

目的探索黄芩苷对大鼠胰岛细胞瘤细胞的影响及作用的分子机制。方法应用光学显微镜、MTT测定、流式细胞仪、报告基因分析以及WesternBlot等方法,探讨黄芩苷对细胞增殖和细胞周期的影响及作用分子机制。结果黄芩苷处理大鼠胰岛细胞瘤细胞后,分裂相细胞显著减少,细胞增殖受到抑制,细胞的生存率下降,随黄芩苷浓度的增加和/或作用时间的延长,抑制率呈上升趋势,并出现凋亡细胞;胰岛细胞瘤细胞株凋亡过程中caspase3活性以时间依赖性方式增高;通过流式细胞仪检测细胞周期发现,随黄芩苷处理浓度增加,S期细胞逐渐减少,从38.2%下降至9.4%,G0/G1期细胞所占百分率逐渐增加,从56.4%上升至85.9%,细胞出现G1阻滞;同时,细胞周期蛋白基因启动子活性显著下调,细胞周期蛋白表达明显降低。结论黄芩苷能诱导细胞凋亡,其作用可能与caspase3活化有关;黄芩苷还能以剂量依赖性方式和时间依赖性方式抑制胰岛细胞瘤细胞增殖,黄芩苷诱导细胞周期蛋白基因转录和表达下调可能在其中起着重要作用。

MicroRNA-9-1慢病毒载体的构建及其对小鼠骨髓间质干细胞诱导分化为神经细胞的影响

目的:探讨microRNA-9-1在体外诱导小鼠骨髓间充质干细胞(MSCs)向神经细胞分化中的作用。方法:构建小鼠microRNA-9-1慢病毒载体(microRNA-9-1-LV)并感染小鼠MSCs,筛选最适感染复数(MOI);实验分为未感染组、感染组(感染microRNA-9-1-LV)、阴性对照组(感染FU-RNAi-NC-LV);采用β-巯基乙醇诱导感染后小鼠MSCs分化为神经细胞。倒置荧光显微镜下观察MSCs感染后荧光表达情况;采用免疫细胞化学染色检测神经元烯醇化酶(NSE)、神经微管结合蛋白(MAP-2)和胶质纤维酸性蛋白(GFAP)的表达变化;PT-PCR检测MAP-2 mRNA的表达变化;MTT方法检测细胞存活率。结果:(1)阳性克隆PCR证明小鼠mi-croRNA-9-1慢病毒载体构建成功,孔稀释法测定病毒滴度为1×1012 TU/L。(2)倒置显微镜下观察小鼠microR-NA-9-1慢病毒载体感染成功,MOI值为20,感染4 d时感染率最高,细胞存活率较高,感染率可达91.3%±4.2%。(3)β-巯基乙醇可以诱导MSCs向神经细胞分化,其中以感染组诱导效果最佳,NSE和MAP-2的表达率显著高于其它各组(P<0.05)。结论:(1)MicroRNA-9-1-LV可高效感染小鼠MSCs。(2)感染miRNA-9-1-LV后MSCs经β-巯基乙醇诱导向神经细胞分化比率增加。

Let-7c慢病毒载体对骨髓间充质干细胞体外诱导分化为神经细胞的影响

背景:微小RNA参与调控干细胞增殖、分化、衰老等过程,通过了解Let-7家族成员Let-7c对骨髓间充质干细胞向神经细胞分化的影响可以为干细胞移植治疗提供新思路。目的:探讨Let-7c慢病毒载体在体外诱导大鼠骨髓间充质干细胞向神经细胞分化中的作用。方法:构建Let-7c上调及下调慢病毒载体并体外转染大鼠骨髓间充质干细胞,筛选最适转染复数;实验分为未转染组、阴性转染组(转染空白慢病毒)、转染上调组(转染LV-rno-Let-7c-up)、转染下调组(转染LV-rno-Let-7c-5p-inhibition);采用法舒地尔诱导转染后的大鼠骨髓间充质干细胞分化为神经细胞,倒置荧光显微镜下观察骨髓间充质干细胞转染后荧光表达,免疫细胞化学染色检测神经元标记物NSE和MAP-2的表达,RT-PCR检测MAP-2 m RNA的表达,MTT法检测细胞存活率。结果与结论:倒置荧光显微镜下观察大鼠LV-rno-Let-7c-up和LV-rno-Let-7c-5p-inhibition慢病毒载体转染成功。法舒地尔可以诱导骨髓间充质干细胞分化为神经细胞,与阴性转染组相比,转染上调组的诱导效率升高(P<0.05),NSE和MAP-2表达率上升(P<0.05),转染下调组的诱导效率下降,NSE和MAP-2表达率下降(P<0.05)。转染LV-rno-Let-7c-up后骨髓间充质干细胞经法舒地尔诱导向神经细胞分化比率增加,Let-7c可能具有促进骨髓间充质干细胞向神经细胞分化的作用。

骨髓间充质干细胞来源的外泌体用于大鼠脊髓损伤修复的初步探索

目的:研究大鼠骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)分泌的外泌体(exosomes)对脊髓损伤大鼠行为学、损伤处活化星形胶质细胞和残余神经元数量的影响,初步探索BMSCs-exosomes作为脊髓损伤的细胞替代疗法的可行性。方法 :采用全骨髓培养法培养BMSCs,流式细胞术鉴定其表面标志CD90和CD34。收集BMSCs上清液,超速离心法提取并标记外泌体,电镜观察其结构,Western blot法检测其CD63和CD9的表达水平。将外泌体作用于脊髓损伤大鼠,于损伤后各时点进行后肢运动功能评价,并于预定时点处死大鼠取损伤脊髓段,尼氏染色法观察损伤脊髓形态,免疫荧光法检测反应性星形胶质细胞和残余神经元的数量。结果:BMSCs分泌的外泌体电镜下呈"茶托状"结构,Western blot法检测其阳性表达CD63和CD9。脊髓损伤后14d和28 d治疗组神经功能有一定程度改善,与损伤组间差异有统计学意义(P<0.05)。损伤后14 d治疗组较之损伤组的尼氏体结构更完整、分布更匀称,崩解凝聚减少。治疗组损伤后7 d、14 d和28 d反应性星形胶质细胞数量较损伤组明显降低(P<0.05)。损伤后7 d、14 d和28 d治疗组残余神经元数量高于相应时点损伤组(P<0.05)。结论:BMSCs分泌的外泌体可减少脊髓损伤区域反应性星形胶质细胞的数量,减少神经元的死亡,有利于损伤后后肢运动功能改善。

黄芩甙拮抗大鼠神经元和星形胶质细胞氧应激损伤

目的探索过氧化氢 (H2 O2 )致星形胶质细胞损伤的实验条件 ,研究黄芩甙对大鼠神经元和星形胶质细胞氧应激损伤的保护作用。方法体外培养大鼠前脑星形胶质细胞和神经元 ,分别应用H2 O2 、黄芩甙及两者联用处理 ,应用MTT分析法测定细胞活力或存活率。结果不同浓度H2 O2 对星形胶质细胞存活率的影响各组间差异有显著性 (F =2 8 5 6 9,P <0 0 1)。同一浓度的H2 O2 对不同接种密度细胞的损伤程度不同 (F =5 4 39,P <0 0 1)。在 2 5～ 4 0 μmol/L浓度范围内 ,黄芩甙不影响各组神经元和星形胶质细胞的存活率 (神经元 ,F =0 4 9,P >0 0 5 ;星形胶质细胞 ,F =1 0 0 1,P >0 0 5 )。但黄芩甙对H2 O2 所致神经元和星形胶质细胞氧应激损伤有拮抗作用 (神经元 ,F =2 4 384 ,P <0 0 1;星形胶质细胞 ,F =5 0 0 0 ,P <0 0 1) ,黄芩甙浓度越高 ,则细胞存活率越高。结论构建了一个H2 O2 氧化损伤星形胶质细胞的模型。在 2 5～4 0 μmol/L浓度范围内 ,黄芩甙对神经元和星形胶质细胞均无毒性作用。但黄芩甙能够拮抗H2 O2 所致的神经元和星形胶质细胞氧化损伤 ,而且这种作用呈剂量依赖性。