液相色谱-串联质谱法同时测定7种抗抑郁类和5种抗精神病类药物的血药浓度

目的：建立同时测定血清中7种抗抑郁类药物和5种抗精神病类药物浓度的液相色谱-串联质谱（HPLC-MS/MS）方法。方法：血清样品中加入还阳酚（内标,西地那非中间产物）,采用乙腈直接沉淀法处理样品。分析柱为XbridgeTMPhenyl柱（150mm×2.1mm,5μm）;流动相为含0.02%甲酸水溶液-含0.02%甲酸乙腈溶液（35：65）,等度洗脱,流速为0.3mL·min-1,进样量为20μL。采用电喷雾离子源,多离子反应监测（MRM）,正离子扫描进行测定。结果：7种抗抑郁类药物和5种抗精神病类药物线性范围在2~1000μg·L-1,线性相关系数均大于0.9931,各浓度的批内和批间RSD〈10%,提取回收率为102%~112%,方法准确度为89.3%~107.9%。结论：本方法操作简便,特异性强,灵敏度高,可同时进行7种抗抑郁类药物和5种抗精神病类药物的血药浓度监测。

浅谈Ⅰ期临床试验受试者招募筛选信息管理系统的使用

目的:介绍上海市徐汇区中心医院临床试验研究中心的Ⅰ期临床试验受试者招募筛选信息管理系统的功能和实际应用。方法:该系统利用人体的重要生物特征指纹,并配合身份证的验证和近照的比对,能快速、准确地发现不符合试验要求的受试者。结果和结论:目前已经建立405例健康受试者的信息记录。受试者信息电子化提高了筛选的效率,节约人力资源和时间,方便研究者对受试者进行管理,保证临床试验的质量。

LC-MS/MS法测定人血浆中西布曲明代谢物(M_2)

西布曲明代谢物M2(N-双脱甲基西布曲明)是减肥药西布曲明(N-[1-[1-(4-氯苯基)环丁基]-3-甲基丁基]-N,N-二甲基胺,sibutramine)的主要活性代谢产物,其体内浓度较低,难以用常规的HPLC-UV法进行测定.国内至今未有西布曲明血药浓度测定的相关报道,为了解西布曲明制剂的体内过程,我们参考有关文献[1],采用液相色谱-质谱/质谱(LC-MS/MS)法建立了西布曲明主要活性代谢产物M2的血药浓度分析方法,可较好地满足研究工作的需要. 1 材料和方法 1.1 仪器 Waters 2690高效液相色谱仪(美国Waters公司);QuattroLC质谱仪(英国质谱公司,micromass).XW-80A旋涡混合器(上海医科大学仪器厂);CQ50超声波清洗器(上海超声波仪器厂);80-2型离心机(上海手术器械厂);LNG-T83台式快速离心浓缩干燥器(江苏太仓医用器械厂);SHB-Ⅲ循环多用水泵(郑州长城仪器厂);TGL.16G台式高速离心机(上海医用分析仪器厂).

LC-MS/MS法测定尿样中19种滥用药物

目的:建立一种可以同时测定尿样中19种滥用药物的LC-MS/MS法,了解药物滥用者的药物使用情况。方法:采用LC-MS/MS对尿样进行定量分析。结果:尿样中19种滥用药物在相应的浓度范围内线性关系良好,最低检出限为1-100ng·ml-1,其中52.63%≤10ng·ml-1;对本地区部分滥用药物依赖性患者尿样测定结果表明,吗啡、可待因、甲基苯丙胺、海洛因、美沙酮为吸毒者常用的药物。结论:所建立的LC-MS/MS法操作简便、特异性强、灵敏度高,能满足临床对滥用药物监测的需要,且能扩展至其他生物样品的监测。

雷诺嗪缓释片体外释放度的测定

目的建立雷诺嗪缓释片的体外释放度测定方法。方法以0.9%的盐酸水溶液为溶出介质,溶出方法为转篮法(100 r.min-1)。结果采用紫外分光光度法在272 nm测定雷诺嗪的浓度,其检测线性范围为10～200 mg.L-1(r=0.999 9),平均回收率为98.04%(RSD=1.26%);3批样品在2、6、12 h的释放量分别为标示量的30%、60%、70%以上。结论该方法准确、可靠,可用于该制剂的释放度测定。

关于煤电联营状况的综述

煤炭是我国能源安全的基石，也是实现国民经济持续快速发展的保障。随着石油、天然气和水电等能源的快速增长，煤炭近几年在能源生产和消费结构中的比例有所下降，但其主导地位没有发生根本性变化。从能源利用方面分析，按同等发热量来计算，国际天然气和石油价格一般为动力煤炭的2—3倍；我国燃油的价格要比动力煤高4—6倍，

基于DEA方法的内蒙古区域经济效益分析的实证研究

文章应用数据包络分析方法,通过建立具体的指标体系,对内蒙古自治区区域经济效益进行了实证研究。其结果表明,数据包络分析方法在评价区域经济效益的问题上是有效的,可以较好地反映内蒙古自治区盟市真实的经济情况。

LC-MSMS法测定血浆中甲氯噻嗪的浓度

目的:建立血浆中甲氯噻嗪的LC-MSMS定量测定方法。方法:以双氢克尿噻为内标,血浆样品经碱化后用含5%异丙醇的乙酸乙酯溶液提取,采用液质联用色谱法进行MRM扫描分析,色谱柱为CAPCELLPAKC18MG(50mm×2.0mm,5μm),流动相为20mmolL乙酸胺水-乙腈(64:36),离子选择通道分别为甲氯噻嗪:358.2321.9amu;双氢克尿噻:296.3268.9amu。甲氯噻嗪、双氢克尿噻的保留时间分别为1.6min和1.0min。结果:本文所建立的血浆样品中甲氯噻嗪液质联用色谱测定方法,血浆内源性物质不干扰样品峰,相对回收率为93.7%～105.4%;绝对回收率为71.2%～78.4%;日间和日内相对标准差均小于6.04%。血浆中的最低定量限为0.2ngmL(SN≥20:1),线性范围为0.2ngmL～51.2ngmL。结论:本方法操作简便,特异性强,灵敏度高,取血量少,符合生物样品的分析要求,可以用于甲氯噻嗪药代动力学研究及临床测定。

煤电联营企业经济状况效率分析与实证

文章应用数据包络分析方法,通过建立具体的指标体系,提出效率的相对有效性这一概念并给予证明,对煤电联营企业经济状况的效率进行实证研究。其结果表明,DEA方法在评价企业的经济状况效率问题上是有效的,可以较好的反映企业的真实经济情况。

苜蓿miRs表达谱分析及跨界潜力miRs初步筛选

为探明宁夏苜蓿耐旱新品系‘新盐52号’(XY52)的miRNA表达谱,并筛选有跨界研究价值的microRNA(miR),以‘中苜一号’(ZM1)为参照,对ZM1和XY52进行高通量miRs组学测序和分析(RNA-seq);通过生物信息学技术筛选差异表达miRs及预测靶基因,并对预测靶基因进行GO和KEGG富集分析;然后运用RT-qPCR技术对10个miRs进行检测和分析。结果表明,①成功构建了2种苜蓿miR表达谱,ZM1和XY52中分别检测到656和703个miRs,其中已知miRs分别为433和480个,新预测miRs数量均为233个;②2种苜蓿中共检测到21个差异表达miRs,其中novel-miR54、miR156f和miR166a表达量较高,并且novel-miR54在XY52中表达量极显著高于ZM1(P<0.01),miR156f在ZM1中的表达量极显著高于XY52(P<0.01);③5个已知有跨界调控功能miRs中,miR166a在ZM1和XY52中均为表达水平最高的miR;品种之间,miR166a在XY52中的表达量较ZM1极显著上调(P<0.01);④KEGG通路和GO功能富集分析发现差异表达的21个miRs共预测得到623个靶基因,主要与RNA转运、ABC转运蛋白和泛素介导的蛋白水解等信号通路有密切关系。以上结果为解析苜蓿品种miRs差异表达及研究苜蓿源miRs调控奶牛体内基因奠定初步基础。

冠心病中医证型血清Hcy与血浆vWF Ps hs-CRP TXB_2 6-keto-PGF_(1α)相关性研究

目的:对冠心病中医各证型Hcy水平与血浆vWF、Ps、hs-CRP、TXB2、6-keto-PGF1α水平相关性的临床研究,为冠心病的中医辨证分型提供客观依据,指导冠心病Hcy的辨证论治。方法:将冠心病患者152例中医辨证分为心血瘀阻、痰阻心脉、阴寒凝滞、心肾阴虚、气阴两虚、阳气虚衰6组,测定血清Hcy、血浆vWF、Ps、hs-CRP、TXB2、6-keto-PGF1α。结果:血清Hcy及血浆vWF、Ps、6-keto-PGF1α、TXB2水平心血瘀阻、痰阻心脉两型均高于心肾阴虚、气阴两虚两型(P<0.05)。冠心病各证型组间血浆hs-CRP水平两两比较均无显著性差异(P>0.05)。心血瘀阻、痰阻心脉两型血清Hcy水平与血浆vWF、Ps、TXB2水平呈正相关关系(P<0.01)。心肾阴虚、气阴两虚两型血清Hcy水平与血浆6-keto-PGF1α水平呈负相关关系(P<0.05)。冠心病各证型组血清Hcy水平与血浆hs-CRP水平均呈正相关性(P<0.01)。结论:本研究提示,血清Hcy水平可作为冠心病的辨证分型的客观依据之一。心肾阴虚、气阴两虚两型Hcy主要是通过损伤内皮细胞的功能,治宜补虚;而心血瘀阻、痰阻心脉则是在损伤内皮细胞基础上,降低内皮细胞抗血栓能力,促使动脉粥样硬化,治宜祛邪。

HPLC法测定大黄凝胶剂中大黄素的含量

目的 :建立一种简便的测定大黄凝胶剂中大黄素含量的HPLC方法。方法 :色谱柱为DiamonsilTM(钻石 )C18柱 ( 2 5 0mm× 4 .6mm ,5 μm) ;流动相为甲醇 - 0 .1%磷酸溶液 ( 90∶10 ) ;检测波长为 2 88nm ;流速为 1mL/min。大黄素的保留时间为 9.91min ,凝胶剂预处理采用流动相超声溶解法。结果 :大黄素在 0 .2 0 0 0～ 0 .80 0 0 μg/mL范围内呈良好的线性关系 (r =0 .9994 ) ;平均回收率为 10 0 .9% ;平均加样回收率为 99.96% ;RSD为 0 .83 %～ 1.0 5 % (n =5 )。结论 :本法简便可靠 ,可较好地满足大黄凝胶剂质量控制的需要。

静态平衡仪在脑卒中患者平衡功能定量评估中的应用

目的:探讨静态平衡仪和Fugl-Meyer平衡功能评定表(FM-B)在脑卒中偏瘫患者康复中对平衡功能评定的临床实用性和相关性。方法:对40例脑卒中偏瘫患者,在平衡训练前后分别应用静态平衡仪和FM-B进行专人测试。静态平衡仪测试分别在睁眼和闭眼状态下进行,对双下肢负荷比例偏差、重心标准偏差、超出目标数据比例、恢复到目标内时的平均时间4个测试数据进行分析。结果:康复治疗前后比较,静态平衡仪检测双下肢负荷比例偏差、重心标准偏差差异有非常显著性意义(P<0.001),超出目标数据比例、恢复到目标内时的平均时间差异有显著性意义(P<0.05);FM-B与静态平衡仪各检测指标均呈负相关;睁眼与闭眼状态比较差异有显著性意义(P<0.05)。结论:静态平衡仪各检测指标能客观、定量地反映脑卒中偏瘫康复患者的静态平衡功能状态。

冠心病中医证型与血浆vWF、Ps、hs-CRP、FIB、TXB_2、6-keto-PG_(1α)关系的临床研究

目的:探讨血浆v WF、Ps、hs-CRP、FIB、TXB2、6-keto-PGF1α与冠心病中医证型的关系。方法:将152例冠心病患者辨证分为心血瘀阻、痰阻心脉、阴寒凝滞、心肾阴虚、气阴两虚、阳气虚衰,测定血浆v WF、Ps、hs-CRP、FIB、TXB2、6-keto-PGF1α值。结果:心血瘀阻、痰阻心脉、心肾阴虚、气阴两虚4型血浆v WF、Ps、FIB、TXB2水平明显升高,心血瘀阻、痰阻心脉2型高于心肾阴虚、气阴两虚2型,心血瘀阻、痰阻心脉、心肾阴虚、气阴两虚4型血浆6-keto-PGF1α水平明显降低,心肾阴虚、气阴两虚证型2型低于心血瘀阻和痰阻心脉2型。各证型血浆hs-CRP水平比较差异无统计学意义。结论:提示心肾阴虚、气阴两虚两型病机为炎症损伤血管内皮,心血瘀阻、痰阻心脉是炎症损伤血管内皮基础上,抗血栓能力下降,导致动脉粥样硬化。

银杏叶提取物对高同型半胱氨酸血症血管内皮NF-κBp65、iNOS、MCP-1表达影响的实验研究

目的探讨银杏叶提取物(GBE)对高同型半胱氨酸血症(HHcy)、血管内皮核转录因子(NF-κBp65)、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、单核细胞趋化因子-1(MCP-1)表达的干预作用。方法雄性Wistar大鼠51只随机分为空白对照组、模型组、叶酸组和银杏叶4组,采用液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)法测定血清同型半胱氨酸(Hcy)水平;免疫组化法观察MCP-1、iNOS、NF-κBp65的表达,HE染色观察主动脉组织形态学变化。结果模型组血清Hcy水平明显高于空白对照组(P<0.01)。模型组内皮细胞内NF-κBp65、iNOS及内皮下MCP-1呈较多棕黄色颗粒的表达,银杏叶组和叶酸组则呈较少棕黄色颗粒表达,空白对照组只有极少量棕黄色颗粒的表达。结论GBE可能通过减少HHcy主动脉内皮细胞NF-κBp65、iNOS及MCP-1表达,明显改善血管内皮功能,延缓HHcy动脉粥样硬化的进程。

国产格列本脲和二甲双胍复方制剂在健康志愿者的药代动力学和生物等效性

目的 研究国产复方格列本脲和盐酸二甲双胍胶囊单剂量人体的药代动力学特性和生物等效性。方法 以国产格列本脲片和进口盐酸二甲双胍片为标准参比制剂,入选的20名受试者随机交叉口服单剂量试验与参比制剂,用液相色谱-质谱法测定血浆中格列本脲和二甲双胍的浓度。结果 格列本脲的药代动力学参数分别为:AUC0-t为(603.32±196.61)和(581.70±195.01) ng.h.mL-1,Cmax为(123.46±27.03)和(128.28±3.67) ng.mL-1,tmax为(2.8±0.7)和(2.6±0.6 ) h,t1/2为(6.54±1.24)和(6.89±1.73) h。二甲双胍药代动力学参数分别为:AUC0-t为(7832.97±2603.38)和(7765.52±2870.85) ng. h.mL-1,Cmax为(1377.55±476.60)和(1367.40±551.19 )ng.mL-1,tmax为(2.7±0.9)和(2.0±0.5 ) h,t1/2为(5.72±1.24)和(5.81±1.51) h。试验制剂中格列本脲的相对生物利用度为(104.82±19.27)%,二甲双胍的相对生物利用度为(107.30±46.40)%。结论 试验制剂与参比制剂具有生物等效性。

进口和国产盐酸特拉唑嗪片的人体生物等效性研究

目的：比较进口和国产盐酸特拉唑嗪片剂药动学及人体生物等效性。方法：24名健康男性受试者随机交叉口服盐酸特拉唑嗪受试制剂和参比制剂2 mg,血浆样品经直接沉淀后,采用液相色谱-串联质谱（LC-MS/MS）法测定特拉唑嗪浓度,计算药动学参数。对主要药动学参数进行统计学分析,评价两制剂的生物等效性。结果：盐酸特拉唑嗪受试制剂和参比制剂主要药动学参数分别为：t1/2（9.55±1.19）和（9.95±1.45）h,tmax为（1.20±0.88）和（1.28±1.28）h,cmax为（57.59±16.61）和（57.12±17.83）ng/mL,AUC0～48为（621.96±152.54）和（607.52±126.03）ng.h.mL^-1,AUC0～∞为（640.81±156.06）和（628.52±127.69）ng.h.mL-1。受试制剂的相对生物利用度为（102.10±9.91）%。结论：盐酸特拉唑嗪受试制剂和参比制剂具有生物等效性。

蟾毒灵介导JNK信号通路诱导人胰腺癌细胞的凋亡

目的:研究蟾毒灵诱导人胰腺癌细胞凋亡以及凋亡相关基因表达的JNK信号转导通路,揭示其抗胰腺癌的部分机制.方法:MTT法观察蟾毒灵对人胰腺癌BxPC-3细胞的生长抑制作用;0.16、0.32、0.64mg/L蟾毒灵分别作用人胰腺癌BxPC-3细胞48h后,流式细胞仪(flow cytometry,FCM)检测细胞周期和细胞凋亡;Western印迹法检测蟾毒灵作用BxPC-3细胞后SAPK/JNK信号通路的激活情况,荧光定量PCR检测Survivin基因mRNA的表达水平;并比较阻断JNK信号通路后丹参酮ⅡA对胰腺癌细胞凋亡Survivin基因mRNA的表达.结果:MTT法测得蟾毒灵对人胰腺癌BxPC-3细胞具有显著的抑制作用,其作用效果与剂量和作用时间成正相关;0.16、0.32、0.64mg/L浓度蟾毒灵作用人胰腺癌细胞后的细胞凋亡率分别为19.36%±0.39%、40.69%±0.44%、59.63%±1.14%,与对照组2.24%±0.37%比较均有显著性差异(P<0.01);蟾毒灵作用人胰腺癌细胞1h后JNK信号通路被激活,2h达峰值;阻断JNK信号通路后,凋亡率明显降低(P<0.01);0.32mg/L蟾毒灵作用人胰腺癌细胞48h后Survivin mRNA的表达明显下降;阻断JNK信号通路后,蟾毒灵作用人胰腺癌细胞的Survivin mRNA的表达明显上升.结论:蟾毒灵通过JNK信号转导通路下调人胰腺癌BxPC-3细胞Survivin mRNA的表达,可能是其诱导胰腺癌细胞凋亡的机制.

LC-MS/MS测定人血浆中依折麦布和总的依折麦布含量及其药动学研究

目的建立测定人血浆中依折麦布和总的依折麦布浓度的LC-MS/MS方法,进行依折麦布片po给药的药动学研究。方法22名志愿者血样经叔丁基甲醚萃取吹干重组后进样测定依折麦布浓度,另取血样经β-葡萄糖苷酸酶水解后叔丁基醚萃取吹干重组后进样测定总的依折麦布浓度。分析柱:CapcellC18柱(2mm×50mm,5μm),内标(IS)13C6-依折麦布。流动相:5mmol.L-1醋酸铵水溶液(A泵)和乙腈(B泵)组成,梯度洗脱。采用电喷雾去质子化三重四极杆二级串联质谱,多反应监测方式(MRM)测定样品浓度,依折麦布的监测离子对为m/z408.5→m/z270.8,内标为m/z414.5→m/z276.8。结果依折麦布在0.020～20μg.L-1内线性关系良好,相关系数r=0.9994(n=9)。总的依折麦布在0.25～250μg.L-1内线性关系良好,相关系数r=0.9998(n=9)。最低定量线(LLOQ)、低、中、高浓度的依折麦布和总的依折麦布质控样品的日内、日间精密度均小于12%,方法回收率在97%～104%内。志愿者口服10mg依折麦布后采血72h,依折麦布和总的依折麦布的药动学参数分别为AUC0-inf(121.9±41.7)和(536.8±182.7)μg.h.L-1;AUC0-t(102.1±31.4)和(478.8±170.0)μg.h.L-1;ρmax(4.9±1.6)和(48.46±17.3)μg.L-1;tmax(5.2±6.4)和(1.5±0.9)h;t1/2(26.4±28.8)和(22.5±11.0)h;MRT(23.6±3.8)和(19.7±3.8)h。结论该方法符合生物样品分析要求,可用于依折麦布血浆浓度的测定,依折麦布和总的依折麦布的药动学参数与文献相近。

血清中美西律的柱前衍生化-液相色谱荧光检测

目的 建立血清中盐酸美西律的柱前衍生化 液相色谱荧光检测法。方法 血清样品用丙酮液直接沉淀蛋白后 ,定量加入荧光胺丙酮溶液 ,得盐酸美西律的荧光衍生物。采用AlltimaC1 8(15 0mm× 4 6mm ,5 μm)为分析柱 ;流动相为甲醇 水 2 4mol·L- 1 二乙胺 磷酸缓冲液 (pH 4 0 ) (70∶2 8∶2 ) ;荧光检测激发波长 (Ex)为 392nm ,发射波长(Em)为 4 80nm。盐酸美西律的保留时间为 6 5min。结果 盐酸美西律在 0 10 0～ 6 4 0 0mg·L- 1 线性关系良好。本法的最低检测质量浓度为 5 μg·L- 1 ,(S N≥ 4 )。批内、批间精密度为 1 34%～ 5 31%。结论 本法操作简便、有良好的灵敏度和专一性 。