磷恢复对磷饥饿铜绿微囊藻光合色素和部分抗氧化酶活性的影响

为探究磷饥饿及磷恢复对铜绿微囊藻光合色素、藻胆蛋白和抗氧化酶等生理指标的影响,将其进行磷饥饿处理7 d后再进行磷恢复,检测磷恢复前后铜绿微囊藻的藻细胞密度、叶绿素a、类胡萝卜素、藻蓝蛋白(phycocyanin,PC)、别藻蓝蛋白(allophycocyanin,APC)、藻红蛋白(phycoerythrin,PE)、丙二醛(malondialdehyde,MDA)和过氧化氢(H_(2)O_(2))含量及超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)活性的变化。结果表明,铜绿微囊藻磷饥饿处理7 d后,藻细胞密度为2.54×10^(7)cell·mL^(-1),显著低于对照组(3.11×10^(7)cell·m L^(-1))。磷恢复144 h后,处理组藻细胞密度为4.05×10^(7)cell·mL^(-1),仍显著低于对照组(4.32×10^(7)cell·mL^(-1));叶绿素a、类胡萝卜素和PC、APC、PE含量均呈现升高趋势,在144 h时分别达到5.96、1.44μg·mL^(-1)和0.031、0.02、0.065 mg·L^(-1);MDA、H_(2)O_(2)含量和SOD活性呈先上升后下降趋势,均在48 h达到最大值,较对照组分别增加36.2%、47.7%、51.1%。由此表明,磷恢复后铜绿微囊藻的藻细胞密度、叶绿素a、类胡萝卜素和藻胆蛋白含量虽呈升高趋势,但难以恢复到对照水平;MDA、H_(2)O_(2)含量及SOD活性的变化也说明,从磷饥饿到磷恢复后铜绿微囊藻藻细胞受到氧化损伤,并对细胞膜系统产生破坏。

微囊藻毒素-LR对凡纳滨对虾肝胰腺免疫酶活性及细胞凋亡的影响

为探究微囊藻毒素(Microcystin-LR,MC-LR)对凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei)肝胰腺毒性作用机理,通过血窦注射法,检测注射MC-LR后凡纳滨对虾肝胰腺和肌肉中毒素含量,肝胰腺免疫酶活力、细胞凋亡与周期的变化及凋亡相关基因表达量情况。结果表明,注射MC-LR后,肝胰腺与肌肉中毒素含量均在1 h达到最大值,分别为(6.12±0.45)、(5.00±0.19)μg·kg^(-1),且均极显著高于对照组和其他时间点(P<0.01);碱性磷酸酶(AKP),酸性磷酸酶(ACP)和溶菌酶(LZM)活力分别在8、24和8 h达到最高,分别比对照组增加23.8%、27.3%和124%,且均显著高于对照组(P<0.05);细胞凋亡率和G1期细胞所占比例显著上升(P<0.05),S、G2期细胞所占比例下降;CYC、AIF、Caspase-3和p53基因均呈先升后降趋势,CYC和p53相对表达量在24 h达到最高,AIF和Caspase-3相对表达量在48 h达到最高。研究结果表明,MC-LR进入对虾体内后,可快速转运到肝胰腺并影响其主要免疫酶活力,引发应激反应,进而引起细胞凋亡并诱导细胞周期阻滞于G1期,抑制细胞增殖。研究为探明MC-LR对凡纳滨对虾肝胰腺的毒性作用机制以及对虾健康养殖提供数据参考。

响应面法改良牟氏角毛藻培养基

为优化牟氏角毛藻的培养基配方,提高牟氏角毛藻生长速度及细胞密度,采用响应面法筛选f/2培养基中的NaNO_(3)、NaH_(2)PO_(4)·H2O、Na_(2)SiO_(3)和C6H8FeNO7质量浓度并进行验证。结果表明,根据单因素试验筛选出牟氏角毛藻相对适宜的营养盐质量浓度范围为:NaNO_(3)10~30 mg·L^(-1),NaH_(2)PO_(4)·H2O 1.0~3.0 mg·L^(-1),Na_(2)SiO_(3)20~80 mg·L^(-1),C6H8FeNO70.1~0.5 mg·L^(-1);通过响应面优化,4种营养盐对牟氏角毛藻生长的影响强弱依次为NaNO_(3)>Na_(2)SiO_(3)>NaH_(2)PO_(4)·H2O>C6H8FeNO7,最佳质量浓度分别为NaNO_(3)21.8 mg·L^(-1)、NaH_(2)PO_(4)·H2O 2.93 mg·L^(-1)、Na_(2)SiO_(3)54.2 mg·L^(-1)、C6H8FeNO70.158 mg·L^(-1)。使用优化后的培养基培养该藻,密度提高27.95%,显著高于f/2培养基组的细胞密度(P<0.05),第4天后试验组牟氏角毛藻光合系统PSⅡ最大光能转换效率显著高于对照组(P<0.05)。综上所述,该方法筛选得出的营养盐质量浓度可以显著提高牟氏角毛藻的生长速度及细胞密度,结果为牟氏角毛藻的高密度培养提供数据参考。

响应面法优化小新月菱形藻培养基

【目的】优化小新月菱形藻(Nitzschia closterium)培养基,筛选其生长的最佳营养盐浓度。【方法】采用响应面法,筛选f/2培养基中的NaNO_(3)、NaH_(2)PO_(4)·H_(2)O、Na_(2)SiO_(3)和C_(6)H_(8)FeNO_(7)浓度,优化小新月菱形藻的培养基配方并进行验证试验。【结果与结论】根据单因素试验筛选出小新月菱形藻相对适宜的营养盐浓度:NaNO_(3)为0.2、0.5和0.8 g/L,NaH_(2)PO_(4)·H_(2)O为0.005、0.0075和0.01 g/L,Na_(2)SiO_(3)为0.02、0.05和0.08 g/L,C_(6)H_(8)FeNO_(7)为0.001、0.002和0.003 g/L;通过响应面优化,4种营养盐对小新月菱形藻生长的影响强弱依次为:NaNO_(3)、NaH_(2)PO_(4)·H_(2)O、C_(6)H_(8)FeNO_(7)、Na_(2)SiO_(3),最佳浓度分别为NaNO_(3)0.5 g/L,NaH_(2)PO_(4)·H_(2)O 0.0075 g/L,Na_(2)SiO_(3)0.05 g/L,C_(6)H_(8)FeNO_(7)0.002 g/L,营养盐浓度过高或过低均会抑制小新月菱形藻生长;使用优化后的培养基培养该藻,藻细胞密度提高28.15%,显著高于f/2培养基组的细胞密度(P<0.05)。

微囊藻毒素对凡纳滨对虾肝胰腺组织蛋白表达的影响

在淡水池塘集约化养殖中,蓝藻水华爆发产生的微囊藻毒素(MC-LR)是制约南美白对虾养殖业健康可持续发展的瓶颈之一。本研究在分析MC-LR胁迫条件下凡纳滨对虾肝胰腺和肌肉中MC-LR含量的基础上,利用DIA高通量蛋白质组学技术探究对虾肝胰腺蛋白表达情况。结果表明:注射MC-LR 1 h后,肝胰腺和肌肉中毒素含量达到最高,分别为(6.12±0.45)和(5.00±0.19)μg·kg^(-1),随后逐渐降低,但肝胰腺中毒素含量始终显著高于肌肉;共鉴定820个差异蛋白,其中上调蛋白586个,下调蛋白234个。通过生物信息学分析发现,MC-LR胁迫显著影响溶酶体、RIG-Ⅰ样受体信号和白细胞介素-2等免疫通路;在能量代谢方面主要影响柠檬酸循环、淀粉与蔗糖代谢和戊糖与葡萄糖醛酸转换等,导致碳水化合物代谢紊乱;引起19个与细胞骨架相关的血影蛋白显著上调,破坏对虾肝胰腺细胞骨架。表明MC-LR主要对凡纳滨对虾肝胰腺的免疫、能量代谢和细胞骨架产生影响。